不同规格野生和养殖刺参体腔细胞数量与体腔液免疫酶活性的比较研究

为了比较野生和养殖刺参Apostichopus japonicus及不同规格间的免疫力差异,试验设置3个不同规格的养殖刺参组(体质量分别为30.00 g±9.83 g、70.00 g±7.83 g、110.00 g±10.68 g,记为30 g、70 g、110 g组),以及3个不同规格的野生刺参组(体质量分别为70.00 g±8.13 g、110.00 g±7.53 g、150.00 g±10.64 g,记为70 g、110 g、150 g组),通过比较不同组刺参体腔细胞密度、数量及免疫酶活性等方面的差异,系统地分析了体质量及生活环境与刺参免疫力的关系。结果表明:无论养殖刺参还是野生刺参,不同规格刺参体腔细胞密度无显著性差异(P>0.05),但150 g组野生刺参的球形细胞密度显著高于70 g和110 g组(P<0.05);同种规格下,养殖刺参和野生刺参体腔细胞密度无显著性差异(P>0.05),但110 g体质量组养殖刺参和野生刺参球形细胞和淋巴细胞密度有显著性差异(P<0.05);对于体腔液免疫酶指标,同种类型不同规格刺参差异并不一致,无一定的规律性,但同种规格下,养殖刺参和野生刺参主要免疫酶活力之间无显著性差异(P>0.05)。研究表明,不同生存环境不会影响刺参体腔细胞数量与体腔液免疫活性,本研究结果可为刺参免疫机制的研究提供基础数据。

哈氏刻肋海胆胚胎、幼体发育及人工养殖

为实现哈氏刻肋海胆(Temnopleurus hardwickii)的人工繁育,对其进行人工催产、授精、孵化、幼体培育及人工养成,并在显微镜下观察了哈氏刻肋海胆从受精卵到稚胆的发育过程。结果表明:通过注射KCl溶液的方法催产,可以顺利促进哈氏刻肋海胆排放精卵,排出的卵受精率为93.6%±2.1%;哈氏刻肋海胆胚胎和幼体发育过程可分为受精卵、卵裂期、囊胚期、原肠期、棱柱幼体、二腕幼体、四腕幼体、六腕幼体、八腕幼体和稚胆等10个时期;在水温23~24℃条件下,受精卵在50 min时开始卵裂,5 h时进入囊胚期,10 h时进入原肠期,18 h时进入棱柱幼体阶段,23 h时进入二腕幼体阶段,1 d 16 h时进入四腕幼体阶段,7 d 2 h时进入六腕幼体阶段,10 d 16 h时进入八腕幼体阶段,35 d时变态为稚胆;与其他种类海胆相比,哈氏刻肋海胆在四腕幼体之前发育较快,在四腕幼体之后发育较慢。研究表明,在水温23~24℃、盐度29~32条件下,哈氏刻肋海胆可以在室内实现人工育苗并进行人工繁殖。

虾夷扇贝UROS基因的全基因组鉴定、序列特征及表达分析

为探明尿卟啉原Ⅲ合酶(UROS)基因在贝类壳色形成中的分子功能,利用生物信息学和实时荧光定量PCR等方法,进行虾夷扇贝UROS基因的全基因组鉴定、序列特征及其在不同壳色个体中的表达分析。结果显示,在虾夷扇贝全基因组范围内鉴定获得1个单拷贝的UROS基因,将其命名为PyUROS基因。PyUROS基因的序列全长为68808 bp,包括9个外显子、8个内含子,共编码298个氨基酸。在PyUROS蛋白质序列中预测到1个HemD保守功能域,表明本试验中所鉴定的PyUROS基因为UROS基因。PyUROS基因在虾夷扇贝成体各组织中广泛表达,表明其在虾夷扇贝生命活动中发挥重要作用。PyUROS基因在虾夷扇贝不同外套膜区域及不同壳色个体间显著差异表达,推测其在虾夷扇贝壳色形成中发挥重要功能。本试验结果为贝类壳色形成分子机制研究提供了重要参考,为贝类壳色遗传育种工作奠定了理论基础。

