口服木糖醇对糖尿病大鼠肾脏IGF-Ⅰ表达的影响

目的检测口服木糖醇对实验性1型糖尿病模型大鼠血糖及肾脏IGF-Ⅰ表达的影响。方法链脲佐菌素(STZ)一次性尾静脉注射造1型糖尿病大鼠模型,将成模大鼠随机分为糖尿病对照组(DC),糖尿病5%、10%、20%木糖醇(Xy)喂养组(D+5%、10%、20%Xy),另外设置正常对照组(NC)。喂养中分别在饲料中添加不同比例的木糖醇,开始分组喂养前留取血糖结果,第8 w末处死,处死前测量血糖。通过SABC免疫组织化学和定量分析方法观察各组大鼠肾脏IGF-Ⅰ表达的平均光密度(MOD)。结果血糖结果≥16.7 mmol/L证实模型构建成功。差异性喂养8 w后,各糖尿病组(DM)血糖与NC组相比仍升高(P<0.05),DC组血糖较0 w升高(P<0.05),而各D+Xy组8 w较0 w无明显变化。肾皮质/髓质IGF-Ⅰ表达的组间变化趋势一致:DC组较NC组IGF-Ⅰ表达量高;相比于DC组,随着饲料中添加木糖醇以及浓度的升高,IGF-Ⅰ表达量有逐渐降低趋势;皮质D+20%Xy组较DC组降低(P<0.01)且已与NC组无差异,髓质三个D+Xy组的IGF-Ⅰ表达量介于NC组、DC组之间。糖尿病大鼠在口服不同浓度木糖醇8 w后血糖与肾脏IGF-Ⅰ的表达量高度相关,r皮质=0.981(P=0.019),r髓质=0.998(P=0.002)。当血糖t∈28～35 mmol/L,皮质/髓质回归曲线方程可分别表示为y=186.036-705.932/t(R2=0.977,P=0.012),y=122.038+13.157 l nt(R2=0.997,P=0.002)。结论口服一定剂量木糖醇可稳定血糖及抑制肾脏IGF-Ⅰ表达,具有一定保护肾脏的作用。

正丁醇法制备大鼠脂肪组织细胞膜TSHR

目的:利用正丁醇对大鼠脂肪组织细胞膜上的促甲状腺素受体(TSHR)进行提纯,以获得膜受体的均一水溶性溶液。方法:使用差速离心法获得大鼠含TSHR脂肪组织细胞膜碎片后,用正丁醇进一步提纯;采用SDS-PAGE和ELISA法鉴定所得蛋白完整性、生物学活性,并用BCA法测定相关蛋白含量。结果:正丁醇提纯的大鼠TSHR结构完整;经正丁醇提纯后的TSHR包被酶标孔孔间测定值变异系数较未经正丁醇提取组以及阳性对照组低。结论:经正丁醇提纯后的大鼠TSHR可以满足临床ELISA法检测Graves病患者血清TRAb的要求,同时可以降低酶标孔间测定值的误差。

甲状腺素对甲状腺功能减低大鼠子代脑组织中同源盒基因Nkx2．2表达的影响

目的：探讨妊娠不同时期补充不同剂量甲状腺素对甲状腺功能减低子代大鼠脑组织中同源盒基因Nkx2.2表达的影响。方法：选取1月龄Wistar大鼠240只,雌雄各半。将雌性大鼠随机分为对照组,甲状腺功能减低（甲低）组,甲低孕鼠妊娠117d（妊早期甲低）补充甲状腺素高、中、低剂量组,甲低孕鼠妊娠1820d（妊晚期甲低）补充甲状腺素高、中、低剂量组共8组。各组均饲以低碘饲料,高、中、低剂量组每100g体质量每天分别补充甲状腺素3.5、2.0、0.5μg。对照组饮用碘酸钾溶液,总碘摄入量相当于大鼠生理碘需要量,其余7组饮用去离子水。3个月后与正常雄性大鼠交配。分别于孕17d、新生当天及生后20d,取8组子代大鼠的间脑组织,采用实时荧光定量PCR法检测脑组织中Nkx2.2mRNA的表达量。结果：在孕17d,甲低组的Nkx2.2mRNA表达水平低于对照组,其他6组均高于对照组;在新生当天和生后20d,除孕晚期甲低补充甲状腺素中剂量组外,其他各组的Nkx2.2mRNA表达水平均低于对照组;在生后20d孕早期甲低补充甲状腺素低、中、高剂量组的Nkx2.2mRNA表达水平与甲低组比较差别无统计学意义（P〉0.05）。结论：甲低孕鼠子代大鼠脑组织同源盒基因Nkx2.2的表达受补充甲状腺素剂量及孕期的影响。

