细菌性腹水患者病原菌分布、实验室指标及预后情况分析

目的探讨细菌性腹水患者的临床特征、实验室指标及预后情况,为临床早期诊断和治疗提供依据。方法回顾性分析2019年1月至2022年1月天津中医药大学第一附属医院诊断为肝硬化腹水患者的临床资料,根据诊断标准将其分为细菌性腹水组(n=24)、自发性细菌性腹膜炎组(n=20)与对照组(n=26)。比较三组患者的临床特征、实验室指标及预后情况。结果由乙型肝炎引起的肝硬化腹水占比最高。细菌性腹水组患者的血白细胞计数、中性粒细胞百分比、腹水白细胞计数及多形核白细胞计数均显著高于对照组(P<0.05)。革兰阳性菌是引起细菌性腹水的最主要病原体,其中葡萄球菌占比最高。有感染症状的10例细菌性腹水患者,进行腹水培养同时给予抗感染治疗,病情均好转;无感染症状的14例患者,根据病情发展给予不同的治疗方案,1例患者死亡,其余患者病情好转。结论临床中细菌性腹水患者数量较大,主要致病菌为革兰阳性球菌;将临床症状与实验室指标结合,有利于细菌性腹水的早期诊断,并决定治疗方案。

新型冠状病毒核酸检测7种振荡混匀方法效果评价

目的对新型冠状病毒(SARS-CoV-2)核酸检测7种振荡混匀方法进行比较,确定有效方法的最优参数。方法分2个阶段进行研究:第1阶段,采用小样本(每种方法30例),从形态学、流式细胞术、实时荧光聚合酶链反应(PCR)3个层面评价7种振荡方法的有效性,并确定最优时间参数;第2阶段,采用大样本(2150例),验证最优参数下多管涡旋和超声振荡的效果。结果形态学和流式细胞术分析结果显示,除超声振荡外,其他6种振荡混匀方法均会导致保存液中上皮细胞明显增多(P<0.05)。实时荧光PCR结果显示,颠倒和回旋振荡处理后,核酸扩增未见内参循环阈值(Ct)明显下降(P>0.05);吹打6次和往复振荡5 min处理后,核酸扩增未见内参Ct值下降;单管/多管涡旋和超声振荡处理后,核酸扩增内参Ct值显著下降(P<0.0001)。大样本量实时荧光PCR结果显示,多管涡旋振荡2 min较超声振荡5 min效果更优(P<0.0001)。结论SARS-CoV-2核酸检测采用2min涡旋振荡混匀的方法进行前处理可提高检测效率。

实时荧光聚合酶链反应检测新型冠状病毒室内质控方法初探

目的绘制实时荧光聚合酶链反应(RT-PCR)定性室内质控图和基于循环阈值的Levey-Jennings质控图,探究新型冠状病毒RT-PCR检测的室内质控方法。方法使用无菌生理盐水按照1∶5、1∶10、1∶20、1∶30、1∶40对第三方质控物进行倍比稀释,确定室内弱阳性质控的稀释倍数。统计该实验室2022年1-2月新型冠状病毒RT-PCR阴阳性质控原始记录,以自定义数值绘制定性结果散点图。统计2022年1-2月每批次弱阳性质控的靶基因Ct值,分别对N基因和ORF1ab基因两组Ct值进行正态分布检验,根据前20次检测结果分别计算N基因和ORF1ab基因的靶值X和标准差s,绘制Levey-Jennings质控图。结果确定1∶30为每日室内质控的弱阳性质控品的稀释倍数。定性检测散点图可直观发现1次弱阳性质控检出阴性的“假阴性”反应。弱阳性质控N基因、ORF1ab基因Ct值均符合正态分布(P>0.05)。N基因Ct值靶值X为34.13,变异系数为1.91%,所有Ct值均在X±3 s以内,5次出现±2 s警告,符合Westgard质控规则。ORF1ab基因Ct值靶值为35.30,变异系数为2.58%,出现1次+3 s失控,5次±2 s警告,第31~41批次违反了10x规则,第73~80批次违反了R 4s规则。结论应用定性室内质控散点图和Levey-Jennings质控图建立的新型冠状病毒室内质控方法具有可行性,能够有效监测和预警检测过程中的质量问题,保证检测结果准确可靠。

