钩藤药材的特征图谱建立、化学模式识别分析及其与不同基原、混伪品的鉴别

目的建立不同产地钩藤药材超高效液相色谱(UPLC)特征图谱,并进行化学模式识别分析,同时对钩藤不同基原样品及其混伪品进行鉴别。方法采用UPLC法建立43批不同产地钩藤药材的特征图谱,结合聚类分析及主成分分析对其进行质量分析,然后对钩藤不同基原样品及其混伪品进行鉴别。结果建立了钩藤药材UPLC特征图谱,标定了13个共有峰,并指认峰2为儿茶素、峰3为绿原酸、峰4为隐绿原酸、峰7为异绿原酸B、峰8为异去氢钩藤碱、峰9为异钩藤碱、峰10为去氢钩藤碱、峰11为异绿原酸C、峰12为钩藤碱和峰13为喜果苷。通过聚类分析可将43批钩藤药材按照产地分为5类。进一步通过主成分分析发现,江西、湖南产钩藤药材主成分综合得分较高,为0.264~2.904分。通过特征图谱可将钩藤不同基原样品及其混伪品进行有效区分。结论建立的UPLC特征图谱可用于钩藤药材的质量控制,且本研究发现江西、湖南产钩藤药材质量较优。

基于AHP-CRITIC权重分析法结合Box-Behnken设计-响应面法优化盐橘核水提取工艺

目的:优化盐橘核水提取工艺。方法:以柠檬苦素、诺米林、黄柏酮的转移率及出膏率为评价指标,利用混合加权法(AHP-CRITIC法)确定权重系数,计算多指标综合评分,并结合Box-Behnken设计-响应面法考察饮片粒度、加水量、提取时间的影响,优选盐橘核水提取工艺。结果:优选提取工艺为饮片粒度过6目筛网,一、二煎加水量分别为12倍、10倍,提取时间分别为1.0 h、0.5 h。结论:优选出的提取工艺稳定可行,可为盐橘核工业化生产提供参考。

基于灰色关联度分析和偏最小二乘回归辨识款冬花止咳活性成分

目的:款冬花具有止咳化痰的作用,以止咳为主。研究显示款冬花的某些成分可能与止咳作用相关,另有某些成分被证实具有止咳活性,但款冬花止咳药效的物质基础尚未阐明。本研究通过对款冬花提取物的高效液相色谱指纹图谱与止咳作用进行谱效相关分析,旨在阐明款冬花的止咳活性成分群。方法:采用高效液相色谱法建立10批款冬花提取物的指纹图谱并获得其化学成分数据;选用豚鼠作为实验动物,采用枸橼酸引咳法获得10批款冬花提取物的止咳药效数据。将SPF级健康雄性Hartley豚鼠随机分为S1~S10组、阳性对照组和空白对照组(共12组),每组10只,S1~S10组分别给予款冬花提取物S1~S10(4 g/kg),阳性对照组给予枸橼酸喷托维林(10 mg/kg),空白对照组给予纯化水,各组连续给药5 d,将豚鼠置于5 L容积的密闭广口瓶内,用超声雾化器以最大喷雾力度喷入17.5%的枸橼酸并持续0.5 min,记录每只豚鼠的咳嗽潜伏期和5 min内咳嗽次数。采用灰色关联度分析和偏最小二乘回归对款冬花提取物的化学成分数据和止咳药效数据进行谱效相关分析,预测款冬花的止咳活性成分群。对预测的款冬花止咳活性成分群进行等效性验证:将SPF级健康雄性Hartley豚鼠随机分为S9组、活性成分群组、阳性对照组和空白对照组(共4组),每组10只,S9组给予款冬花提取物S9(4 g/kg),活性成分群组给予预测的止咳活性成分组合物(剂量相当于4 g/kg的款冬花提取物S9),阳性对照组给予枸橼酸喷托维林(10 mg/kg),空白对照组给予纯化水,各组连续给药5 d,动物造模和药效指标观察同前。结果:共建立10批款冬花提取物的高效液相色谱指纹图谱并获得14个主要共有峰的峰面积数据;获得10批款冬花提取物的止咳药效数据。与空白对照组比较,阳性对照组及S1、S2、S3、S4、S6、S7、S8、S9、S10组的咳嗽潜伏期加长(均P<0.01),阳性对照组及S1、S2、S4、S6、S8、S9、S10组的5 min内咳嗽次数减少(均P<0.05)。谱效相关分析显示:异绿原酸C、异绿原酸A、绿原酸、异绿原酸B、异槲皮苷、芦丁6种成分对款冬花止咳作用的贡献度较高,初步判断为款冬花的止咳活性成分群。等效性验证显示:S9组、活性成分群组的2个药效指标的差异均无统计学意义(均P>0.05),证实异绿原酸C、异绿原酸A、绿原酸、异绿原酸B、异槲皮苷、芦丁为款冬花的止咳活性成分群。结论:谱效相关分析结合等效性验证可用于款冬花止咳药效物质基础研究。款冬花发挥止咳作用是多成分共同作用的结果。