仿刺参miR-10与arhgef3序列分析及盐度胁迫下的表达模式

为探究盐度胁迫下仿刺参的响应过程,从转录组和miRNA的高通量测序结果中筛选差异表达的miR-10及对应的靶基因arhgef3,分析miR-10及靶基因arhgef3在低盐胁迫下的表达情况。分析miR-10的前体序列和成熟序列显示,miR-10能形成稳定的茎环结构,高度保守区域在29~51区间。靶基因arhgef3的开放阅读框长度为1728 bp,编码575个氨基酸,在第280~500氨基酸之间存在1个功能结构域。靶基因arhgef3的表达存在明显的组织特异性,在肠道、呼吸树和体腔细胞中表达显著高于其他组织(P<0.05)。低盐条件下,miR-10在24 h的表达量显著低于对照组0 h,在48 h时显著高于对照组0 h;在胁迫6 h组arhgef3基因的表达量显著高于对照组0 h。在体腔细胞转染miR-10抑制剂(inhibitor),试验组在24 h显著低于0 h,48 h显著高于0 h;转染miR-10模拟物(mimics)后试验组在6 h和48 h均显著高于0 h。在仿刺参体内转染miR-10抑制剂(antagomir)后的试验组arhgef3基因的表达量变化不明显,而转染miR-10模拟物(agomir)后试验组arhgef3基因的表达量在24 h内有较显著的提升。试验结果表明,arhgef3可以被盐度诱导表达,且说明盐度胁迫的响应过程中需要靶基因维持高的表达水平来适应盐度变化,更好地适应仿刺参的低盐响应过程。

不同规格绿鳍马面鲀耗氧率、排氨率与窒息点研究

为研究鱼体大小对绿鳍马面鲀耗氧率、排氨率以及窒息点的影响,利用静水封闭式呼吸室法,在水温22℃、盐度30条件下,测定了4种规格[体质量分别为(21.51±4.78)、(44.55±3.18)、(76.98±7.33)、(153.79±4.99)g]绿鳍马面鲀的耗氧率、排氨率和窒息点。结果显示,绿鳍马面鲀的耗氧率和排氨率均随着鱼体规格的增大呈现逐渐降低的趋势,且各组间的耗氧率均存在显著性差异(P<0.05);绿鳍马面鲀的窒息点随着鱼体规格的增大而提高,规格最小的试验鱼,其窒息点最低,且与规格较大的2个组有显著性差异(P<0.05),其余3组之间则差异不显著(P>0.05);试验测得的氧氮比为6.27~18.53,表明在试验条件下绿鳍马面鲀主要的供能物质为蛋白质。试验结果表明,鱼体大小对绿鳍马面鲀的耗氧率、排氨率均有显著影响,但对其窒息点的影响不显著。

发酵饲料对刺参生长及其肠道、养殖水体菌群的影响

为深入研究发酵饲料对刺参(Apostichopus japonicus)苗种培育的效应,试验对比了两种发酵饲料的差异,评估它们对刺参苗种生长速率与存活率的影响,并通过高通量测序分析了饲料对养殖池水和刺参肠道菌群结构的差异和关联。试验选取75 kg健康刺参苗种,分为未发酵饲料组(CT)、枯草芽孢杆菌发酵饲料组(BA)和布氏乳杆菌发酵饲料组(LAB),每组3个平行。结果显示,LAB组的特定生长率(4.14%±0.55%)最高,显著高于CT组(3.36%±0.42%)和BA组(3.8%±0.75%);BA组存活率最高(79.7%±2.74%),显著高于LAB组(70.28%±1.11%)和CT组(72.42%±6.18%)。发酵饲料组的增重率和饲料系数优势明显。肠道菌群丰度和多样性显著高于水体(P<0.05),LAB组和BA组的CHAO1指数、香农指数均高于CT组,发酵饲料增加了变形菌门和疣微菌门相对丰度。发酵饲料对肠道菌群有促进作用,提高了刺参的存活率和增重率,并增加了水体菌群丰度,对水体生态平衡有正面影响。