血清IFN-γ、IL-1β、ESR水平对类风湿关节炎预后的预测价值

目的探究血清γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-1β、红细胞沉降率(ESR)水平对类风湿关节炎(RA)预后的预测价值。方法选择2019年8月至2022年8月在天津中医药大学第一附属医院就诊的167例RA患者作为研究对象,入院后均接受中西医规范治疗,检测比较治疗前后RA患者血清IFN-γ、IL-1β、ESR水平,并根据临床治疗30 d疾病转归情况分为预后良好组和预后不良组,采用多因素Logistic回归分析探究血清IFN-γ、IL-1β、ESR与RA预后的关系,绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析血清IFN-γ、IL-1β、ESR水平对RA预后的预测价值。结果治疗30 d后,167例RA患者中有108例患者预后良好,59例患者预后不良。治疗后,RA患者血清IFN-γ、IL-1β、ESR水平均低于治疗前[(27±3)ng/L比(39±6)ng/L,(105±4)ng/L比(159±21)ng/L,13(5,17)mm/1 h比65(60,72)mm/1 h](P<0.01)。预后不良组年龄、简式疼痛问卷表评分、28个关节疾病活动度评分系统评分、血清类风湿因子、趋化素、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C反应蛋白、白细胞计数、血小板计数、血尿酸、基质金属蛋白酶(MMP)-3、MMP-9、IL-17、Toll样受体4阳性率、IFN-γ、IL-1β、ESR高于预后良好组(P<0.01),吸烟史占比、血清调节性T细胞水平、IL-4低于预后良好组(P<0.01),晨僵时间长于预后良好组(P<0.01)。多因素逐步Logistic回归分析结果显示,高IFN-γ、IL-1β、ESR、趋化素、TNF-α水平是影响RA患者预后不良的危险因素(OR=3.865,95%CI 1.211~6.519;OR=3.796,95%CI 1.174~6.418;OR=3.747,95%CI 1.034~6.460;OR=3.543,95%CI 1.241~5.845;OR=3.384,95%CI 1.116~5.652)(P<0.01)。血清IFN-γ、IL-1β、ESR指标联合检测预测RA患者预后的灵敏度、特异度、AUC分别为81.36%、82.41%、0.869,高于血清IFN-γ、IL-1β、ESR单独检测。结论IFN-γ、IL-1β、ESR在RA患者血清中呈高表达,可作为预测RA疗效预后的有效指标,且联合检测预测价值更高。

动物水平的绿原酸通过Notch1信号通路调控非小细胞肺癌凋亡及机制研究

背景与目的绿原酸类物质可通过调节细胞周期、诱导凋亡、抑制细胞生长等途径产生抗癌作用,Notch信号通路与人类许多肿瘤都存在密切的关系,本研究旨在探讨绿原酸通过Notch1信号通路控制非小细胞肺癌细胞凋亡的作用机制,为临床应用以及Notch1靶向药物的研究提供依据。方法 MTT法检测不同浓度的绿原酸对非小细胞肺癌细胞系A549细胞形态和细胞增殖的影响;流式细胞仪检测绿原酸对A549细胞的凋亡和细胞周期的影响;建立A549细胞的裸鼠荷瘤模型;测量肿瘤大小和重量;实时荧光定量PCR法检测Notch信号通路相关因子的m RNA表达水平;免疫印迹法检测Notch信号通路相关因子的蛋白表达水平。结果绿原酸抑制A549细胞增殖,诱导A549细胞凋亡,增加细胞G2期/M期细胞百分比增加(P<0.05),并且呈现剂量依赖趋势。在A549细胞的裸鼠荷瘤模型中,实验组肿瘤大小和体积明显小于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。试验组Notch1、VEGF、Delta4、HES1、HEY1 m RNA表达量较对照组明显减少(P<0.05)。实验组Notch1蛋白明显减少,PTEN、p-PTEN、p-AKT明显增加(P<0.05)。结论在动物水平,绿原酸可能通过Notch1信号通路调控非小细胞肺癌的凋亡,可能是通过减少VEGF的表达,下调Delta 4水平,从而抑制Notch1信号通路的活化。Notch1信号通路可能通过PTEN与PI3K/AKT通路存在交叉调控作用。

