3种不同配体及其组合对鸭树突状细胞TLRs信号通路和细胞因子表达的影响

为研究不同Toll样受体(Toll like receptor,TLR)配体及其组合对鸭外周血单核源树突状细胞(Peripheral blood monocyte-derived dendritic cells,MoDCs)TLRs信号通路和细胞因子表达的影响,该研究体外分离、诱导获得鸭MoDCs,对其形态学特征和膜表面标记分子进行观察、鉴定,并将TLR2配体Pam2CSK4、TLR3配体Poly(I∶C)和TLR7配体Imiquimod单独或组合刺激鸭MoDCs 12 h和24 h,通过荧光定量PCR方法检测鸭MoDCs中TLRs信号通路关键节点蛋白和免疫相关因子的表达情况。结果显示,培养至第7-8天,所获得的鸭MoDCs呈现典型树突状细胞形态。刺激24 h后,核转录因子κB(NF-κB)在Imiquimod、Pam2CSK4+Imiquimod和Poly(I∶C)+Imiquimod组高表达,但这三组之间差异不显著。与对照组和TLR单独配体组相比,IL-2和IL-6 m RNA在Pam2CSK4+Imiquimod和Poly(I∶C)+Imiquimod组高表达,IFN-γ在Pam2CSK4+Imiquimod组高表达,而IFN-α和MHC分子则在Poly(I∶C)+Imiquimod组高表达。结果表明Pam2CSK4、Poly(I∶C)和Imiquimod单独或不同组合均可有效激活鸭MoDCs TRIF/MyD88-NF-κB信号通路,提示Pam2CSK4+Imiquimod和Poly(I∶C)+Imiquimod组合都具有一定的免疫激活协同效应,但Poly(I∶C)+Imiquimod组合可以更好地促进鸭MoDCs的成熟。