经济棘皮动物种质资源保护与利用研究进展

水产种质资源是渔业发展的重要物质基础。中国现有棘皮动物500余种,其中海参、海胆是中国水产重要养殖种类。自20世纪90年代,水产原良种建设工程启动以来,中国经济棘皮动物种质资源保护取得了长足进步,初步建立起具有中国特色的经济棘皮动物种业体系,但仍存在不同层面的诸多问题和挑战。本文综述了经济棘皮动物(海参、海胆)的种质资源分布、鉴定、评价、保护及种质资源创新,并就建设经济棘皮动物国家水产原良种场、种质资源测试评估体系、种质资源库和信息共享平台,以及海参、海胆“育繁推一体化”提出建议,以期推动中国棘皮动物种质资源保护,种业、养殖业体质增效、绿色发展。

3种宿主源盾纤毛虫的分离鉴定及体外培养研究

为进一步鉴定和体外培养引起养殖海水鱼类和棘皮动物体表溃烂的致病性盾纤毛虫,分别从辽宁地区养殖的患病刺参Apostichopus japonicus、红鳍东方鲀Takifugu rubripes和大菱鲆Scophthalmus maximus的体表分离出3种盾纤毛虫,采用活体观察、甲醛固定观察、扫描电镜观察、醋酸洋红染色及甲基绿派洛宁染色的方法,对3种盾纤毛虫的形态特征进行分析;采用PCR技术获得其18S rDNA基因序列,并与同源序列进行比对及构建系统发育树;选用L-15、MEM和RPMI1640培养基,在相同培养条件下培养7 d,比较3种盾纤毛虫种群密度的大小;采用盾纤毛虫最适培养基,在不同的温度(10、15、20、30℃)、盐度(13、20、30、40)、pH(4.2、5.2、7.2、9.2)条件下培养7 d,比较3种盾纤毛虫种群密度的大小。结果表明:从刺参和红鳍东方鲀体表分离出的盾纤毛虫形态均与尾丝虫Uronema sp.相似,且18S rDNA序列与尾丝虫的一致性高达99%,在系统发育树上以100%的最高置信度值与尾丝虫聚为一支;从大菱鲆体表分离出的盾纤毛虫形态与伪康纤虫Pseudocohnilembus sp.相似,且18S rDNA序列与伪康纤虫的一致性高达99%,在系统发育树上以100%的最高置信度值与伪康纤虫聚为一支;体外最适培养基筛选结果显示,L-15培养基培养的盾纤毛虫种群密度高于MEM和RPMI1640培养基;体外培养条件试验结果显示,推荐体外培养条件为温度20℃、盐度30、pH 7.2。本研究结果可为海水养殖动物体表溃烂病原盾纤毛虫的分离鉴定及基于盾纤毛虫全虫疫苗研制的体外培养条件优化提供参考。

中间球海胆己糖激酶基因克隆及高温-酸化胁迫对其表达影响的初步研究

为明确中间球海胆己糖激酶的序列信息和表达规律,了解高温-酸化胁迫对其表达和生物活性的影响,以中间球海胆为研究对象,利用cDNA末端快速扩增技术获得中间球海胆已糖激酶基因的全长cDNA序列(SiHK),并利用生物信息学软件分析其序列特征,分析高温-酸化胁迫下中间球海胆肠和性腺组织中SiHK基因的表达及其酶活力变化。结果表明,SiHK基因的cDNA全长2041 bp,编码476个氨基酸,SiHK蛋白的理论等电点为6.44,蛋白质分子质量52.72 kD。生物信息学分析显示,SiHK蛋白氨基酸序列与紫球海胆HK氨基酸序列相似最高。实时荧光定量PCR结果显示,SiHK基因的表达具有组织特异性,其中,肠和性腺组织中SiHK基因的相对表达量较高,而在体腔液和管足中SiHK酶活力较高。高温-酸化胁迫处理60 d后,与对照组相比,处理组中间球海胆的肠和性腺组织中SiHK基因的相对表达量和SiHK酶活性均发生改变。由此表明,高温-酸化胁迫可能通过调控糖代谢关键酶活性对海胆的物质代谢过程产生影响。