口服木糖醇对糖尿病大鼠血糖及肾脏胰岛素样生长因子Ⅰ的影响及机制的探讨

目的检测口服木糖醇对实验性1型糖尿病模型大鼠血糖及肾脏胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-I)表达的影响,探讨口服木糖醇对于糖尿病大鼠肾脏的影响及机制。方法链脲佐菌素(STZ)一次性尾静脉注射造1型糖尿病大鼠模型,将成模的大鼠随机分为四组:糖尿病对照组(DC组)、糖尿病5%木糖醇喂养组(D+5%Xy组)、糖尿病10%木糖醇喂养组(D+10%Xy组)、糖尿病20%木糖醇喂养组(D+20%Xy组)。另外设置正常对照组(NC组)。实验前留取各组血糖测定结果。喂养中分别在饲料中添加不同比例的木糖醇。于实验第4周末处死动物,处死前测量血糖。通过SABC免疫组织化学方法检测各组大鼠肾脏IGF-I蛋白的表达水平。结果模型制备后,成模的大鼠血糖高于NC组,差异有显著性(P<0.05)。差异性喂养4周后,各糖尿病组大鼠血糖仍高于NC组(P<0.05),但D+20%Xy组较DC组的血糖下降,差异有显著性(P<0.05)。肾皮质、髓质IGF-I的基础表达量不同(P<0.01),但变化趋势一致,除D+20%Xy外,其他DM组较NC组均增高,差异有显著性(P<0.01);与DC组相比,D+5%Xy组肾脏皮质IGF-I表达增高(P<0.01),D+10%Xy组、D+20%Xy组降低,且D+20%Xy组表现出差异显著性(P<0.01)。结论口服木糖醇可调节糖尿病大鼠血糖水平,通过调节IGF-I表达进而影响肾脏功能。

缺铁性贫血对大鼠甲状腺功能的影响

目的研究缺铁性贫血对大鼠甲状腺功能的影响,以期为铁缺乏地区的碘缺乏病防治工作提供新的线索和思路。方法选择健康SPF-VAF级初断乳SD雄性大鼠30只,按体质量随机分为对照组(饲料平均含铁量为93.3mg/kg)和缺铁性贫血组(饲料平均含铁量为9.6 mg/kg),每组15只。喂养6周后,测定大鼠体质量和甲状腺质量,并计算甲状腺相对质量。取大鼠全血并分离血清,采用生化法检测血红蛋白、血清铁水平和总铁结合力;以化学发光法检测血清总三碘甲腺原氨酸(TT3)、游离三碘甲腺原氨酸(FT3)、总甲状腺素(TT4)、游离甲状腺素(FT4)和促甲状腺激素(TSH)水平。结果缺铁性贫血组大鼠体质量比对照组减轻(P<0.01),两组间甲状腺绝对质量和相对质量均未见统计学差异。缺铁性贫血组大鼠血红蛋白水平和血清铁水平比对照组降低(P均<0.01),总铁结合力比对照组升高(P<0.01)。缺铁性贫血组大鼠TT3、TT4、FT3和FT4均较对照组降低(P均<0.01)。结论缺铁性贫血可导致甲状腺功能减低,铁缺乏地区碘缺乏病防治过程中应同时注意人群铁营养状态,对缺铁个体进行铁营养补充。

碘铁联合缺乏对大鼠甲状腺功能的影响

目的观察碘铁联合缺乏对大鼠甲状腺功能的影响，为缺铁地区的碘缺乏病防治工作提供新的线索和思路。方法SPF／VAF级初断乳SD雄性大鼠60只．按体质量采用2×2析因分析方法将大鼠随机分为对照（N）组、碘缺乏（ID）组、铁缺乏（FD）组、碘铁联合缺乏（IFD）组，每组15只。通过饮食控制动物碘、铁摄入量，各组均自由饮用去离子水。喂养6周后，称取大鼠体质量和甲状腺质量；采集大鼠尿样，过硫酸铵消化-砷铈催化分光光度法检测大鼠尿碘；股动脉取血，生化法检测全血血红蛋白、血清铁水平和总铁结合力；化学发光免疫分析法检测血清总三碘甲腺原氨酸（TT3）、游离三碘甲腺原氨酸（FT3）、总甲状腺素（TT4）、游离甲状腺素（FT4）和促甲状腺激素（TSH）。结果与N组[（341．0±24．2）g]比较，FD组[（307．0±17．6）g]和IFD组[（294．5±29．5）g]大鼠体质量减轻（P均〈0．01）；ID组和IFD组大鼠甲状腺绝对质量[（31．8±3．8）、（22．9±3．4）mg]和相对质量[（9．4±1．6）、（7．8±1．1）mS／100g体质量]均高于N组[（17．6±3．7）mg，（5．2±1．I）ms／100g体质量，P均〈0．01]。大鼠尿碘中位数IFD组和ID组（22．5、31．5t．Lg／L）明显低于FD组和N组（167．6、163．8μg／L，P均〈0．01）。IFD组和FD组血红蛋白[（69．2±7．4）、（62．2±8．1）g／L]和血清铁[（4．9±1．4）、（5．2±0．8）la,mol／L]低于N组[（161．1±9．4）g／L，（27．3±6．5）μmol／L，P均〈0．01]，总铁结合力[（176．3±4．4）、（186．4±13．7）I,Lmol／L]高于N组[（99．1±9．0）μmol／L，P均〈0．01]。FD、ID、IFD组的皿[（47．42±6．58）、（35．27±6．97）、（30．07±4．75）nmol／L]、FT4[（27．60±2．32）、（21．67±2．79）、（19．45±1．97）pmol／L]低于N组[（68．97±9．95）nmol/L，（34．01±3．28）pmol／L，P均〈0．01]，但IFD组、FD组1TI＇3、n[（0．95±0．13）nmol／L，（5．18±0．54）pmol／L，（0．90±0．14）nmol／L，（4．81±0．41）pmol／L]低于N组[（1．23±0．13）nmol／L，（5．89±0．62）pmol／L，P均〈0．01]，而ID组[（1．46±0．14）nmo／／L，（7．28±0．79）pmol／L]高于N组俨均〈0．01）；ID、IFD组TSH[（6．39±4．41）、（3．12±1．52）mU／L]高于N组[（1．97±0．83）mU／L，P〈0．01或〈0．05]。析因分析显示，碘铁对FT3、FT4、TT3、TSH存在交互作用（P〈0．01或〈0．05）。结论碘缺乏和铁缺乏均可导致甲状腺功能减低，且两者具有交互作用，同时强化碘营养和铁营养可能是铁缺乏地区碘缺乏病的较好防治方法。