中药配方颗粒临床综合评价维度和方法的现状分析

《关于结束中药配方颗粒试点工作的公告》(2021年第22号)的发布,以及中药配方颗粒部分国家标准的实施,表明我国中药配方颗粒产业将进入一个全新的发展阶段。近年来,药品临床综合评价受到越来越多的关注,中药配方颗粒的应用越来越多,开展中药配方颗粒临床综合评价势在必行。目前中药配方颗粒的研究主要侧重于与中药饮片的一致性及其质量控制等方面,其临床综合评价维度和方法尚在建立之中。通过归纳总结现有的药品临床综合评价维度和方法,同时考虑到中药配方颗粒不同于化学成分相对单一的化学药,又区别于中药饮片、中成药,并结合中药配方颗粒的质量稳定性和中医药特色,提出建立适宜中药配方颗粒的临床综合评价维度和方法,为广泛开展中药配方颗粒临床综合评价提供参考。

清上蠲痛汤标准汤剂挥发油的UPLC特征图谱建立及成分分析

目的建立清上蠲痛汤标准汤剂挥发油的特征图谱,初步推断该方中影响临床治疗效果的主要挥发油类活性成分。方法采用水蒸气蒸馏法提取清上蠲痛汤标准汤剂中挥发油,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》建立15批样品的超高效液相色谱(UPLC)特征图谱并进行相似度评价;采用超高效液相色谱四极杆飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF/MS)法对标准汤剂挥发油类成分进行指认、鉴定;采用气质联用(GC-MS)法分析其挥发油类成分组成。结果15批清上蠲痛汤标准汤剂挥发油的UPLC特征图谱的相似度在0.949~0.997之间;共得到12个共有峰,经UPLC-Q-TOF/MS鉴定主要成分为甲基丁香酚、E-藁本内酯、E-正丁烯基苯酞等。GC-MS共鉴定出23个成分,主要为3,4,5-三甲氧基甲苯、百秋李醇、Z-藁本内酯等。结论建立了清上蠲痛汤标准汤剂挥发油的特征图谱,初步推断甲基丁香酚、藁本内酯、E-正丁烯基苯酞、百秋李醇、3,4,5-三甲氧基甲苯可能是影响清上蠲痛汤挥发油临床治疗效果的主要活性成分。

位点特异性PCR鉴别水牛角及其伪品

目的:开发一种针对水牛角的特异性聚合酶链式反应(PCR)鉴别方法,快速、准确地鉴别水牛角与其他混伪品。方法:通过比对水牛、黄牛、牦牛、山羊等动物的细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因序列差异,筛选水牛的特异性单核苷酸多态性(SNP)位点,设计出相应的鉴别引物,并对影响PCR体系的相关条件进行优化,考察验证方法的耐受性和适用性。结果:PCR条件为扩增体系20μL、退火温度60℃、循环次数32次、DNA模板量为100 ng、10μmol·L^(-1)正反引物对各0.8μL时,使用设计的鉴别引物SN1对水牛角进行PCR扩增,产物经琼脂糖凝胶电泳后出现约358 bp的特异性条带,其他物种的样品均无条带出现。结论:该PCR鉴别方法特异性好,能迅速、准确地鉴别水牛角和其他常见动物角类样品,为水牛角的真伪鉴别提供参考。

