猪囊尾蚴抗原的免疫化学研究

应用琼脂双扩散(DID)、免疫电泳(IEP)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)和十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对猪囊尾蚴的各部分抗原,即完整幼虫、囊液、头节和囊壁抗原进行分析。实验结果表明,4种抗原间存在相同的抗原成分。囊液中含有糖蛋白和脂蛋白。囊液、头节和囊壁蛋白质的主要分子量均在100KDa以下。囊液与头节有3条分子量相同的主带(60、46、38KDa),与囊壁只有1条分子量(46KDa)相同主带。从免疫学和生物化学角度初步探索了囊液、头节和囊壁蛋白质之间的相互关系及主要蛋白质组分。

肿瘤和糖尿病患者弓形虫感染的血清流行病学分析

近年来发观,弓形虫是免疫功能低下人群的重要机会性病原之一,它仅次于卡氏肺孢子虫和隐孢子虫。肿瘤患者由于化疗和放疗引起免疫抑制,其弓形虫感染率也明显高于一般人群。为此我们自1989～1990年采集了癌症、糖尿病患者和对照人群血清,以间接血凝试验检测其弓形虫抗体,并进行了流行病学初步分析。

Dot-ELISA检测弓形虫循环抗原的方法学研究

本文对 Dot-ELISA 检测弓形虫循环抗原(CAg)的方法学进行了研究。结果显示,其最佳试验条件为:纯化的特异抗体1;100稀释,与被检样本在37℃孵育2h;第二抗体-HRP 1:2000稀释,置室温30min;DAB 量5mg/10ml、H_2O_22μl。在该条件下,检测 TBS、正常的人血清、小鼠血清、猪血清、人尿和脑脊液内弓形虫抗原量,最低检出阈值依次是3.84pg/ml、96pg/ml、0.48ng/ml、0.48ng/ml、12ng/ml、12ng/ml,并呈良好的重复性。以5×10~3形虫 RH 株速殖子感染小鼠,d_3呈弱阳性,d_4明显阳性。用该条件检测人恶性疟原虫、旋毛虫和猪囊虫抗原,未呈现交叉反应。

天津、沈阳和郑州猪囊尾蚴蛋白质的圆盘电泳比较分析

本文采用圆盘电泳(Disc-PAGE)对不同地区的猪囊尾蚴蛋白质进行比较。对天津地区的3个样本,沈阳和郑州各一个样本的分析发现:各地区的猪囊尾坳显示相似的蛋白质Disc-PAGE带谱,但也存在着差异,表现在蛋白质区带的迁移率上,此差异为猪囊尾蚴“血清型”的存在提供了佐证。

四株弓形虫在HeLa细胞内生长动态的观察

用HeLa细胞系研究了自国内分离的3株弓形虫的生长动态,并与RH株进行了比较。RH株弓形虫速殖子与HeLa细胞单层接触,只需2min,虫体便可侵入;而CN株需5min,ZS_2和PP株需10min。虫体侵入HeLa细胞至开始增殖,约经6h的迟滞期。通过计算各株不同孵育期纳虫泡内虫体数以及直线回归方程处理,发现RH株增殖一代的时间是5.2h,CN株是5.98h,ZS_2株是6.78h,PP株是7.69h。3株弓形虫中,以CN株对HeLa细胞的侵入力和增殖力与RH株最接近。

中药抗弓形虫速殖子作用的体外试验

中药的水浸煎剂对弓形虫RH株速殖子侵袭HeLa细胞,以及对细胞内的虫体增殖,具明显的抑制作用。在1:20稀释时,能使弓形虫侵袭力下降60％以上者有甘草、柏子仁、牛膝、鸡冠花、女贞子、续断和滛羊蒮。甘草的抑制率达100％。如果用含1:40中药的培养液孵育感染弓形虫的HeLa细胞,37℃经24h,甘草对虫体增殖的抑制率为76.67％,补骨脂为63.60％,青蒿为45.32％。

E-McAb及E-PcAb直接ELISA法检测CAg诊断囊虫病的价值

对囊虫病的诊断多年来一直延用抗体的检测,而抗体的存在并不能确定活动性感染,更不能判断感染强度和考核疗效。日前有不少学者使用多抗或单抗测定血吸虫、疟疾、弓形虫等病人血清中的循环抗原(CAg),获得良好的结果,用抗体检测囊虫病血清中 CAg 尚属少见。本文用常规 ELISA和酶标单抗(E-McAb)及酶标多抗(E-PcAb)直接 ELISA 法同时检测囊虫病人血清中的特异性抗体和 CAg,结果报告如下。

注射器抽吸法制备日本血吸虫童虫及其应注意的问题

童虫是日本血吸虫生活史中的一个重要阶段。为了对童虫的生物学、免疫学及抗血吸虫药物方面的研究,许多学者对体外尾蚴转化为童虫进行了很多研究,试用了多种转化方法。但目前较常用的是穿皮法和机械法。特别是应用注射器机械抽吸的剪应力转化童虫的方法,简单易行,适用于多种学科的研究。我们用此法获得较理想的结果。今将该法在操作过程中影响童虫得量和存活率的因素以及避光等因素应注意之点介绍如下。

同时测定血清猪囊虫特异性抗体及循环抗原的临床价值

检测１４０例癫痫病人血清猪囊虫抗体。并对３０例抗体阳性者进行循环抗原（ＣＡｇ）测定。结果；抗体阳性为５８例（４１％），ＣＡｇ阳性１２例（４０％）。经脑ＣＴ证实１２例抗体及ＣＡｇ阳性者均为活动性病变。表明，同时测定抗体和ＣＡｇ可作为诊断活动其脑囊虫可靠方法。

