新生早期甲状腺功能减退大鼠心肌甲状腺激素受体mRNA表达的实验研究

目的探讨新生早期甲状腺功能减退（简称甲减）对大鼠心肌发育过程中甲状腺激素受体（TR）各亚型mRNA表达的影响。方法Wistar雌鼠从怀孕15d开始每天经胃灌注1％丙硫氧嘧啶2．5ml，复制甲减仔鼠动物模型，分别于各时间点称体质量后处死仔鼠，取心脏。放射免疫分析法（RIA）动态监测各组大鼠血清FT3、FT4水平，FQ—PCR方法检测各组心肌TR各亚型mRNA的表达差异。结果与对照组比较，甲减大鼠心肌TRα1 mRNA表达量在出生后0、21、45d分别下调90％、15％、36％（tod=8．33，t21d=2．58，t45d=3．25，P〈0．05），表达峰值于生后2周延迟出现。甲减大鼠心肌TRα2 mRNA表达量在出生后0、14、21、45d分别上调22％、72％、82％、36％（t0d=3．89，t14d=11．88，t21d=13．90，t45d=6．19，P〈0．05），表达峰值于生后2周延迟出现。甲减大鼠心肌TRβ1 mRNA表达量在出生后0、14、21、45d分别下调75％、62％、68％、60％（t0d=38．96，t14d=5．22，t21d=17．23，t45d=5．43，P〈0．05），表达变化趋势与对照组一致。结论新生早期甲减大鼠心肌上TR mRNA的异常表达可能与甲减性心脏病的发病机制密切相关。

骨形态发生蛋白2在骨损伤不同时期的表达

目的:检测骨形态发生蛋白2(BMP2)在骨损伤不同时期的表达,了解其高峰表达时间。方法:实验组18只大鼠胫骨损伤造模,对照组6只大鼠假手术后处死,实验组平均分为3组,分别于术后第5天、第15天和第30天处死,提取大鼠骨组织总RNA,RT-PCR后扩增BMP2开放读框中编码成熟肽的基因片段,与pGEM-TEasy载体连接纯化后建立实时荧光定量PCR的标准曲线,检测BMP2的表达水平。结果:BMP2的表达在骨损伤后第5天开始升高,第15天达到高峰,第30天稍高于正常水平。结论:高峰表达时间的确定为进一步研究提供了理论上的依据。

碘过量对哺乳期母鼠乳腺钠碘转运体mRNA和蛋白表达的影响

目的观察碘过量对哺乳期母鼠乳腺钠碘转运体（sodium-iodide symporter，NIS）mRNA及蛋白表达的影响。方法断乳1个月健康Wistar大鼠60只，雌雄比为2：1。将大鼠按体质量随机分为适碘组（30只）、10倍碘组（15只）、100倍碘组（15只），通过饮食（含碘300μg／kg）和饮水（含碘5、1845、20295μg/L）摄碘。喂养3个月后交配产仔鼠，在哺乳第10天，采用砷铈催化分光光度法测定母鼠尿碘和乳汁碘。取母鼠乳腺，用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）测定NIS mRNA表达；用SABC法进行免疫组化染色观察NIS蛋白表达强度。结果①母鼠尿碘：适碘组344．7μg/L、10倍碘组3597．5μg/L、100倍碘组25404．3μg／L，10倍碘组和100倍碘组分别是适碘组的10．4倍和73．7倍。②母鼠乳汁碘：适碘组6．0×10^3μg/L、10倍碘组27．1×10^3μg／L、100倍碘组191．0×10^3μg/L，10倍碘组和100倍碘组分别是适碘组的4．5倍和31．8倍，母鼠乳汁碘增加倍数低于尿碘。③母鼠乳腺NIS表达：NIS mRNA表达组间比较差异有统计学意义（F=24．19，P〈0．01）；其中适碘组（1．532±0．044）较10倍碘组（1．250±0．034）、100倍碘组（1．272±0．039）明显增高（P〈0．01），而且哺乳期母鼠乳腺NIS mRNA表达（1．532±0．044）高于非哺乳期母鼠（0．879±0．018），二者比较差异有统计学意义（t=19．09，P〈0．01）；母鼠乳腺NIS蛋白表达强度随碘摄入量增加而减弱。结论过量碘摄入可抑制乳腺NIS mRNA和蛋白表达。限制乳汁中的含碘量随碘摄入量增加的幅度，此机制对下一代有着重要的保护作用。