经典名方黄芪桂枝五物汤不同形态基准物质质量评价及分析

目的建立经典名方黄芪桂枝五物汤(Huangqi Guizhi Wuwu Decoction,HGWD)物质基准;研究HGWD饮片-水煎液-浓缩液-冻干粉全过程量值传递规律,为含挥发性物质的经典名方基准样品的制备方法和科学评定提供借鉴。方法根据国家发布的《古代经典名方关键信息表(25首方剂)》制备15批HGWD水煎液;建立其多指标含量测定和特征图谱分析方法,开展特征峰归属及相似度评价;考察比较HGWD水煎液、冻干粉中多指标含量,分析其在水煎液-浓缩液-冻干粉制备过程中量值传递规律,科学合理确定基准样品的物理形态,并拟定HGWD基准样品中各成分的含量和转移率范围,建立HGWD物质基准。结果HGWD中桂皮醛、肉桂醇在浓缩干燥过程中显著降低,其余指标成分在水煎液、浓缩液与冻干粉间能较完整地传递;15批HGWD基准样品的特征图谱相似度均>0.9,确定8个特征峰,分别来自于方中白芍、桂枝和生姜;出膏率范围8.0%~11.0%;指标成分黄芪甲苷含量为0.04%~0.07%,转移率为9.0%~18.0%;芍药苷含量为1.5%~3.0%,转移率为33.0%~62.0%;肉桂醇含量为0.02%~0.04%,转移率为25.0%~47.0%;桂皮醛含量为0.02%~0.05%,转移率为0.7%~1.5%;肉桂酸含量为0.03%~0.06%,转移率为17.5%~34.0%;6-姜辣素含量为0.04%~0.08%,转移率为7.0%~14.0%。结论确定以水煎液作为HGWD基准样品物理形态,为含挥发性物质的经典名方基准样品物理形态的科学选择提供参考;建立了HGWD物质基准各项质量指标,并对其量值传递规律进行分析,为该经典名方复方制剂开发提供依据。

基于谱效关系的款冬花祛痰活性成分研究

目的:研究款冬花提取物的高效液相色谱指纹图谱与祛痰作用的谱效关系,筛选款冬花的祛痰活性成分。方法:采用高效液相色谱法建立款冬花提取物的指纹图谱并获得其化学成分含量信息,采用小鼠酚红排泌模型获得款冬花提取物的祛痰药效指标信息,采用偏最小二乘回归法对款冬花提取物的化学成分含量信息与祛痰药效指标信息进行谱效相关分析。结果:初步判断芦丁、异槲皮苷、绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C及峰3成分、峰17成分构成款冬花的祛痰活性成分群。结论:款冬花的祛痰作用是多成分共同作用的结果。本研究结果可为关联药效的款冬花质量标准的建立提供参考。

基于UPLC-CAD的不同产地麦冬及不同基原山麦冬药材鉴别研究

目的:建立麦冬药材超高效液相-电雾式检测器(UPLC-CAD)特征图谱测定方法,对不同产地麦冬及山麦冬药材进行鉴别研究。方法:采用ACQUITY UPLC BEH Shield RP_(18)(Waters,2.1 mm×150 mm,1.7μm)色谱柱;以乙腈-0.08%甲酸为流动相进行梯度洗脱,流速为0.30 mL/min,柱温为40℃;建立麦冬特征图谱,并对其特征峰进行分析。结果:建立的特征图谱方法符合方法学要求,16批川麦冬及19批浙麦冬样品的特征图谱中各有10个共有峰作为特征峰,通过质谱指认及对照品确认,川麦冬指认了其中5个,浙麦冬指认了其中2个。通过麦冬皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷可区分麦冬和山麦冬;麦冬皂苷D可区分浙麦冬和川麦冬;麦冬龙脑苷可区分湖北麦冬和短葶山麦冬。结论:建立的特征图谱能有效区分川麦冬、浙麦冬及湖北麦冬、短葶山麦冬,该方法具有快速、准确和操作简单等特点,为麦冬药材的快速鉴别提供理论依据。