拉氏[鱼岁]仔稚鱼发育、饥饿不可逆点及适时下塘研究

为探明拉氏[鱼岁]仔稚鱼发育生物学特性及适宜下塘时间,对拉氏[鱼岁]进行了胚后仔稚鱼发育显微观察、仔鱼饥饿试验和仔鱼下塘试验。胚后仔稚鱼发育观察结果显示,水温16~18℃,拉氏[鱼岁]初孵仔鱼全长(4.69±0.37)mm,卵黄囊全长(3.12±0.10)mm,2日龄眼点变黑,5日龄消化道开始贯通,6日龄仔鱼鳔一室开始充气,7日龄脊索末端开始弯曲,仔鱼开口摄食,9日龄卵黄囊消失,12日龄鳔二室形成,21日龄仔鱼鳔二室充气,23日龄仔鱼背鳍、臀鳍开始形成,27日龄仔鱼腹鳍开始形成,至35日龄仔鱼各鳍发育完善。仔鱼饥饿不可逆点试验结果表明,16~18℃,拉氏[鱼岁]仔鱼开口第1天(7日龄)初次摄食率为36.36%,9日龄达最高初次摄食率85.71%,饥饿不可逆时间临界点为仔鱼14日龄,此时仔鱼摄食率为40.91%。仔鱼开口前全长(L)与日龄(t)符合von-Bertalanffy生长方程:L=8.0031[1-e(-0.3139(t+2.8093))]。拉氏[鱼岁]适宜下塘试验结果表明,水温14.5~20.1℃,池塘轮虫生物量8.30~18.58mg/L,拉氏[鱼岁]仔鱼最高成活下塘时间、体质量增长的适时下塘时间均为6日龄,其成活率达(75.0±2.2)%,出塘体质量(9.0±2.0)mg,最大全长增长的适时下塘时间为8日龄,最小全长变异系数的适时下塘时间为7.5日龄,最小体质量变异系数的适时下塘时间为8.5日龄。本研究结果可为拉氏[鱼岁]早期发育与鱼苗下塘提供基础材料。

饲料中添加胆固醇对中华绒螯蟹幼蟹生长、蜕皮及亚硝酸盐应激前后抗氧化能力的影响

为研究饲料胆固醇添加量对中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)幼蟹生长、蜕皮以及亚硝酸盐应激前后肝胰腺胆固醇含量和抗氧化能力的影响,试验设计了5种等氮等脂的饲料,胆固醇添加量依次为0、0.25%、0.50%、0.75%和1.00%。以初始体重为(0.930±0.036)g的中华绒螯蟹幼蟹为研究对象,进行为期50 d的摄食生长试验,试验结束后进行亚硝酸盐应激,于应激前后取样分析。结果表明:①相较于对照组,当饲料中添加0.25%~0.50%胆固醇时,中华绒螯蟹幼蟹增重率、特定生长率和蜕皮率显著性升高(P<0.05),当饲料中添加0.25%胆固醇时,饲料系数显著降低(P<0.05)。②幼蟹肝胰腺中胆固醇含量在亚硝酸盐应激前后差异不显著(P>0.05)。在亚硝酸盐应激前,相较于对照组,胆固醇添加组肝胰腺中胆固醇含量显著升高(P<0.05)。在亚硝酸盐应激后,各组肝胰腺中胆固醇含量差异不显著(P>0.05)。③相较于亚硝酸盐应激前,应激后的幼蟹肝胰腺中超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和总抗氧化能力(T-AOC)显著降低(P<0.05)。在亚硝酸盐应激前,相较于对照组,饲料中添加0.25%胆固醇时,肝胰腺中GSH-Px活性和T-AOC水平显著性升高(P<0.05),MDA含量降低(P>0.05)。在亚硝酸盐应激后,相较于对照组,当饲料中添加0.50%~0.75%胆固醇时,GSH-Px、T-AOC、SOD活性显著性升高(P<0.05),MDA含量降低(P>0.05)。综上所述,饲料中添加0.25%胆固醇可满足中华绒螯蟹幼蟹生长需求,而添加0.5%胆固醇可使幼蟹获得最佳的抗亚硝酸盐应激能力。

