贵州野生天麻抗真菌肽基因表达载体的构建

为了构建凤冈野生天麻的抗真菌肽基因(gaf)的表达载体,经BamHI和HindIII酶切的pMD18-T-gaf和pET32a(+)质粒的纯化回收产物并进行连接,连接产物pET32a(+)-gaf转化大肠杆菌感受态细胞DH5α后,采用菌落PCR、酶切鉴定和阳性质粒测序分析。结果表明:构建的凤冈野生天麻抗真菌肽基因表达载体通过菌落PCR、酶切鉴定和阳性质粒测序分析,目的片段成功插入载体,目的片段与预期的gaf基因大小(545 bp)相符。试验成功构建了贵州野生天麻抗真菌肽基因表达载体,pET32a(+)-gaf可以用来制备抗真菌蛋白。

凤冈野生天麻抗真菌肽基因(gaf)的克隆与序列分析

为了克隆凤冈野生天麻的抗真菌肽基因(gaf),以凤冈野生天麻的RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增抗真菌肽基因(gaf),经克隆和测序结果显示:RT-PCR产物电泳扩增的目标条带长度为545 bp;经测序和序列分析,该基因与Genebank中公布的序列编码天麻抗真菌蛋白的基因序列(AY032588)同源性达97%。此研究成功地克隆了凤冈野生天麻抗真菌肽编码基因。

几种不同方法检测抗蛔虫抗体的建立

目的为了更准确地对蛔虫感染进行检测。方法本研究以蛔虫虫卵蛋白为可溶性抗原,建立了间接血凝试验(IHA)、间接ELISA和琼脂扩散试验(AGP)方法,检测100份来自农村小学生的血清样本。结果间接ELISA阳性检出率为10.00%(10/100),IHA阳性检出率为7.0%(7/100),AGP阳性检出率为4.00%(4/100)。结论间接ELISA具有灵敏度高,特异性强的优点,可用于蛔虫病的诊断。

间接ELISA检测蛔虫抗体方法的建立

目的寻找能更准确地对蛔虫感染进行检测的方法。方法以蛔虫虫卵可溶性蛋白为抗原,建立检测蛔虫特异性抗体的间接ELISA方法。结果 ELISA的最佳工作条件是:抗原包被浓度为1μg/mL,血清最佳稀释度为1∶80,酶标二抗的最佳工作浓度为1∶8 000。对100份人血清样本采用本方法进行检测,其阳性检出率为10.0%;血清样本对应粪便样本进行现场粪检虫卵法确定阳性率为2.0%。结论建立了稳定而特异的抗蛔虫体IgG的间接ELISA检测方法,可用于蛔虫感染的临床监测。

常见动物疫病的防治措施

介绍了几种常见动物疫病(口蹄疫、猪瘟、禽流感)的防治措施。

如何饲养育肥肉兔

一、选好育肥兔品种。优良的肉兔品种增重快、耗料少、屠宰率高，肉的品质好。目前。育肥效果较好的肉用型品种有新西兰兔、加利福尼亚兔、比利时兔、公羊兔等；饲养比利时兔、大耳兔与本地兔杂交的仔兔，育肥效果也很好。如有条件．最好用上述良种公兔和本地母免进行杂交配种．这样所产的仔兔，其生长优势更为明显。

蛔虫抗原基因ALAg表达载体的构建及其重组蛋白诱导小鼠的免疫保护研究

目的确定蛔虫基因工程疫苗候选基因。方法连接经BamHI和EcoRI酶切的pMD18-T-ALAg和pET-28a(+)质粒的纯化回收产物,将连接产物pET-28a(+)-ALAg表达载体转化表达菌株BL21(DE3)进行诱导表达,并纯化重组蛋白(rALAg)。30只小鼠分成免疫组、佐剂组和对照组,每组10只,各组分别接种重组蛋白与弗氏完全佐剂(FCA)混合物、FCA以及磷酸盐缓冲液(PBS)后,采用蛔虫感染性虫卵进行攻击(3600个/只),观察各组小鼠体内虫体数,并采用间接ELISA法检测小鼠血清中抗体IgG。结果 rALAg能被兔抗蛔虫阳性血清所识别。免疫组小鼠的肝脏和肺脏中的蛔虫幼虫数量(25.30±4.55)比对照组(57.60±5.76)减少了69.26%,与对照组和佐剂组比较差异有统计学意义(P<0.01);免疫组IgG抗体水平检测血清吸光度值A45(00.858±0.003)与对照组(0.149±0.004)、佐剂组比较(0.134±0.004)差异有统计学意义(P<0.01)。结论 ALAg基因可作为蛔虫基因工程疫苗的候选基因。

蛔虫抗原基因ALAg克隆及序列分析

为了确定蛔虫基因工程疫苗的候选基因,试验以蛔虫幼虫的RNA为模板,利用RT-PCR方法扩增出ALAg基因,扩增产物克隆到pMD18-T载体,筛选阳性克隆测序并进行Blast分析。结果表明:该基因与GenBank公布的猪蛔虫As37抗原基因(AB078971)的同源性为95%,与西式贝蛔虫Ag3抗原基因(EU927450)的同源性为92%。说明ALAg基因是线虫特有的抗原基因。