中国、美国和欧盟植物药注册法规和技术要求比较研究

本文基于我国国家药品监督管理局(NMPA)、美国食品药品监督管理局(FDA)和欧洲药品管理局(EMA)颁布的植物药注册法规及相关指南,从植物药管理范畴、药学研究、非临床研究和临床研究等4个方面开展比较研究,总结归纳3个国家和地区植物药注册管理和技术要求之间的异同点,为中药以植物药身份进入欧美主流市场的研究与申报探索新思路。

傅里叶红外光谱法鉴别部分胡椒属生药的研究

利用共有峰率和变异峰率双指标,以胡椒属七种药用植物的红外指纹图谱为依据,计算出所测样品的共有峰率和变异峰率。建立了胡椒属七种药用植物共有峰率和变异峰率双指标序列,结果揭示了胡椒属七种药用植物的亲缘关系。中药海风藤与石南藤、大叶蒟根茎的共有峰率均在77%以上,变异峰率均在30%以下,此三种胡椒属药用植物亲缘关系较近;海风藤与胡椒根茎、十八症根的共有峰率在61%左右,亲缘关系稍远;海风藤与蒌叶根茎的共有峰率仅为44%。亲缘关系较远。利用红外二阶导数谱图,可以鉴别中药海风藤及其伪品石南藤、十八症根、大叶蒟根茎、胡椒根茎等品种。傅里叶红外光谱法可以对样品进行无损处理,不需要对药材进行复杂的提取分离过程即可提供化合物的官能团、类别、氢键等信息。该法能从整体水平分析谱图特征峰,具有分析速度快,重现性好,非破坏性和样品量小,制样简单,专属性强,节约成本,保护环境等优点。可以解决中药海风藤因资源短缺,伪品较多,鉴别困难等问题,也可为临床用药的安全、有效提供保障。傅里叶红外光谱法为胡椒属药用植物亲缘关系的探讨和真伪鉴别提供了一种新方法。符合中药向综合分析和整体分析发展的趋势。

大黄与黄连配伍对黄连生物碱类成分的溶出影响研究

目的分析大黄-黄连不同比例合煎时生物碱类成分的溶出变化,研究配伍对成分溶出的影响。方法采用反相HPLC方法,用加离子对试剂的乙腈-水流动相洗脱,分析配伍合煎液、黄连单煎液和大黄单煎液。结果大黄-黄连1∶2～2∶1之间的5个配伍量中小檗碱溶出随大黄所占比例增大而降低;且黄连中4个主要生物碱成分溶出随大黄所占比例增加有相似的降低趋势。结论本实验分析了大黄-黄连配伍合煎液中4个主要生物碱类成分溶出的变化,对临床应用和含有大黄-黄连配伍的新药开发有一定的指导意义。

三七叶、人参叶和西洋参叶皂苷类成分的研究(英文)

三七叶、人参叶和西洋参叶其皂苷类成分相近,但专属性成分各异,皂苷类成分的分布比例也各不相同。本文建立了HPLC-UV法测定上述皂苷成分的方法,经过方法学考察,各种皂苷成分精密度好、加样回收率高,方法可靠。11种皂苷成分总含量顺序为:西洋参叶>人参叶>三七叶;二醇组皂苷成分含量:西洋参叶>三七叶>人参叶;三醇组皂苷成分含量:人参叶>西洋参叶>三七叶。西洋参叶中二醇组皂苷和人参叶中三醇组皂苷含量明显高于其他。西洋参叶中人参皂苷Rb3和Rd的含量之和占11种皂苷成分的60%以上。鉴于其中人参皂苷的高含量,三七叶、人参叶和西洋参叶应该作为皂苷来源得到充分利用;不同的皂苷成分有不同的药理活性,应基于它们的皂苷组成和比例选择性进行研究和开发。

黄芪蜜炙工艺研究中两种主观赋权方法选择

目的结合“辨状论质”理念及内在成分含量,以黄芪蜜炙工艺为例优选在多指标综合评分优选一种合适的主观赋权方法,确认各指标权重系数。方法分别采用层次分析法、优序图法等主观赋法计算指标权重系数,并结合各自优缺点对比分析。结果层次分析法和优序图法权重系数计算结果有差异,但两者指标权重大小顺序一致,pearson相关系数检验两者具有极强相关。结论层次分析法和优序图法均可运用于黄芪蜜炙工艺研究,需结合实际使用环境对分析方法进行选择,提高工作效率。

