青岛地区鸭源四环素类耐药大肠杆菌流行情况调查及耐药基因分析

【目的】通过对山东青岛地区鸭源样品进行四环素类耐药大肠杆菌的分离鉴定,了解其流行分布规律。对耐药菌株进行药敏检测及耐药基因鉴定,研究四环素类耐药大肠杆菌多重耐药率及耐药基因携带情况,为抗生素的合理应用提供理论依据。【方法】以肉鸭泄殖腔拭子及盲肠样本为试验材料,通过四环素选择培养基分离大肠杆菌。采用琼脂稀释法测定耐药菌株对12种抗菌药物的敏感性,通过PCR检测四环素类耐药大肠杆菌携带耐药基因情况,进一步通过接合试验评估tet(X)基因的可转移性,进而对部分tet(X)基因阳性菌株进行全基因组测序,同时探究tet(X)耐药基因的遗传环境特征。【结果】采集的63份样品经分离鉴定,获得48株四环素耐药大肠杆菌,分离率为76.19%。药敏试验结果显示,所有菌株对四环素和土霉素耐药,对多西环素和氟苯尼考耐药率分别为93.75%和89.59%,且对多黏菌素、替加环素及美罗培南耐药率分别为64.58%、16.67%和4.17%;所有菌株均存在多重耐药现象,其中以耐7种药物最多。耐药基因检测结果与耐药情况基本相对应,耐药率高的药物相应耐药基因呈现较高携带率;其中floR、tet(A)、qnrS、mcr-1、bla CTX-M基因流行率较高,依次为93.75%、83.33%、79.17%、77.08%和47.92%。8株替加环素耐药菌中,仅2株携带了已知基因tet(X4),其中1株tet(X4)基因具有可转移性;2株美罗培南耐药菌中仅1株检测到了碳青霉烯耐药基因bla NDM,其他菌株均未检测到已知耐药基因,表明这些菌株中可能存在未知替加环素/碳青霉烯类耐药机制。与之相反的是,37株mcr-1基因阳性菌株中,6株对多黏菌素仍表现敏感,表明这些菌中的mcr-1基因的耐药功能并未成功发挥。【结论】四环素类耐药大肠杆菌已在肉鸭中广泛流行,多重耐药基因介导的多重耐药现象已十分严峻,且耐药机制复杂多样;进一步增加了食品安全风险,威胁人类健康。因此,应加强鸭源耐药菌的监测及研究,提高养殖业合理用药水平。