胰岛素样生长因子-1与糖尿病微血管并发症

本文介绍了胰岛素样生长因子-1（IGF-1）、IGF受体及IGF结合蛋白的结构和作用，其在维持血糖内环境稳定方面的作用，及其与糖尿病微血管病变（糖尿病肾病、糖尿病视网膜病和糖尿病神经病变）的关系。

碘过量对金属硫蛋白Ⅰ/Ⅱ敲除小鼠脾细胞的早期影响

目的 探讨碘过量对金属硫蛋白Ⅰ/Ⅱ敲除（methallothionein Ⅰ/Ⅱknockout,MT-Ⅰ/ⅡKO）小鼠脾细胞活力、乳酸脱氢酶（LDH）活力、脾细胞线粒体超氧化物生成和过氧化物酶（Prx）3表达的影响.方法 选取6～8周龄健康雄性MT-Ⅰ/ⅡKO小鼠和同源非基因敲除（Wildtype,WT）小鼠,取脾组织,制备脾细胞悬液;调整脾细胞个数为5×107个/L,并接种于96孔板中（每孔100 μl）.实验组每孔分别给予10-4、10-3、10-2 mol/L碘化钾（KI）或10-3 mol/L过氧化氢（H2O2）处理2h;对照组不给予KI和H2O2处理.四甲基偶氮唑（MTT）法检测脾细胞活力,化学比色法检测LDH活力,流式细胞术检测脾细胞线粒体超氧化物生成,蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测Prx3的蛋白表达.结果 MT-Ⅰ/ⅡKO和WT小鼠各组间脾细胞活力、LDH活力、脾细胞线粒体超氧化物生成和Prx3蛋白表达比较差异均有统计学意义（F=357.92、71.03、130.36、10.36、179.58、26.92、187.43、7.16,P均＜0.05）.其中10-4、10-3、10-2 mol/L KI和10-3 mol/L H2O2组脾细胞活力[（80.77±1.86）％、（89.89±2.90）％,（76.08±1.92）％、（87.66±1.74）％,（73.26±1.86）％、（84.30±2.23）％,（66.22±1.71）％、（70.80±149）％]均低于对照组[（100.00±2D0）％、（100.00±1.63）％,P均＜0.05];LDH活力[（3 880.00±190.62）、（3 431.17±170.45）,（4 178.33±170.43）、（3 598.63±189.09）,（4 388.61±123.79）、（3 863.72±195.64）,（4 615.28±196.17）、（4 148.12±195.81）U/L]均高于对照组[（3 202.22±85.63）、（3 161.51±144.49）U/L,P均＜0.05];线粒体超氧化物生成（53.83±3.22、47.03±1.60,58.92±4.00、50.48±2.59,72.72±2.14、68.53±2.97,80.76±4.11、75.26±3.41）明显高于对照组（43.82±1.56、38.60±2.81,P均＜0.05）;10-3、10-2 mol/L KI和10-3 mol/L H2O2组脾细胞Prx3蛋白表达（0.82±0.12、0.65±0.12,0.96±0.15、0.73±0.16,1.04±0.13、0.85±0.16）均高于对照组（0.61±0.09、0.50±0.08,P均＜0.05）,104 mol/L KI组Prx3蛋白表达（0.73±0.15、0.55±0.09）与对照组比较差异无统计学意义（P均＞0.05）.在10-4、10-3、10-2 mol/L KI和10-3 mol/L H2O2组,MT-Ⅰ/ⅡKO小鼠脾细胞活力低于WT小鼠（t=6.47、10.93、9.30、4.96,P均＜0.05）;LDH活力高于WT小鼠（t=4.30、558、5.56、4.13,P均＜0.05）;线粒体超氧化物生成高于WT小鼠（t=4.64、4.33、2.80、2.52,P均＜0.05）;Prx3蛋白表达高于WT小鼠（t=2.54、2.37、2.59、2.27,P均＜0.05）.结论 KI可引起WT和MT-Ⅰ/ⅡKO小鼠脾细胞活力降低,LDH活力增加,线粒体超氧化物生成增加,Prx3蛋白表达增加;KI对MT-Ⅰ/ⅡKO小鼠的影响更加明显,提示MT-Ⅰ/Ⅱ在碘过量引起的脾细胞氧化应激中具有一定抗氧化作用.