肟醚类拟除虫菊酯对德国小蠊的杀虫活性研究

肟醚类杀虫剂属于烷基芳基酮肟—氧苄醚新型拟除虫菊酯。据报导这类化合物有很高的杀虫活性,南开大学元素所合成了一系列化合物。为寻找高效低毒价廉杀灭(虫非)蠊的新品种,我们以室内饲养德国小蠊为试材,对20个肟醚类化合物进行了杀虫活性测定,并将筛选出杀虫活性突出的8119,特制成杀虫笔,模拟现场进行试验,取得较好效果,现将结果报告如下: 一、供试化合物。8119(环丙基—4—氯—苯基酮肟—O—3—苯基苄基醚)801、802、803、804、805、807、808、810、

急性弓形虫病兔循环抗原动态的实验观察

用Dot-ELISA观察人工感染2株不同剂量的弓形虫家兔血清循环抗原(CAg)动态。结果感染RH株弓形虫速殖子10~4/只和10~2/只的两组家兔,CAg出现和全部阳转时间均在感染后3d。但RH株的感染量影响宿主血清CAg动态。感染PP株10~6/只和10~4/只的两组家兔,血清CAg变化无明显差异。RH株CAg水平变化急骤,而PP株变化较平缓,表明宿主血清CAg动态与弓形虫虫株毒力密切相关。

ELISA检测蛔虫病抗体的实验研究

酶联免疫吸附试验(ELISA)已用于多种寄生虫病的诊断。Ruitenberg等(1977)报告用ELISA微量平板法检测感染犬弓蛔的猴血清抗体滴度,有明显上升,作者认为,ELISA微量平板法比试管法敏感。我们于1983年采用ELISA微量平板法检测感染猪蛔虫的兔血清中特异性抗体.

旋毛虫幼虫的抗原分析

本文对旋毛虫幼虫可溶性抗原(TSA)的组分进行了分析。TSA含有5种血清学特异性抗原组分;经SDS-PAGE,TSA具有19条考马斯亮蓝染色带。

旋毛虫肌肉幼虫ES和S_3抗原诱发小鼠保护性免疫的研究

迄今为止,国外对旋毛虫抗原诱发保护性免疫及其抗原生化分析的报道较多,但国内有关旋毛虫幼虫排泄物分泌物抗原(ES)和杆细胞颗粒相关抗原(S_3)诱发保护性免疫的研究报道尚少。我们于1990年5月进行了本实验,初步探索旋毛虫幼虫ES和S_3抗原接种小鼠后诱发保护性免疫的情况,为旋毛虫病的免疫预防打下基础。

旋毛虫肌肉幼虫可溶性抗原成份的分析

本文用不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳(Disc—PAGE)和十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)对旋毛虫肌肉幼虫的可溶性抗原进行了分析。结果表明经Disc—PAGE电泳后可辨认出16条带。经SDS—PAGE电泳后可辨出22条带,其中有6条主带,文中对各主带在保护性免疫及免疫诊断中的意义进行了讨论。

肿瘤患者抗弓形虫抗体的检测

弓形虫病是一种人兽共患疾病,临床表现复杂多样。人体多为隐性感染,当机体受到其它疾病侵害或免疫力降低时,可转为急性发作。肿瘤病人伴发弓形虫感染,甚至导致死亡,国外已有报道。

4种肝脏吸虫蛋白质圆盘电泳和等电聚焦的比较分析

应用聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳和薄层等电聚焦分析比较4种肝脏吸虫成虫可溶性蛋白质,结果显示肝片形吸虫、华枝睾吸虫、东方次睾吸虫和台湾次睾吸虫圆盘电泳的区带数分别为20、18、18和15条,主带数分别为5.4、8和5条;等电聚焦的区带数分别为28、22、24和24条,主带数分别为10、3、7和7条。蛋白电泳结果表明东方次睾吸虫和台湾次睾吸虫为两个独立虫种。用数量分类学的相似率表示4种吸虫蛋白电泳谱的相似程度,结果显示东方次睾吸虫和台湾次睾吸虫最为相似,亲缘关系最近。

我国旋毛虫蛋白质和五种酶的同工酶等电聚焦电泳分析

应用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳对天津猪株（ＴＪＰ）、来源不明株（Ｘ）、长春犬株（ＣＣＤ）３个旋毛虫株肌肉期幼虫进行蛋白质和ＬＤＨ、ＭＤＨ、ＭＥ、ＳＯＤ、ＡＣＰ５种酶的同工酶分析。３株的蛋白电泳谱基本相似，仅ＴＪＰ株最酸区２条区带较其他株不显著，ＬＤＨ、ＭＤＨ、ＳＯＤ、ＡＣＰ４种酶的酶谱均相同，仅ＴＪＰ株的ＭＥ区带较其他株稍偏碱性。

弓形虫速殖子侵入宿主细胞的超微结构观察

用扫描电镜和透射电镜观察了弓形虫ＲＨ株速殖子对ＨｅＬａ细胞和小鼠腹腔细胞的侵入，说明虫体的侵入是一主动过程。对弓形虫顶端复合物的细胞器及其间的关系做了进一步描述。

猪囊尾蚴DNA限制性片断长度多态性分析

本文采用SDS-酚-乙醇沉淀法提取猪囊尾蚴与猪细颈囊尾蚴染色体。应用6种限制性核酸内切酶及分子杂交技术对5株猪囊尾蚴和1株猪细颈囊尾蚴的染色体DNA进行分析。结果显示猪囊尾蚴与猪细颈囊尾蚴之间以及猪囊尾蚴各株之间在DNA水平上存在差异。显示出DNA技术在寄生虫种、株间鉴别中的敏感性及特异性,同时为不同地区猪爽尾蚴抗原差异和猪囊尾蚴病“血清型”的存在提供了佐证。