高效液相色谱法测定红景天中酪萨维含量

目的建立红景天中酪萨维含量测定方法。方法采用高效液相色谱(HPLC)法。色谱柱为Kromasil C18柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水(50:50),检测波长为270nm,柱温为室温,流速为1.0mL/min。结果酪萨维进样量在5.2～52μg范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9998),平均加样回收率为98.60%,RSD=1.54%(n=6)。结论所建立的HPLC法操作简便、快速,灵敏度高,结果准确可靠,专属性强,重现性好,可用于红景天药材的质量控制。

固本祛湿化瘀方中8种成分同时测定及其治疗银屑病作用靶点预测

目的同时测定固本祛湿化瘀方中绿原酸、芍药内酯苷、芍药苷、异嗪皮啶、新落新妇苷、落新妇苷、新异落新妇苷、异落新妇苷的含量,并预测其治疗银屑病的作用靶点。方法该药物UPLC-DAD分析采用ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm);流动相甲醇-0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;柱温30℃;检测波长220 nm。基于网络药理学,在TCMIPV2.0平台上检索各成分作用靶点,GnenCards、Disgent、ONIM数据库中筛选其核心靶点,构建蛋白互作网络和疾病-成分-靶点-通路网络。结果8种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.9999),平均加样回收率94.2%~100.7%,RSD 1.80%~2.90%。HSP90AA1、ESR1、AHR、AKT1、ESR1、CYP1B1、TOP2A、JAK1、PTK2B、PPKCB为核心靶点。分子对接发现,HSP90AA1与各成分之间均有较高的结合潜力。结论UPLC-DAD法简便、快速、准确,可用于固本祛湿化瘀方的质量控制。网络药理学可明确方中各成分治疗银屑病的核心靶点,从而为进一步研究其作用机制奠定基础。

经典名方清胃散物质基准特征图谱及指标成分含量测定研究

目的建立经典名方清胃散物质基准的HPLC特征图谱以及含量测定方法,控制其质量以保证后续制备。方法遵循古籍并结合前期制备工艺的考察,制备15批清胃散物质基准,采用HPLC建立物质基准特征图谱,使用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)计算相似度;将5种药材中的7种指标性成分作为清胃散物质基准含量测定指标,建立其HPLC含量测定方法,并对15批样品进行含量测定。结果特征图谱相似度均≥0.975,标定了13个共有峰,对7个共有峰进行了化学成分指认,分别为梓醇(1号峰)、阿魏酸(5号峰)、异阿魏酸(6号峰)、盐酸小檗碱(7号峰)、盐酸巴马汀(8号峰)、丹皮酚(12号峰)、藁本内酯(13号峰)。建立了2套指标性成分含量测定方法,其一测定了梓醇、阿魏酸、异阿魏酸、丹皮酚的含量,规定了4种成分含量应分别在1.48~2.76、0.14~0.26、0.48~0.90、1.72~3.19 mg·g^(-1)之间;其二测定了盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱的含量,规定了3种成分含量应分别在0.65~1.21、0.57~1.07、1.86~3.45 mg·g^(-1)之间。结论通过清胃散物质基准特征图谱及含量测定方法建立了清胃散物质基准的质量控制方法,该方法简单可靠,为后续质量控制及制剂开发提供依据及基础。