不同碘营养状态对大鼠肝组织Ⅰ型脱碘酶和脑组织Ⅱ型脱碘酶活性的影响

不同碘营养状态Wistar大鼠分别于饲养3、6、12个月时处死,放射免疫法测定血清甲状腺激素水平。放射性核素分析法检测大鼠脑组织Ⅱ型脱碘酶(DⅡ)和肝组织Ⅰ型脱碘酶(DⅠ)的活性。结果显示在早期碘缺乏状态下,动物出现以低T_4为主要表现的甲减,DⅠ和DⅡ活性代偿性上调。高碘在转录后直接抑制DⅠ的活性,使血清TT_3和FT_3下降,而DⅡ的活性增高,可能是由于T_4和T_3对酶的底物诱导失活所致。

甲状腺素对甲状腺功能减低大鼠子代脑组织中同源盒基因Nkx6．1 mRNA表达的影响

目的通过对妊娠期甲状腺功能减低（简称甲低）大鼠补充甲状腺素，探讨妊娠不同时间补充不同剂量甲状腺素对子代大鼠脑组织中同源盒基因Nkx6．1 mRNA表达的影响。方法1月龄Wistar大鼠240只，雌雄各半，体质量100—120g。按体质量将雌性大鼠随机分为8组：对照组，甲低组，甲低孕鼠妊娠早期（1～17d）补充甲状腺素（妊早甲低）高、中、低剂量组，甲低孕鼠妊娠晚期（18～20d）补充甲状腺素（妊晚甲低）高、中、低剂量组，每组15只。高、中、低剂量组每天补充的甲状腺素分别为3．5、2．0、0．5μg／100g体质量。8组大鼠均饲以重度缺碘地区粮食配制的饲料，对照组饮用含碘200μg／L的碘酸钾溶液，7个甲低组饮用去离子水。雄性大鼠用正常食料饲养，3个月后按1：1交配。8组大鼠分别取孕17d、新生、生后20d子代大鼠脑组织，采用实时荧光定量PCR法检测脑组织中Nkx6．1 mRNA表达。结果①成功建立了甲低动物模型，8组大鼠血清TT3、TT4、FT3、FT4组间比较差异有统计学意义（F值分别为4．08、31．99、5．79、26．34，P均〈0．01）。②在孕17d、新生、生后20d，Nkx6．1 mRNA表达组间比较差异有统计学意义（F值分别为758．720、1121．589、144．716，P均〈0．01）；组内不同时间比较差异有统计学意义（F值分别为2898．863、325．605、716．285、56．329、236．727、196．678、7115．752、9152．306，P均〈0．01）。③时间因素和剂量因素对Nkx6．1 mRNA表达有影响（F值分别为1176．655、246．530，P均〈0．01）；时间与剂量因素间存在交互作用（F=1249．934，P〈0．01）。④在孕17d、新生、生后20d，甲低组Nkx6．1 mRNA表达与对照组比较，差异有统计学意义（P均〈0．01）。⑤在新生、生后20d，6个甲低补充甲状腺素组Nkx6．1 mRNA表达与甲低组比较，差异有统计学意义（P均〈0．01）。⑥在孕17d、新生、生后20d，除妊早甲低中剂量组外，其余5个甲低补充甲状腺素组Nkx6．1 mRNA表达与对照组比较，差异有统计学意义（P均〈0．01）。⑦在孕17d、新生、生后20d，妊早甲低高、低剂量组Nkx6．1 mRNA表达与中剂量组比较，差异有统计学意义（P均〈0．01）；在孕17d、生后20d，高剂量组与低剂量组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。⑧在新生和生后20d，妊晚甲低组组间Nkx6．1 mRNA表达比较，差异有统计学意义（P均〈0．01）。结论甲低孕鼠子代大鼠脑组织同源盒基因Nkx6．1的表达受补充甲状腺素剂量及时间影响。