微流控芯片分选富集循环肿瘤细胞的研究进展

近年来,循环肿瘤细胞(CTCs)研究得到了越来越多的关注,许多研究报告已经证实其在肿瘤转移的早期诊断、治疗方案选择、个体化治疗及探索肿瘤转移机制等方面具有潜在的价值,然而CTCs在循环系统中的含量极低,这成为限制其临床相关应用的主要难点。微流控芯片技术具有低成本、快速、高通量及操作简单等优势,利用微流控芯片可实现CTCs的高速、高回收率、高纯度的分选富集,近年来得到广泛的关注。本文综述了近年来在微流控芯片内进行CTCs分选富集的研究并探讨了各种方法的优缺点,并在本研究团队的研究基础上进行了展望。

SOX4对非小细胞肺癌细胞A549的顺铂耐药作用的影响

背景与目的肺癌是最严重的恶性肿瘤之一,其中非小细胞肺癌发病率在肺癌中居首位。部分患者对顺铂耐受是导致化疗失败的主要原因。SOX4是转录调节因子,在多种肿瘤的发生发展过程中发挥着重要的作用,通过调控β-catenin的表达对Wnt信号通路进行调控。本研究旨在探讨SOX4对非小细胞肺癌细胞A549的顺铂耐药作用的影响。方法体外诱导法建立顺铂耐药的肺癌细胞株A549/DDP,CCK8法检测A549及A549/DDP细胞对顺铂的耐药性。绘制A549与A549/DDP细胞生长曲线。Western blot检测耐药细胞株中SOX4的蛋白表达水平。CCK8法检测敲减SOX4后耐药细胞株A549/DDP对顺铂耐药性。实时定量PCR和免疫印迹法检测敲减SOX4后A549/DPP细胞中β-catenin和Survivin蛋白的表达。结果成功构建非小细胞肺癌顺铂耐药细胞株A549/DDP,其耐药性是亲本细胞的13.7倍,差异有统计学意义(P<0.001)。生长曲线显示耐药细胞株与亲本细胞增殖速度没有统计学差异(P<0.05);与A549细胞相比,耐药细胞A549/DDP细胞中SOX4的表达显著增高(P<0.001)。敲减SOX4后,A549/DDP细胞的耐药性显著降低;敲减SOX4后,A549/DDP细胞中β-catenin和Survivin的m RNA和蛋白表达水平显著降低。结论 SOX4的表达水平影响非小细胞肺癌细胞A549对顺铂的耐药性。

线粒体酶活性及线粒体肿胀与不同运动强度的关系

背景:关于不同运动强度对机体的影响早有研究,并且取得了不少有价值的成果。但是对于不同运动强度对线粒体Na+,K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性以及线粒体肿胀程度影响的研究较少。目的:观察不同运动强度对大鼠骨骼肌线粒体Na+,K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶以及线粒体肿胀的影响。方法:将24只SD大鼠随机分为正常对照组,中等强度运动组和高强度运动组。正常对照组大鼠正常笼内生活,不运动。另2组游泳训练方式,分别建立中强度和高强度运动模型,进行相应的运动锻炼,训练4周。结果与结论:中强度运动组线粒体Na+,K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性与正常对照组相比均增高(P<0.05),线粒体肿胀程度降低(P<0.05);而高强度运动组线粒体Na+,K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性与正常对照组相比均降低(P<0.05),线粒体肿胀程度增大(P<0.05)。实验结果表明中强度运动可以保护线粒体Na+,K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶的活性,提高线粒体功能;而高强度运动则降低了线粒体的功能。

同型半胱氨酸的临床应用

同型半胱氨酸（Hcy）是蛋氨酸代谢过程中的一个重要中间产物。血浆同型半胱氨酸代谢异常会引起高同型半胱氨酸血症,是多种疾病的独立危险因素。现就该指标在心脑血管疾病、糖尿病肾病、肿瘤等疾病的最新临床应用作一综述,以便更多了解其对疾病的诊断、疗效以及预后的重要应用价值。

血清降钙素原与C反应蛋白在细菌感染性疾病中的临床应用

目的对血清降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)试验在细菌或病毒感染中的鉴别诊断中的价值进行评价。方法对该院住院的85例细菌感染患者血清PCT、CRP浓度进行检测,并与46例病毒感染患者进行分析比较。结果如以血清PCT≥0.5ng/mL为阳性标准,则细菌感染组的血清PCT检测阳性率为94.12%,病毒感染组为10.87%,对细菌性感染诊断的灵敏度为94.12%,特异度为87.5%,阳性预测值为94.12%,阴性预测值为89.13%,诊断符合率为92.37%;以血清CRP≥8mg/L为阳性判断标准,则细菌感染组CRP阳性率为29.41%,病毒感染组为23.91%,对细菌性感染诊断的灵敏度为29.41%,特异度为76.09%,阳性预测值为69.44%,阴性预测值为36.84%,诊断符合率为45.8%。结论血清PCT试验对于细菌或病毒感染性疾病的鉴别诊断作用明显优于血清CRP试验。