刺参Wnt9基因克隆、组织分布及在胚胎发育中的表达分析

为解析Wnt9基因在刺参Apostichopus japonicus早期发育过程中的作用机制,采用RACE、荧光定量PCR、整体原位杂交等方法进行了Wnt9基因的分子特征及动态表达模式分析研究。结果表明:克隆得到刺参Wnt9基因全长cDNA为1603 bp,开放阅读框为1104 bp,可编码367个氨基酸,包含一个保守的Wnt1结构域,刺参Wnt9蛋白具有Wnt家族共同的结构特征,包括N-糖基化位点和半胱氨酸保守序列;系统进化分析显示,刺参Wnt9氨基酸序列与棘皮动物近缘物种Wnt9a氨基酸序列具有高度相似性;qRT-PCR分析显示,Wnt9 mRNA在刺参组织中呈组成型表达,在体壁中表达量最高(P<0.05),在性腺中表达量最低(P<0.05),Wnt9 mRNA在刺参整个胚胎发育时期均有表达,从樽形幼体期至稚参期的表达水平显著升高(P<0.05),且在稚参期达到峰值(P<0.05);整体原位杂交进一步检测到Wnt9 mRNA阳性细胞信号在樽形幼体中开始出现,在变态后的稚参中明显增强。研究表明,Wnt9基因可能在刺参胚胎特别是变态后的生长发育中发挥着重要作用,此结果可为探究刺参变态过程中体轴形成和形态转变提供了研究方向。

棕榈油饲料中添加2种磷脂对中间球海胆生长、性腺发育及营养组成的影响

本试验旨在添加棕榈油饲料中添加2种磷脂对中间球海胆生长、性腺发育及营养组成的影响。以酪蛋白、豆粕为主要蛋白质源,在鱼油饲料中添加大豆卵磷脂作为对照组饲料,在棕榈油饲料中分别添加大豆卵磷脂(PO+SL组)和磷虾油(PO+KO组)作为试验组饲料。选择初始体重的(18.86±0.55)g的中间球海胆45只,随机分为3组,分别投喂上述3种饲料,每组15只,单笼养殖。试验期42 d。结果显示:1)各组之间终末体重、增重率和性腺湿重无显著差异(P>0.05)。PO+SL组的性腺指数显著低于对照组(P<0.05)。2)PO+SL组的性腺水分含量显著高于PO+KO组和对照组(P<0.05),PO+SL组的性腺粗蛋白质含量显著低于对照组(P<0.05)。3)各组之间性腺亮度和红度值无显著差异(P>0.05)。PO+SL组的性腺黄度值显著低于PO+KO组和对照组(P<0.05)。4)性腺组织切片可见,PO+SL组的性腺发育速度最慢,雄性和雌性个体仅发育到Ⅱ期。PO+KO组和对照组的雄性个体性腺发育较快,均发育到Ⅲ期;而雌性个体性腺仅发育到Ⅱ期。5)PO+SL组的性腺总氨基酸(TAA)、必需氨基酸(EAA)、甜味氨基酸、鲜味氨基酸和苦味氨基酸含量显著高于PO+KO组和对照组(P<0.05)。6)PO+KO组和对照组的性腺中二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)含量显著高于PO+SL组(P<0.05)。综上所述,棕榈油饲料中添加大豆卵磷脂或磷虾油并未影响中间球海胆的增重率,磷虾油较大豆卵磷脂能提高中间球海胆性腺指数、发育速度及性腺必需脂肪酸含量。

