Trim72基因在肝癌转移中的功能研究

目的利用CRISPR—Cas9基因编辑技术验证与非小细胞肺癌转移相关的Trim72基因的敲除是否引起肝癌转移能力的变化。方法建立稳定表达Cas9蛋白的小鼠肝癌细胞系Hepa1－6（Cas9），随后利用针对Trim72基因的单导向RNA（sgRNA）进行特异性基因敲除获得Hepa1－6（Trim72-KO）细胞系，再通过体外bTranswell实验和体内皮下瘤肺转移检测评估该细胞系的迁移和侵袭能力。结果利用CRISPR-Cas9系统成功获得了Hepal－6（Trim72－KO）细胞系。Transwell实验结果表明，敲除％m72基因后，Hepa1－6（Cas9）细胞系的体外迁移和侵袭能力增强；体内皮下瘤肺转移病理检查结果显示，Hepa1－6（Trim72－KO）细胞系（实验组）所成皮下瘤的体内转移能力明显强于未转入相应sgRNA的Hepa1－6（Cas9）细胞系（对照组）。结论通过CRISPR-Cas9系统成功获得了敲除Trim72基因的Hepa1-6（Trim72-KO）细胞系，该细胞系表现出较Hepa1-6（Cas9）细胞系更强的侵袭和转移能力，说明Trim72基因可能在肝癌的侵袭和转移中起重要作用，有望成为肝癌基因治疗的潜在靶点。