急性脑梗死患者检测Hcy、NOS及STM检测的临床意义探讨

目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)、一氧化氮合成酶(NOS)及可溶性血栓调节蛋白(STM)在急性脑梗死(ACI)疾病中水平变化及临床意义。方法检测150例ACI患者及50例健康成人血清标本中的Hcy、NOS及STM水平并进行显著性检验及相关性分析。结果与健康对照组比较,ACI患者Hcy、NOS及STM结果明显偏高,差异有统计学意义(P<0.05)。ACI患者血清NOS、STM升高水平与Hcy升高水平呈正相关。结论 Hcy、NOS及STM是ACI发生内皮损伤的标志物,检测其平对判断病情、指导治疗具有一定意义。

脑钠素与肾损伤

脑钠素(BNP)的功能、结构、作用方式与心钠素(ANP)类似,具有很强的利钠、利尿、扩张血管和降低血压的作用,是天然的肾素-血管紧张素-醛固酮系统拮抗剂。BNP的降解是由于肾脏分泌的24,11-中性肽链内切酶(NEP)破坏其环状结构而失活。人类BNP前体(proBNP)分裂产生的N末端片段(NT-proBNP)在我国表面健康人群中的水平随年龄增高而呈上升趋势。慢性肾衰患者其NT-proBNP的水平可明显升高。BNP可作为肾脏功能损伤的标志物。

血小板活化因子病理、生理学研究进展

血小板活化因子(PAF)是迄今为止发现的一种最强活性的脂类介质,作为一种特殊类型的细胞因子,参与多种生理及病理效应,在体内发挥着类似于激素的生物学活性。生理状态下,体内PAF主要参与细胞内信息传递和调节,与生殖,胎儿发育、分娩和肾脏的作用联系紧密。在病理情况下,PAF可以在炎性反应、心脑血管微循坏障碍、胃肠黏膜损害等一系列相关疾病的发生、发展过程中发挥重要作用。现就PAF的病理、生理学最新研究概况作一综述。

人绒毛膜促性腺激素对人PBMC产生MIF的影响

目的:探讨人绒毛膜促性腺激素(hCG)对人外周血单核细胞(PBMC)产生巨噬细胞移动抑制因子(MIF)的影响。方法:分离正常人PBMC,体外加入不同浓度的hCG,在37℃5%CO2条件下培养一定时间收获细胞或加入一定浓度的hCG,同样条件下培养,在不同时间收获细胞,用荧光定量PCR方法检测MIF mRNA转录水平。结果:在实验的hCG浓度范围内,MIF的转录水平随着hCG浓度增加而明显提高。在100U/mL的hCG作用下,MIF mRNA表达在培养的1～2h达到峰值,随后很快下降,至8h基本回到刺激前水平。结论:hCG在一定浓度范围内有促进MIF mRNA转录的作用,且在本实验筛选浓度下,MIF mRNA转录水平与作用时间相关,提示hCG可通过促进PBMC分泌细胞因子参与一定的免疫调节作用。

人绒毛膜促性腺激素对人PBMC IL-8mRNA表达的影响

目的:探讨人绒毛膜促性腺激素(hCG)对人外周血单个核细胞(PBMC)IL-8基因表达的影响。方法:分离正常人PBMC,体外加入或不加hCG,37℃5%CO2条件下培养8h,收获培养细胞,用荧光定量PCR方法检测IL-8mRNA表达水平。结果:在使用的hCG浓度范围内,IL-8的表达水平随着hCG剂量增加而明显提高。而在hCG100U/mL的作用下,IL-8mRNA表达在培养8h达到峰值,随后逐渐下降,至24h降到最低水平。结论:hCG可通过促进PBMC分泌细胞因子参与一定的免疫调节作用。