饲料磷脂水平对中华绒螯蟹仔蟹存活、生长、消化酶活性、生化指标及Neverland基因表达的影响

为研究饲料磷脂水平对中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)仔蟹存活、生长、消化酶活性、生化指标及Neverland基因表达的影响。实验配制等氮等脂的5种饲料,磷脂水平为0(对照组)、1%、2%、3%和4%。每种饲料随机投喂3组中华绒螯蟹仔蟹[初始体质量(0.52±0.02)g],实验周期60 d。结果表明:(1)饲料中添加磷脂对仔蟹的存活率未见显著影响(P>0.05);磷脂添加提高了仔蟹的增重率和特定生长率,降低了饲料系数,其中1%磷脂添加组仔蟹的增重率和特定生长率最高,饲料系数最低,与对照组和3%磷脂添加组相比差异显著(P<0.05)。(2)随着磷脂水平的升高,仔蟹肝胰腺中胰蛋白酶和淀粉酶活性降低,并在磷脂添加水平达到或超过3%时显著低于对照组和1%磷脂添加组(P<0.05);纤维素酶活性随磷脂水平升高而先升后降,在1%磷脂添加组活性最高,显著高于3%和4%磷脂添加组(P<0.05);脂肪酶活性随磷脂水平升高而先降后升,在2%磷脂添加组活性最低,显著低于对照组和4%磷脂添加组(P<0.05)。(3)随着磷脂水平的升高,仔蟹肝胰腺中三酰甘油的含量降低,并在磷脂添加水平达到或超过3%时显著低于对照组和1%磷脂添加组(P<0.05)。(4)随着磷脂添加水平升高至2%,Neverland(Nvd)基因表达量显著升高(P<0.05),之后随磷脂水平的进一步提高其显著降低(P<0.05)。综上所述,饲料中添加1%磷脂显著提高了中华绒螯蟹仔蟹的生长和饲料转化率,2%磷脂显著提高了仔蟹维生素D合成调控基因Nvd的表达量,而较高磷脂添加水平(3%~4%)显著降低了仔蟹肝胰腺中胰蛋白酶、纤维素酶和淀粉酶的活性。综合存活率和生长性能,中华绒螯蟹仔蟹饲料中磷脂的最适添加水平推荐为1%。

不同投喂模式对中间球海胆生长及性腺发育、感官品质和营养品质的影响

本试验旨在探究不同投喂模式对中间球海胆生长及性腺发育、感官品质和营养品质的影响。试验1:设置饲料组(投喂配合饲料)和海带组(投喂海带),每组6只海胆,均持续投喂85 d。试验2:设置饲料组和海带组,每组6只海胆,其中饲料组前85 d投喂配合饲料,后78 d投喂海带;海带组持续投喂海带163 d。结果表明:1)试验1和试验2结束时,海带组海胆的增重率显著高于饲料组(P<0.05)。与试验1相比,试验2饲料组海胆的增重率及海带组海胆的增重率、消化道指数均显著提高(P<0.05)。2)试验1结束时,海带组海胆的性腺指数显著低于饲料组(P<0.05)。试验1和试验2结束时,饲料组海胆性腺的红度(a*)、黄度(b*)值均显著低于海带组(P<0.05),而亮度(L*)值均显著高于海带组(P<0.05)。与试验1相比,试验2饲料组和海带组海胆性腺的L*、a*、b*值均显著提高(P<0.05)。3)试验1结束时,饲料组海胆性腺的硬度显著低于海带组(P<0.05);试验2结束时,饲料组海胆性腺的黏附性和内聚性均显著高于海带组(P<0.05)。与试验1相比,试验2饲料组海胆性腺的内聚性、弹性、胶着性、咀嚼性及海带组海胆性腺的弹性均显著提高(P<0.05)。4)试验1结束时,饲料组海胆性腺的非必需氨基酸(NEAA)和甜味氨基酸含量显著高于海带组(P<0.05);试验2结束时,饲料组海胆性腺的必需氨基酸(EAA)含量显著高于海带组(P<0.05)。与试验1相比,试验2海带组海胆性腺的EAA、总氨基酸(TAA)、NEAA和苦味氨基酸含量均显著提高(P<0.05)。5)试验1和试验2结束时,饲料组海胆性腺的二十碳五烯酸(EPA)含量和n-3/n-6多不饱和脂肪酸(PUFA)显著低于海带组(P<0.05),二十二碳六烯酸(DHA)含量显著高于海带组(P<0.05)。与试验1相比,试验2饲料组和海带组海胆性腺的EPA、∑n-3 PUFA含量和n-3/n-6 PUFA均显著提高(P<0.05),饲料组海胆性腺的二十碳四烯酸(ARA)含量显著提高(P<0.05)。由此可见,投喂配合饲料虽然提高了海胆的性腺指数,但降低了海胆的生长和性腺感官品质。与全程投喂配合饲料相比,使用配合饲料-海带接力的投喂模式可提高海胆性腺的颜色、质地和必需脂肪酸含量。