基于高压制备液相的多维色谱技术在中药分离纯化中的应用

中药物质基础复杂,对其活性成分的分离一直是中药研究的难题。基于高压制备液相的多维色谱系统在高压制备液相色谱的基础上,结合了多种分离技术,极大地提高了色谱系统的分离性能和分离效率,更有利于对物质基础复杂的中药样品进行分离纯化。本文介绍了基于高压制备液相系统的多维色谱系统的基本原理、分离模式以及关键技术,并综述了其在中药分离纯化中的应用。

多属性决策在中药研发及生产中的应用

多属性决策是现代决策科学的一个重要组成部分,目前已广泛应用于工程设计、经济、管理和军事等诸多领域。中药具有"多成分、多靶点"的特点,在流通中还有品相等其他质量控制因素,目前已有一些分析手段与其相适应,但均有不足。多属性决策与中药上述特点不谋而合,但它在中药研究体系中的应用相对较少。本文从主观赋权法、客观赋权法、主客观集成赋权法3个方面对目前已有相关文章进行综述,以期为多属性决策在中药研发及生产中的应用提供依据。

蒙古黄芪与膜荚黄芪差异性研究进展

2015年版中国药典规定蒙古黄芪和膜荚黄芪为药用黄芪基原,但并未对两者进行区分,导致二者在市场流通中较为混乱。中药新药申报资料中要求明确药材来源以及鉴定依据,但目前缺少通过药材直接鉴别蒙古黄芪和膜荚黄芪的方法。该文通过查阅文献,从两种基原黄芪的种属关系、植物形态、性状特征、化学成分、遗传方面,总结两者的差异性研究进展,为两种基原黄芪药材的鉴别提供思路。

HPLC测定郁舒颗粒芍药内酯苷和芍药苷的含量

目的:建立测定郁舒颗粒中芍药内酯苷和芍药苷含量测定的方法。方法:采用高效液相色谱,以Agilent ZORBAX SB-C18(4.6×250mm,5μm)为分析柱,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液梯度洗脱,流速1.0mL.min-1,检测波长:203nm,柱温:30℃。结果:芍药内酯苷与芍药苷分离度良好,且不受其它成分干扰;芍药内酯苷、芍药苷分别在0.240～0.900μg(r=0.9998,n=6),0.601～2.253μg(r=0.9993,n=6)范围内线性关系良好;方法的平均回收率都在95%～105%范围内,RSD均小于3.0%。结论:该方法简便、快速、重现性好、准确可靠,可用于郁舒颗粒中芍药内酯苷和芍药苷的含量测定。

双波长超高效液相色谱指纹图谱鉴定芪参益气滴丸质量

目的建立芪参益气滴丸(QSYQDP)双波长UPLC指纹图谱,用系统指纹定量法鉴定其质量。方法采用超高效液相色谱法,以毛蕊异黄酮苷为参照峰,分别确定30个(254 nm)和36个(203 nm)共有指纹峰,建立QSYQDP-UPLC双波长指纹图谱。以系统指纹定量法的宏定性相似度Sm、宏定量相似度Pm为评价指标,采用均方开方法整合双波长下各样品的信息,并结合系统聚类分析,实现对49批QSYQDPs的整体质量评价。结果 254 nm波长下80%的样品质量在5级以上;203 nm波长下70%的样品质量在5级以上;指纹信息整合后数据显示,83%的样品质量在5级以上。结论所建立的多波长QSYQDP-UPLC指纹图谱的评价方法可权衡各个指纹信息,清晰、全面地反应QSYQDP的整体质量,适用于其质量控制。

乌头碱、新乌头碱、次乌头碱水解和醇解产物的研究

目的:鉴定乌头碱等双酯型生物碱在水和乙醇中的高温分解产物,探究其转化规律。方法:利用液质联用手段,定性对照品在乙醇和水中的转化产物,并总结阐述转化规律。结果:通过对已知化合物的多级质谱的分析和文献查阅,确定了多个转化产物的结构。双酯型生物碱水解时主要生成苯甲酰乌头原碱和焦乌头碱,醇解时主要生成焦乌头碱和8-乙氧基乌头碱。同时醇解和水解时还产生了多种脱氧、脱水、脱甲基的产物。结论:焦乌头碱类生物碱是由于热解产生的,同溶剂种类无关系;8-乙氧基乌头碱类生物碱是由于醇解产生的,同溶剂种类有关系。醇解过程较水解过程产生了更多的产物。本研究通过液质联用鉴定了多种生物碱转化产物并总结了质谱裂解规律,为川乌中毒性双酯型生物碱的转化研究奠定了良好的基础,为川乌煎煮过程中的生物碱的转化研究提供了资料。

