太平洋鳕神经坏死病毒衣壳蛋白(CP)的原核表达及条件优化

为深入研究太平洋鳕Gadus macrocephalus神经坏死病毒(Pacific cod nervous necrosis virus,PCNNV)衣壳蛋白(capsid protein,CP)的功能,将PCNNV cp基因连接到p ET-32a原核表达载体中,构建原核表达重组载体p EVCP,将其转化至大肠杆菌E.coli BL21(DE3)表达系统中进行融合表达,对诱导剂IPTG浓度、诱导时间和温度等诱导表达条件进行优化,采用SDS-PAGE及质谱技术鉴定表达产物。结果表明:本研究中成功构建了重组载体p EVCP,表达的目的蛋白相对分子质量约为55 000;目的蛋白经质谱鉴定,有6个肽段的氨基酸序列与预期一致;对重组菌株p EVCP/BL21的最佳诱导条件为IPTG浓度0.1 mmol/L、最佳诱导时间3 h、温度30℃。本研究结果可为后续冷水鱼类病毒疫苗的研制及病毒快速检测试剂盒的研发奠定基础。

不同形态饲料中添加壳寡糖对刺参生长和免疫的影响

试验以基础配方相同的粉状饲料和颗粒饲料饲喂初始体重为(2.41±0.01)g的刺参50 d。在基础饲料中添加0.50%的壳寡糖(chitosan-oligosaccharides,COS),配制3种试验饲料,分别为粉状料对照组、COS粉状料组和COS颗粒料组,研究壳寡糖对刺参生长性能和免疫的影响。结果显示:与对照组相比,处理组在生长性能上没有显著差异(P>0.05),其中,刺参末重由高到低的次序依次是:COS粉状料组>对照粉状料组>COS颗粒料组;COS颗粒料组的各项免疫指标均显著高于其他组别(P<0.05),COS粉状料组的各项免疫指标均显著高于对照组(P<0.05)。综合比较表明,壳寡糖粉状料更适合在养殖中推广,或者将壳寡糖颗粒饲料作为辅助补充应用于养殖中。