一株金黄色葡萄球菌信号分子AI-2的检测

检测一株金黄色葡萄球菌合成群体感应信号分子AI-2情况。在菌株培养上清液中加入哈维氏弧菌BB170培养4h,检测发光强度,反映AI-2合成情况。进一步改变温度、pH、碳源等培养条件,分析环境因素对AI-2合成的影响。结果表明,金黄色葡萄球菌在培养16h时,上清液中AI-2的诱导发光值达到最大,为8987,是阴性对照的4.84倍。温度37℃下,上清液中AI-2的诱导发光值最大,为6299,是阴性对照的3.39倍;pH 7时,上清液中AI-2的诱导发光值最大,为9408,是阴性对照的5.07倍;以乳糖为碳源,上清液中AI-2诱导发光值最大,为10343,是阴性对照的5.57倍。金黄色葡萄球菌具有AI-2合成能力,且环境因素会影响AI-2的合成。

群体感应淬灭酶LsrK蛋白表达纯化

对群体感应淬灭酶LsrK蛋白进行重组表达及纯化。构建重组工程菌Escherichia coli BL21(DE3)-pET-28a-lsrK,利用乳糖自诱导的方法诱导表达重组蛋白LsrK,并利用亲和层析和凝胶过滤层析进行纯化。LsrK蛋白经凝胶过滤层析后,纯度较高,蛋白浓度达到28.6mg/L发酵液,为进一步进行LsrK蛋白的结构解析及功能研究奠定了基础。