基于HPLC-DAD-ELSD及响应面设计优化黄芪浸润工艺研究

目的采用HPLC-DAD-ELSD及Box-Behnken响应面法优选黄芪Astragalus membranaceus var. mongholicus药材浸润工艺。方法基于HPLC-DAD-ELSD及响应面设计方法,以饮片合格率、指标成分含量、弯折检查为综合考察指标,选取浸润温度、浸润时间、加水量3个因素进行响应面实验设计,优化黄芪药材浸润工艺参数。结果最优浸润工艺为浸润温度20℃、浸润时间6h,加水量为1∶0.988,黄芪饮片合格率为95.81%,毛蕊异黄酮苷为0.072%,黄芪甲苷为0.276%。结合指纹图谱及热图分析,黄芪药材在浸润过程中发生物质基础变化,浸润过程中应当严格控制浸润参数,保证饮片的质量均一。结论优选后的黄芪药材浸润工艺稳定可行,重复性好,可以为黄芪药材饮片大批量生产工艺开发提供参考。

不同比例制川乌配伍甘草对单酯型生物碱煎出量的影响

目的研究制川乌配伍甘草对制川乌中多种单酯型生物碱煎出量的影响,探索其变化规律,以指导制川乌与甘草的合理配伍。方法 HPLC法测定制川乌与甘草不同比例配伍时煎出液中单酯型生物碱的总量,并通过对比,分析不同配比对煎出量的影响。结果随着甘草配伍量的增加,煎煮液中单酯型生物碱总量逐渐降低,每种单酯型生物碱煎出量趋于单煎液煎出量的40%。结论甘草配伍制川乌时,甘草的使用量应是制川乌的一半以上,既可以保证煎出液中单酯型生物碱总量稳定可控,又可以防止制川乌毒性过大造成使用危险。

黄连-大黄合煎蒽醌类成分溶出变化

目的:分析大黄-黄连不同配伍比例合煎时大黄中蒽醌类成分的溶出变化。方法:水煎液经盐酸加热水解、三氯甲烷萃取等方法处理后,用RP-HPLC分析大黄单煎和配伍合煎液中5个蒽醌成分的溶出。结果:黄连-大黄5个配伍比例(1∶2～2∶1之间)中芦荟大黄素、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚等4个蒽醌类成分有不同程度溶出增加,大黄酸有较大幅度的溶出降低。结论:在特定配伍比例范围内,配伍黄连对大黄中主要蒽醌成分有助溶作用。

HPLC-ESI-MS分析郁舒颗粒的化学成分

目的:建立郁舒颗粒HPLC-ESI-MS分析方法,鉴定其化学成分。方法:高效液相色谱采用Agilent ZORBAXSB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以0.1%醋酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱,检测波长为203 nm;质谱使用ESI离子源,正、负离子分别检测。结果:通过质谱分析以及参照相关文献共鉴定出46个成分,其中木脂素类成分12个、黄酮苷类成分8个、单萜苷类成分7个、皂苷类成分7个、有机酸类成分4个、间苯三酚类成分4个、鞣质类成分2个、糖酯类成分2个。结论:建立的方法灵敏度高、分离度好,为郁舒颗粒物质基础研究提供了一种快速准确的分析方法。

UPLC-Q-TOF/MS^E方法分析养血清脑颗粒的化学成分

为系统阐明复方中药养血清脑颗粒的化学组成,本研究采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间/全信息串联质谱(UPLC-ESI-Q-TOF/MS^E)技术,对养血清脑颗粒的化学成分进行分析。通过Q-TOF-MS^E提供化合物的准确相对分子质量、质谱碎片离子信息,与对照品的保留时间和质谱数据比对,结合参考文献,共鉴定出142种成分,主要包括酚酸类、单萜苷类、醌类、生物碱类和苯酞内酯类5类成分,并对各成分的药材来源进行归属。本研究全面、快速、准确地分析了养血清脑颗粒的化学成分,为养血清脑颗粒的药效物质基础和质量控制等研究奠定了基础。

