生物质炭基固体酸催化剂的制备

以生物质木粉为原料,采用炭化-磺化法制备了炭基固体酸催化剂,并用于油酸与甲醇的酯化反应,考察了制备条件对炭基固体酸催化剂活性的影响.采用X射线衍射、红外光谱、热重分析、高分辨透射电子显微镜及元素分析等手段对催化剂进行了表征.结果表明,由生物质木粉制备的炭基固体酸催化剂具有较高催化酯化反应活性,在400oC下炭化0.5h,135oC下磺化1h制备的炭基固体酸催化剂在精馏分水连续酯化装置中催化油酸与甲醇的酯化反应2h时,酯化转化率达到96%.采用炭化-磺化法制备的生物质炭基固体酸催化剂具有蠕虫状的无序乱层炭结构,磺酸基(-SO3H)含量高达13.25%,并且在220oC以下时具有良好的热稳定性.

生物基化学品2,3-丁二醇的研究进展

从2,3-丁二醇的发酵研究(菌株、非粮碳源、发酵工艺)和下游处理技术两方面对生物法生产2,3-丁二醇的研究进展进行了概述,并对不同的分离方法进行了比较,指出降低2,3-丁二醇的生产成本应从菌种选育、发酵工艺优化及高效廉价节能的分离工艺研究出发,并在此基础上进行系统优化、展开2,3-丁二醇的应用研究是今后生物法生产2,3-丁二醇研究应关注的问题.

两步法利用高酸值废油脂生产生物柴油

以废油脂为原料,采用两步法即先用氯化铁为催化剂催化废油脂中的游离脂肪酸和甲醇反应降低原料的酸值,然后分离出氯化铁并加入KOH催化生产生物柴油。第一步反应的最佳条件为:温度65℃,催化剂FeCl3用量2%,醇油摩尔比为11∶1,反应5 h;第二步反应条件是:在65℃下加入1%的KOH,醇油摩尔比为6∶1,反应时间为1 h,最终生物柴油的得率为93.6%。此方法相对传统的浓硫酸催化生产生物柴油具有反应迅速、转化率高,催化剂易于回收,不产生污染物等优点。

微生物发酵法中试生产1,3-丙二醇

以甘油为原料,利用克雷伯氏菌进行了发酵罐容积规模分别为1 m3和20 m3的发酵法1,3-丙二醇生产的中试研究。试验结果表明:1m3和20m3的发酵罐最终发酵液中1,3-丙二醇平均质量浓度分别达到了74.6 g/L和63.9 g/L,1,3-丙二醇相对于甘油的得率分别为61.2%和49.9%。采用发酵液醇沉预处理、再精馏的专利技术可分离得到纯度大于99%的1,3-丙二醇产品,分离收率大于85%,产品质量达到了聚对苯二甲酸丙二酯(PTT)聚合反应的要求。成本分析表明,生物法生产1,3-丙二醇技术是经济可行的。

大连蛇岛蝮蛇类凝血酶在大肠杆菌中的表达与纯化

将编码大连蛇岛蝮蛇类凝血酶 (Gloshedobin)的基因克隆于表达载体pET 32a( + )中 ,以融合蛋白形式在大肠杆菌中获得表达。在 2 5℃下经 1mmol LIPTG诱导 6h ,SDS PAGE和蛋白质印迹分析表明 ,部分融合蛋白以可溶形式存在于大肠杆菌的细胞质中。针对金属螯合亲和层析分离某些含His 标签重组蛋白质时专一性不高 ,并且存在配基泄漏的缺陷 ,设计合成了以抗重组类凝血酶的鸡卵黄免疫球蛋白为配基的免疫亲和层析柱。通过疏水色谱OctylSepharoseFF ,IgY免疫亲和层析以及强阴离子交换色谱SourceQ等三步柱色谱分离纯化获得比活力为 45 4 7U mg的重组蛇毒类凝血酶 ,活力回收率为 34 8%。蛋白质印迹分析和纤维蛋白原凝结活性分析表明 。

大米草浓酸水解及发酵生产生物燃料的初步研究

探讨了大米草浓酸水解的影响因素,采用正交试验优化得到了大米草最佳水解条件:硫酸质量分数为50%、水解时间为60 min、水浴温度为50℃、大米草粒径为10-20目、固液质量比为19∶,此时糖的得率达36%。利用基因工程菌6508-127发酵大米草水解液生产燃料酒精,产率为8.9 g/100 g(乙醇/大米草);利用圆红冬孢酵母As2.1389发酵大米草水解液生产生物油脂,产率为6.4 g/100 g(油脂/大米草)。