患“红斑综合征”的海胆体腔液中菌群结构特征

为探究患“红斑综合征”海胆的细菌群落结构、功能,以及该病在海胆种间的传播性,采用16S rDNA高通量测序技术人工回归感染,从患病马粪海胆(Hemicentrotus pulcherrimus)体腔内分离、鉴定出一株灿烂弧菌(Vibrio splendidus),之后配置其菌悬液注射到光棘球海胆(Strongylocentrotus nudus)、中间球海胆(Strongylocentrotus intermedius)和海刺猬(Glyptocidaris crenularis)体腔内,构建海胆感染“红斑综合征”后体腔液菌群16S rRNA基因测序文库,分析不同种类海胆感染“红斑综合征”后体腔内菌群结构。结果显示:光棘球海胆、中间球海胆、海刺猬均可被灿烂弧菌感染,出现“红斑”病征,在10 d内均死亡,其中中间球海胆表现出围口膜周围变黑,体壁出现红色斑块;光棘球海胆体腔液变为紫黑色等。3种海胆注射感染后体腔液内优势菌门均为变形菌门(Proteobacteria),所占比例分别为99.94%、60.18%和92.38%;弧菌属(Vibrio)为优势菌属,所占比例分别上升到99.90%、48.96%和97.47%。COG及KEGG数据库分析表明,体腔内菌群共注释到24组COG功能分类,主要集中在氨基酸转运与代谢、转录、信号转导机制;41条KEGG信号通路,集中分布在膜运输(Membrane Transport)、氨基酸的运输和代谢(Amino acid transport and metabolism)、转录(Transcription)、信号传导机制(Signal transduction mechanisms)。本研究结果可为海胆“红斑综合征”的预防治疗提供理论基础。

仿刺参7个盐度相关基因在低盐胁迫下的表达模式

从仿刺参Apostichopus japonicus低盐转录组数据库中选取肌腱蛋白-R1 (TN-R1)、肌腱蛋白-R2(TNR2)、乙酰胆碱受体亚基α-3(CHRNA3)、脂肪酸结合蛋白6(FABP6)、单羧酸转运蛋白2(SLC16A7)、纤维胶凝蛋白1 (Fcn1)、黑素转铁蛋白(Mfi2)共7个盐度调节相关基因,利用qRT-PCR技术分析这7个基因在低盐胁迫下不同组织中的表达水平及表达丰度。结果表明TN-R1基因在仿刺参体腔液中表达水平最高,呼吸树次之,肠表达较低; TN-R2基因在仿刺参体腔液中表达水平最高,在肠中表达较低,呼吸树中不表达。SLC16A7、FABP6、Fcn1、CHRNA3和Mfi2均在体腔液中表达最高。Mfi2基因在体腔液中明显上调表达,在呼吸树组织和肠组织中下调表达,且与对照组均呈显著性差异。Fcn1在体腔液中的表达量在胁迫后1.5 h达到最高,为对照组的669倍,在胁迫48 h之前均呈明显上调。低盐胁迫下这7个基因表达丰度的变化,说明这些基因或作为功能基因直接参与机体的盐度适应的代谢调节,或作为调控基因调节盐度相关功能蛋白的表达和活性来提高仿刺参对低盐胁迫的耐受能力。上述结果表明仿刺参的盐度适应过程是一个需要多基因参与的应激反应信号转导网络,为仿刺参盐度调节适应机制的研究奠定基础。