LCMS-IT-TOF分析栀子炒焦前后化学成分的变化

目的:分析焦栀子的化学成分,考察栀子炮制前后的化学成分变化情况,明确焦栀子的药效物质基础。方法:采用液相色谱-离子阱-飞行时间质谱技术(LCMS-IT-TOF),色谱条件为ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),流动相0.005%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0~5 min,10%~15%B;5~8 min,15%B;8~18 min,15%~95%B;18~20 min,95%B;20~22 min,95%~10%B;22~25 min,10%B),柱温30℃,流速0.4 mL·min-1,进样量2μL;质谱分析使用电喷雾离子源(ESI),分别在正、负离子模式下扫描,扫描范围均为m/z 100~1 000。通过对照品比对、质谱数据分析、文献参考等对各离子峰进行鉴定,并比较炮制前后部分离子峰的峰面积,研究炮制后化学成分的变化情况。结果:共鉴定出了38个化合物,炮制后未产生新的化合物。炮制一定时间后,主要化合物的变化情况为栀子苷、京尼平-1-β-D-龙胆双糖苷、山栀子苷、绿原酸、西红花苷峰面积降低,京尼平苷酸、藏红花酸峰面积增高。结论:该方法能够快速准确地鉴别焦栀子中的化学成分,栀子炮制后环烯醚萜类和西红花苷类成分含量发生了显著变化,这可能与焦栀子的止血活性和心脑血管保护作用有关。

基于响应面及加权评分的黄芪蜜炙工艺优化

目的采用Box-Behnken响应面分析法结合多属性决策优化黄芪蜜炙工艺。方法以蜜水稀释比、炒制温度、炒制时间为考察因素,以蜜炙黄芪中毛蕊异黄酮苷、黄芪甲苷、总皂苷、总多糖、总黄酮、含水量为考察指标,采用优序图法对各指标进行权重赋予,并计算综合权重。结果黄芪最佳工艺为蜜水稀释比1∶0.6034,炒制温度为147.74℃,炒制时间为4.887min,综合得分值为0.638~0.678。结论基于响应面及加权综合评分优选的黄芪蜜炙工艺可有效减少炮制过程中成分的损失,饮片成色佳,工艺可重现性强,为黄芪蜜炙工艺的开发提供可靠理论证据。

绿原酸与亚硫酸根的反应与其在鉴别硫熏药材的应用

目的:探索绿原酸与亚硫酸钠反应产物的结构、反应位点,以及硫熏后金银花中绿原酸化学变化情况。方法:将绿原酸与亚硫酸钠置于温和条件下进行化学反应,利用液相色谱-离子阱-飞行时间质谱技术(LC-MS-IT-TOF)以及核磁共振波谱(1H-NMR)检测技术对反应产物进行检测,并用LC-MS-IT-TOF检测硫熏后及未硫熏的金银花水提取液。结果:经过对碎片离子、分子裂解规律及精确相对分子质量等质谱数据的分析,结合化学位移、峰强度以及峰裂分等核磁信号结果,初步鉴定绿原酸与亚硫酸钠的生成产物为绿原酸α,β-不饱和羰基加成产物:3-{[3-(3,4-二羟基苯基)-2-磺丙基]氧基}-1,4,5-三羟基环己烷-1-羧酸或者3-{[3-(3,4-二羟基苯基)-3-磺丙基]氧基}-1,4,5-三羟基环己烷-1-羧酸,并在硫磺熏蒸金银花中检测到与加成产物相同的特征碎片,而在未硫熏金银花中没有发现。结论:该研究首次证明了绿原酸与亚硫酸反应产物结构和反应位点,并检测到硫熏金银花中的绿原酸亚硫酸加成产物。尽管目前尚未明确金银花硫熏后产生的亚硫酸加成化合物对金银花功效和毒理活性影响,仍应关注硫熏药材中活性成分的变化情况。同时该研究还可为含有α,β-不饱和羰基结构的中药硫熏后化学成分变化的研究提供参考。

基于化学组分探究蒙古黄芪与膜荚黄芪药材及其蜜炙品之间物质基础差异

目的研究旨在基于化学组分信息探究两种基源药用黄芪及其蜜炙品物质基础差异,为炙黄芪饮片药材基源选择提供依据。方法分别建立多批次蒙古黄芪及膜荚黄芪药材及其蜜炙品指纹图谱,采用中药指纹图谱相似度评价系统软件全谱峰匹配及相似度分析,采用主成分和聚类分析分析两者物质基础差异。结果蒙古黄芪和膜荚黄芪药材及其蜜炙品指纹图谱无显著差异,相似度高,缺乏特异性指标成分。采用OPLS-DA强化组间差异,筛选差异性化学组分(VIP>1)化学组分进一步分析得原药材有显著差异,然炮制后无显著差异。结论蜜炙可减少基源导致的物质基础差异,蒙古黄芪和膜荚黄芪均可作为炙黄芪药材基源。