NMR法同时测定注射用丹参多酚酸中的迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B和甘露醇

目的建立核磁共振（NMR）法同时测定注射用丹参多酚酸中迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B和甘露醇的含有量。方法采用BRUKER AVANCEⅢ600超导核磁共振波谱仪采集谱图;质子频率为600.23 MHz;3-（三甲基硅烷）丙酸-d4钠盐为内标。结果迷迭香酸在1.685~0.105 mg/m L（r2=0.999 3）、紫草酸在1.235~0.077 mg/m L（r2=0.999 4）、丹酚酸B在16.21~1.013 mg/m L（r2=0.999 7）、甘露醇在12.54~0.784 mg/m L（r2=0.999 5）范围内均呈良好的线性关系,加样回收率分别为104.4%、105.6%、104.1%和102.5%,RSD值分别为1.5%、1.7%、2.3%和2.2%。结论该方法可同时测定注射用丹参多酚酸中的主要化学成分和辅料。

毛蕊花糖苷通过激活PI3K/AKT通路促进成年小鼠神经干细胞增殖

目的观察毛蕊花糖苷对原代成年小鼠神经干细胞增殖的影响,并探讨其可能的作用机制。方法从成年C57BL/6小鼠脑室下区分离、培养原代神经干细胞,并通过神经干细胞标志蛋白Nestin免疫荧光染色,对分离得到的神经干细胞进行鉴定。不同浓度毛蕊花糖苷(5、10、20、40μmol·L^(-1))在无有丝分裂原(EGF/bF GF)的条件下处理细胞24 h。采用CCK-8法检测细胞活力,免疫组化法计数BrdU阳性细胞率,检测细胞增殖能力,Western blot方法检测给药后神经干细胞Akt的磷酸化水平。结果毛蕊花糖苷在无有丝分裂原存在的条件下,能明显促进神经干细胞的增殖,并明显提高p-Akt的表达。而在加入PI3K/AKT信号通路阻断剂LY294002后,这一作用被明显抑制。结论毛蕊花糖苷对体外培养的神经干细胞具有明显促增殖作用,该作用机制可能与化合物激活Akt通路有关。

HPLC方法同时测定独活中二氢欧山芹醇-β-D葡萄糖苷和二氢欧山芹醇的含量

[目的]研究独活中二氢欧山芹醇-β-D葡萄糖苷和二氢欧山芹醇的最佳提取条件,同时建立了同时测定独活中二氢欧山芹醇-β-D葡萄糖苷和二氢欧山芹醇含量的高效液相色谱法(HPLC)。[方法]通过单因素分析法考察了提取溶剂、料液比、超声提取时间对独活提取物中二氢欧山芹醇-β-D-葡萄糖苷和二氢欧山芹醇含量的影响。采用HPLC法对不同提取条件和不同产地的独活中两种成分含量。[结果]独活中二氢欧山芹醇-β-D葡萄糖苷和二氢欧山芹醇的最佳提取条件为提取溶剂用100%的甲醇,料液比为1∶50,超声提取60min。二氢欧山芹醇-β-D-葡萄糖苷在0.3125~20μg/m L内呈良好线性,平均回收率为99.0%(RSD=2.99%);二氢欧山芹醇在0.3125~20μg/m L内呈良好线性,平均回收率为102%(RSD=2.59%)。[结论]所建立的高效液相色谱法,能够准确测定独活中二氢欧山芹醇-β-D葡萄糖苷和二氢欧山芹醇含量,可用于独活药材的质量评价。