基于主成分分析和灰色关联度法的白及UPLC特征图谱及不同商品规格等级质量研究

目的:研究不同商品规格等级白及特征图谱间的差异性,为白及的质量评价提供参考。方法:按白及药材质量大小将白及分为3个等级,建立白及超高效液相色谱(UPLC)特征图谱分析方法,并采用相似度评价、主成分分析和灰色关联度法分析不同商品规格等级之间的差异。结果:对16批不同商品规格等级白及进样分析,共确定9个特征共有峰,指认其中1种成分,不同商品规格等级白及间的相似度为0.393~0.996,差异较明显。主成分分析和灰色关联度法分析结果显示一等品白及得分整体偏低,排名靠后。结论:不同商品规格等级白及特征图谱具有一定差异性,本研究可为白及不同商品规格等级的划分及其质量评价提供参考。

制药企业成本管理与控制策略分析

在当前复杂的经济环境下,制药企业面临着巨大的发展压力。制药企业要想在激烈的竞争中站稳脚跟,就需要做好成本管理与控制的工作,从而实现降本增效的目的,帮助企业获取良好的经济效益,为自身稳健发展提供保障。本文首先分析了成本管理与控制的必要性,进而提出了成本管理与控制的具体策略,以期能够为相关工作的开展提供参考与借鉴。

江西道地特色药材资源发展现状

道地药材是中药材中的精品,具有品质佳、疗效好等特点。江西道地特色药材资源丰富,应用历史源远流长,经过长期的中医临床验证和优选,形成了一批被历代医家所推崇的著名道地特色药材,如栀子、枳壳、车前子、江香薷等,至今在国内药材市场上享有盛誉。本文阐述了江西道地特色药材的形成历史、道地沿革、品种变迁及发展现状。

基于UPLC指纹图谱和多指标成分定量的野生与栽培贯叶金丝桃的质量评价

目的 研究并建立贯叶金丝桃UPLC指纹图谱和多指标成分的含量测定方法。方法 采用Eclipse Plus C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm);以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长为300 nm;流速为0.25 mL·min^(-1);柱温为25℃。建立了同时测定金丝桃苷、芦丁、槲皮苷、槲皮素含量及指纹图谱的方法,并结合相似度评价、聚类分析、主成分分析和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)对22批贯叶金丝桃样品进行质量分析。结果 建立了贯叶金丝桃药材UPLC指纹图谱共有模式,标定了11个共有峰,并指认了其中9个,主成分分析基本可将22批贯叶金丝桃按照不同产地分为5类;采用OPLS-DA分析,得到5个质量差异标志物,差异排序依次为峰10(槲皮苷)>峰5>峰6(芦丁)>峰8(异槲皮苷)>峰1(绿原酸)。含量测定结果表明,野生品与栽培品4个指标成分总含量差异不甚明显,不同产地4个指标成分总量略有差异,其中以陕西、新疆产地的含量较高。结论 建立的UPLC指纹图谱和4个指标成分同时测定的方法可用于贯叶金丝桃药材的质量控制及质量标准提升。

白术药材UPLC特征图谱方法构建及模式识别研究

目的:以有机酸类物质为指标建立白术药材的超高效液相色谱指纹图谱测定方法,并结合聚类分析及主成分分析法(PCA)评价不同产地的白术药材质量。方法:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(柱长为50 mm,内径为2.1 mm,粒径为1.7μm),以乙腈为流动相A,以0.1%磷酸溶液为流动相B,进行梯度洗脱,流速为0.25 mL/min;检测波长为325 nm。指纹图谱采用中药色谱指纹图谱相似度评价(2012版)软件,对不同产地的白术UPLC指纹图谱进行分析,并运用SPSS软件对指纹图谱进行统计分析。结果:指纹图谱共标定了9个峰作为共有峰,并指认其中7个共有峰,分别为绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、1,3-二咖啡酰奎宁酸、异绿原酸B、异绿原酸A和异绿原酸C,15批白术药材相似度均大于0.8。聚类分析将15批白术分为5类,PCA结果表明,前2个主成分的累积贡献率达到81.72%,选择这2个主成分因子即可对白术药材进行综合评价。根据综合得分可知,来自安徽亳州和河北安国产地的白术药材中有机酸类成分占比更大,其质量可能更佳。结论:以有机酸类物质为指标建立的UPLC方法简单、可靠,精密度、稳定性、重复性良好,结合PCA可以快速、客观地评价不同产地白术药材的质量差异,为白术水提制剂的质量评价研究奠定基础。