不同溯源的两台血凝仪测定纤维蛋白原方法学比较

目的比较SYSMEX CA6000与STA Compact 2台血凝仪测定纤维蛋白原的结果,了解其偏倚的可接受性。方法根据美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP9-A2文件,用2台血凝仪同时测定40例患者的纤维蛋白原,检查离群点并进行直线相关分析,计算医学决定水平处的预期偏倚。结果2台仪器测定结果均无离群点。直线回归方程为YΛ=0.851 6X-0.048 7,r=0.992。3个医学决定水平处预期偏倚分别为0.093、0.197、0.791 g/L。结论纤维蛋白原的3个医学决定水平处预期偏倚95%置信区间下限均低于允许偏倚,SYSMEX CA6000测定结果与STA Compact测定结果相当,偏倚可接受。

肺炎支原体感染血清学检测分析

目的分析该院肺炎支原体（MP）感染者血清学情况。方法采用日本富士瑞必欧株式会社MP抗体检测试剂，对2009年1月至2010年12月在该院就诊的怀疑为MP感染患者进行血清MP抗体检测（被动凝集法），对不同年度、不同季节及不同年龄MP肺炎的发病情况进行统计。结果2009年MP抗体阳性率为40．4％，2010年为57．4％。0～1岁婴儿期MP阳性率25．9％；〉1～3岁组幼儿MP阳性率为44．5％；4～6岁学龄前期MP感染阳性率为55．1％；7～14岁学龄期MP感染阳性率为60．3％；20～40岁阳性率为55．2％；〉60岁阳性率为28．3％。说明阳性率的高低与不同的年龄段有关。通过观察发现支原体肺炎一年四季均可发病。但20lO年秋季开始呈流行上升趋势，尤其在12月达最高峰，为73．7％。结论支原体肺炎的发病与年龄、季节和年度有密切关系，尤其是MP感染引起的肺外表现，可使病情复杂化，应引起高度重视，从而做好控制及预防。

缺血性脑卒中患者血浆脂蛋白相关磷脂酶A2检测的临床意义

缺血性脑卒中疾病的重要病理基础是动脉粥样硬化（ atherosclerosis， AS ），而炎症现已被公认为是AS发展过程中的核心因子，贯穿于AS的整个发生、发展环节［1］。脂蛋白相关磷脂酶 A2（ lipoprotein-associated phospholipase A2， Lp-PLA2）作为一种新型的炎症标志物，参与AS斑块形成的各个阶段，在坏死中心、巨噬细胞、凋亡的巨噬细胞内以及易损和破裂的斑块中有高度表达［2］。 D-二聚体（D-dimer，D-D）是纤溶酶作用于交联纤维蛋白后产生的特异性降解产物，其升高特异地反映体内纤溶活性增强和凝血酶生成增多，对血栓形成性疾病有早期快速诊断的价值［3］。 D-D与Lp-PLA2可能对缺血性脑卒中的发生、发展有重要意义。为此，我们检测了缺血性脑卒中患者血浆Lp-PLA2水平，并分析其与颈动脉内中膜厚度（ carotid intima-media thickness， CIMT）、动脉粥样硬化斑块的稳定性以及D-D之间的关系，以期为缺血性脑卒中的临床诊断、分期及疗效观察提供理论依据。

甲状腺抗体亚临床性甲减患者免疫功能的研究

目的探讨甲状腺抗体阳性的亚临床性甲状腺功能减退(SHO)患者在病情发展的不同阶段,自身免疫反应的变化。方法将95例住院甲状腺抗体阳性的SHO按照甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)的浓度,分为高中低3组,以30例健康体检者为正常对照组,检测甲状腺激素、免疫球蛋白浓度、T细胞亚群,分析各组间指标的差异。结果低浓度组的促甲状腺激素(TSH)、免疫球蛋白G(IgG)、CD4+、CD4+/CDCD8+显著高于正常对照组(P<0.05),CDCD8+显著低于正常对照组(P<0.05);中浓度组的TSH、CD3+、CD4+、CD4+/CDCD8+、CD16+、免疫球蛋白E(IgE)、显著高于正常对照组(P<0.05),IgG、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、C3、C4、CDCD8+显著低于正常对照组(P<0.05);高浓度组的TSH、CDCD8+、CD16+显著高于正常对照组(P<0.05),血清游离甲状腺素(FT4)、CD3+、CD4+、CD4+/CDCD8+显著低于正常对照组(P<0.05)。结论甲状腺抗体阳性的SHO患者随着甲状腺抗体浓度的增加,体内自身免疫反应由补体介导的细胞毒反应转为Ⅳ型变态反应,再转为抗体依赖细胞介导细胞毒反应,是由体液免疫到细胞免疫的过程。