色氨酸生物合成的稳态优化

本文研究了色氨酸生物合成的稳态优化。针对色氨酸生物合成过程的三维非线性动力系统,建立了使色氨酸消耗和分泌的综合项最大的稳态优化控制模型。根据IOM方法,将非线性优化问题近似转化为线性优化问题来求解,最后得到了一个稳定而且鲁棒的稳态,在该稳态下,色氨酸产率提高为基本稳态时的9倍,这一数值结果表明了优化算法的实用性和有效性。

反相高效液相色谱法制备喜树细胞内生物碱单体

利用制备高效液相色谱法从喜树细胞中分离制备了在原植株内不存在的两种全新的生物碱单体喜树异碱A和喜树异碱B。在C18柱上,以乙腈水(体积比为35∶65)为流动相,流速为5mL/min,采用等度洗脱方式,制备了这两种化合物。经紫外光谱、红外光谱及质谱分析,对这两种化合物进行了确认。高效液相色谱分析表明,制备的喜树异碱A和喜树异碱B的纯度均在97% (质量分数)以上。在该色谱条件下,各色谱峰达到了基线分离,且分离时间短,溶剂用量少。

可培养海洋放线菌生物多样性的研究进展

海洋放线菌是新药开发和天然活性产物的重要来源,海洋放线菌的生物多样性是代谢产物功能多样性的基础,因此研究可培养放线菌的生物多样性具有重要的意义。综述了近年来可培养的海洋放线菌生物多样性的研究进展,尤其是海绵共附生放线菌、深海放线菌和海洋固有放线菌的研究进展,对可培养的海洋放线菌的分离培养方法,包括样品处理、培养基的选择等进行了重点介绍,并对未培养海洋放线菌的分离培养进行了探讨,强调了建立区域性海洋放线菌菌种及基因资源库的重要性。

血红蛋白片段的合成及生物活性

采用多肽固相合成方法,以Wang树脂为载体,Fmoc为N-端氨基酸保护基,HOBt-HBTU为缩合试剂,合成了一系列血红蛋白α链的片段,产物经RP-HPLC和质谱进行了确定.生物活性研究结果表明,该系列多肽具有较高的血管紧张素Ⅰ转换酶抑制活性,但不具有α-葡萄糖苷酶抑制活性.

2种光生物反应器在微藻培养中的性能比较

对自主研发的平板式光生物反应器和柱状气升式内环流光生物反应器的主要性能参数进行了测定,以纤细角毛藻为培养对象对两者性能进行了综合评价.结果表明:平板式光生物反应器具有高的液体循环速度和相对较小的光衰减程度,更有利于藻体细胞对光的吸收,纤细角毛藻的培养密度和生长速率分别达到6.98×108/mL和1.42/d,并且操作简单、容易放大,适合于微藻的规模化高密度培养;柱状气升式内环流光生物反应器培养效率相对较低,纤细角毛藻的培养密度和生长速率仅为1.52×108/mL和0.935/d,但其培养环境稳定、主要培养参数容易控制,可实现无菌化纯培养,在探索微藻生长动力学、优化微藻培养条件和转基因微藻的培养等方面具有优势.因此在微藻培养时应根据实际的应用目的不同选择适合的光生物反应器.

大连地区海泥样品中分离的两株小单胞菌的研究

从大连不同地区的海泥样品中分离了2株具有广谱抗菌活性的小单胞菌。16S rDNA序列分析结果显示,2株小单胞菌均与Micromonospora aurantiaca DSM43813具有99%的相似性,但是这2株小单胞菌的培养特征和生理生化特性具有明显的差别。2株小单胞菌均在20℃下生长良好,而且能耐受6%的NaCl。这是有抗菌活性的Micromonospora aurantiaca菌株首次在我国大连地区海泥样品中得到分离。2株小单胞菌具有较好的抗菌活性,尤其是对白色假丝酵母和铜绿假单胞杆菌的活性,显示了进一步开发与应用的价值。

基因组的“沙漠区域”内含子及其在植物基因工程中的应用

随着分子生物学和基因工程的发展,人们发现内含子在基因表达调控中起到了非常重要的作用。最近,除了对内含子本身结构与功能研究外,在应用研究方面产生了许多新的热点。本文简要介绍了内含子、内含子增强基因表达的分子机制、影响内含子增强表达的因素和其在植物基因工程上的一些新的应用以及发展前景。