基于UPLC指纹图谱和化学计量学评价不同产地青蒿药材质量

目的建立4个产地15批青蒿药材的超高效液相色谱法(UPLC)指纹图谱及2种成分的定量分析方法,以评价不同产地青蒿药材质量。方法采用UPLC进行测定,建立15批青蒿药材指纹图谱,通过超高效液相色谱-质谱联用技术对指纹图谱共有峰进行鉴定,并进行相似度评价,采用主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)对不同产地青蒿药材的差异性成分进行分析,并对2个差异性成分东莨菪内酯和3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸的含量进行测定。结果15批青蒿药材指纹图谱共标识出22个共有峰,通过质谱分析指认出10种化学成分。相似度评价结果显示,15批样品指纹图谱相似度为0.870~0.972,其中12批样品指纹图谱相似度>0.9。PCA将15批样品划分为两类,其中重庆产地为一类,其他产地为一类,OPLS-DA共确定10个差异标志物。含量测定结果显示,重庆产地样品东莨菪内酯和3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸含量明显高于其他产地样品。结论采用指纹图谱、化学计量学、含量测定相结合,能有效区分不同产地青蒿药材,为其质量评价提供依据。

基于UPLC特征图谱的南、北葶苈子及其混伪品的鉴别研究

目的:研究并建立南葶苈子药材超高效液相色谱法(UPLC)特征图谱,并对北葶苈子及混伪品进行对比研究。方法:采用ACQUITY UPLC BEH Shield RP_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm);以乙腈-0.3%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长为254 nm;流速为0.30 mL·min^(–1);柱温为35℃。结果:建立了南葶苈子药材UPLC特征图谱共有模式,标定了12个共有峰,指认了其中7个,槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖基-7-O-β-D-龙胆双糖苷(峰3)可区分南葶苈子和北葶苈子;芥子碱(峰2)可区分南葶苈子和菥蓂子;异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖基-7-O-β-D-龙胆双糖苷(峰6)可区分南葶苈子和荠菜子。结论:建立的UPLC特征图谱能有效区分南葶苈子、北葶苈子及其混伪品荠菜子、菥蓂子,为控制葶苈子药材质量提供了参考。

不同基原吴茱萸药材中质量标志物预测分析:基于网络药理学和指纹图谱

目的:基于网络药理学和指纹图谱方法,预测吴茱萸药材中潜在的质量标志物(Q-Marker)。方法:应用网络药理学构建吴茱萸“成分-靶点-通路”网络,分析吴茱萸药材中的核心成分,运用高效液相色谱法建立18批吴茱萸及石虎药材指纹图谱,进行相似度评价及共有峰确认及指认,并采用多元统计分析,进一步验证吴茱萸药材中潜在的Q-Marker。结果:网络药理学研究结果表明,吴茱萸碱、吴茱萸次碱等在内的吲哚类生物碱成分及槲皮素、异鼠李素等其他有机酸类成分具有高连接度,是吴茱萸的主要活性成分。同时建立了药材指纹图谱,并指认其中7个共有成分,分别为新绿原酸、绿原酸、金丝桃苷、橙皮苷、去氢吴茱萸碱、吴茱萸碱、吴茱萸次碱。结合网络药理学活性和成分可测性以及Q-Marker理念,初步预测吴茱萸碱、吴茱萸次碱可作为吴茱萸药材潜在的Q-Marker,并进一步通过数理统计方法验证了Q-Marker体现药材共性的重要度。结论:结合网络药理学及特征图谱分析预测了吴茱萸的质量标志物,为阐明吴茱萸药效物质基础及作用机制提供了参考依据。