大连地区海泥样品中分离的五株海洋放线菌的研究

对从大连小平岛地区海面下10～20m处的海泥样品中分离的5株海洋放线菌进行了生理特征和抗菌活性的研究。抗菌活性实验初步表明，菌株S097，S187和$233具有较好的拮抗革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和真菌测试菌株的活性，尤其是菌株S233对绿脓杆菌和白色假丝酵母的抑制活性很强。16srDNA序列分析结果表明，5株放线菌（S097，S187，S233，S239，L180）分另0与Streptomyces argenteolus CGMCC4．1693、S．flavofuscus NRRLB-8036、S．variabilis NRRLB-3984T、S．1itmocidini NRRL B-3635和S．sulphureus NRRL B-1627T显示出最高的序列同源性（99％），这是这些菌种首次报道在大连地区的海泥样品中得到分离。利用Ⅰ型聚酮合成酶（PKSI）兼并引物从菌株S187中扩增出了PKSI片段，揭示了该菌株生产Ⅰ型聚酮类化合物的潜在能力。本文的研究结果为进一步开发利用大连地区海泥中的海洋放线菌资源奠定了基础。

微生物降解重油的初步研究

从石油污染的土壤中筛选出一株假单胞菌,考察了其对重油的降解效果。降解18d,重油的降解率达到42.8%,饱和烃、芳香烃、胶质、沥青质的降解率分别为42.95%,43.85%,44.5%,5.55%;质量浓度2.5g/L的表面活性剂Tw een-80可使重油的18d降解率达到51.0%;弱碱性条件有利于重油的生物降解;生物泥浆法处理重油污染的土壤,1kg土壤中重油质量100g,降解45d,重油的降解率达到38.85%。

耦联性转录与翻译新进展:真核生物细胞核内的翻译

原核生物转录与翻译过程是耦联的。通常认为 ,在真核生物中 ,初级转录产物经过加工和修饰成的mRNA从细胞核进入细胞质后 ,翻译才开始 ,也就是说 ,转录与翻译过程并不是耦联的。然而 ,最近Iborra等人用赖氨酸[3 H]以及生物素或BODIPY标记的赖氨酸—tRNA对哺乳动物细胞翻译位点进行定位 ,发现细胞核内存在耦联性转录与翻译过程 ,核内翻译产物占细胞总合成蛋白的 10 %～ 15 %。

六氯苯环境清除技术研究进展

概述了国内外六氯苯的污染现状,评述了现有六氯苯环境清除技术及其研究进展。阐述了目前研究较多的厌氧生物降解及其途径。微生物降解转化六氯苯蕴含着巨大潜力,但目前有关微生物降解的研究仍处于实验室阶段。微生物降解六氯苯的反应机理研究,筛选高效降解菌株、提高菌株在实际环境中的适应能力将是今后研究的重点。

Gln49-磷脂酶A_2基因工程定点突变及酶活性分析

为了确认49位谷氨酰胺磷脂酶A2(glutamine 49 phospholipase A2,Gln49-PLA2)酶活性缺失与氨基酸序列的相关性,对Gln49-PLA2编码基因第49位氨基酸进行PCR定点突变,利用pET32a+质粒载体在大肠杆菌中表达Gln49-磷脂酶A2的突变体---天冬氨酸磷脂酶A2(aspartic acid 49 phospholipase A2,Asp49-PLA2-Q49D-PLA2)。将表达的包涵体蛋白变性,采用固定化金属离子亲和层析进行柱上复性、纯化获得突变体融合蛋白(fusion Q49D-PLA2-fQ49D-PLA2);突变体融合蛋白经蛋白水解酶Factor Xa酶切后,采用Hitrap SP阳离子交换层析和Superdex75凝胶层析进一步纯化,得到突变体蛋白Q49D-PLA2,得率为1.3%,比酶活为72U/mg。从而证实Gln49-PLA2酶活性缺失的关键原因是49位氨基酸为谷氨酰胺。

一株抗真菌解淀粉芽孢杆菌的分离鉴定及其发酵条件的初步研究

从堆肥中分离到一株对植物病原菌尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)具有强烈抗菌活性并具有较广抗菌谱的细菌Q-12菌株。通过形态观察、生理生化实验1、6S rDNA同源性序列分析以及部分特异性基因序列分析,鉴定该菌为解淀粉芽孢杆菌。该菌的最适培养基组成为:葡萄糖5g/L,NH4Cl 1g/L,牛肉膏0.8g/L,氯化镁5g/L。最适培养温度为33℃,最适培养pH为6.0,最适培养时间为40h。