IUGR胎鼠HRV谱分析实验研究

为了探讨以胎儿自主神经发育及其功能状况作为判断胎儿IUGR的可行性。采用酒精灌胃加限食法建立IUGR动物模型,利用AR模型法对IUGR胎鼠HRV进行功率谱分析。结果表明,无论是低频功率、高频功率还是总功率,实验组均明显高于对照组,但标化后的高频功率实验组则明显低于对照组,标化后的低频功率实验组仍明显高于对照组。提示,利用FHRV谱分析评价胎儿自主神经发育及其功能状况,进而对IUGR进行产前诊断的方法是可行的。

分次口服碘油后碘的排泄率和供碘有效期的实验研究

目的:探讨绒猴分7次口服200mg碘油后碘的排泄率及供碘有效期。方法:以药代动力学的方法研究碘的排泄过程。结果:分次口服碘油碘的半衰期(53.5天)和有效期(7～10.5个月)较1次性口服等剂量碘油的半衰期和有效期延长。低碘绒猴的半衰期和有效期较正常绒猴有轻度缩短。结论:证实分次口服碘油是一种高效、无害、接近生理方式的补碘方法;半衰期和有效期与机体的碘营养状况有关。

p16基因高甲基化在胃癌发展中的作用

目的:通过检测胃癌、癌前病变和正常对照组中p16基因启动子区CpG岛甲基化水平及其表达,并结合临床病理资料,分析他们在胃癌发生、发展中的作用.方法:用甲基化特异性聚合酶链反应(methylation-specific PCR,MSP)检测41例胃癌组织、40例癌前病变组织和38例正常对照组织中p16基因启动子5′CpG岛甲基化;应用免疫组化检测基因的蛋白表达.结果:胃癌组织中p16基因甲基化阳性率为56.1%(23/41),癌前病变组织中为17.5%(7/40),而正常对照组织中为2.6%(1/38),前组与后两组之间的差异有显著性(P<0.05).胃癌组织中p16基因表达阳性率为51.2%,癌前病变组织中为90.0%,正常对照组织中为100.0%,前组与后两组之间的差异有显著性(P<0.05).低分化型胃癌组织中的p16基因甲基化阳性率明显高于高分化型(81.3%vs 40.0%,P<0.05).有淋巴结转移的胃癌组织中,p16基因甲基化阳性率与无转移组的差异有显著性(81.0%vs 30.0%,P<0.05).浸润深达浆膜层的胃癌组织中,甲基化阳性率与未达浆膜层组无统计学差异(60.0%vs 52.4%,P>0.05).胃癌组织中p16基因甲基化阳性组的蛋白表达阳性率显著低于甲基化阴性组(26.1%vs 83.3%,P<0.01).结论:胃癌组织中存在有p16基因启动子5′CpG岛高甲基化,并导致其基因表达率显著低于正常对照及癌前病变组织.p16基因的高甲基化与胃癌分化程度、淋巴结转移相关.p16基因甲基化的发生,从正常、癌前病变到胃癌有逐渐增加的趋势,提示其基因CpG岛高甲基化有可能作为诊断早期胃癌的一项较为敏感的指标.

应用荧光差异显示法对胃癌及癌前病变相关基因的研究

背景与目的:一般认为胃癌是由癌前病变(慢性萎缩性胃炎、肠化生和不典型增生)逐步发展形成的。mRNA差异显示法是筛选肿瘤发生、发展中差异表达基因的有用方法。在胃癌、癌前病变中寻找差异表达的基因将有助于确定胃癌发生前的胃粘膜组织的分子变化。方法:应用荧光mRNA差异显示技术分析胃癌(2例)、癌前病变(2例)和正常胃粘膜(2例)组织,鉴别并分离差异表达的基因片段,进行PCR再扩增。将扩增cDNA片段克隆后进行测序,测序结果提交GenBank,经BLAST软件检索以进行同源性分析。RT-PCR检测血影蛋白基因在胃癌(7例)、癌前病变(7例)和正常胃粘膜(7例)的表达。结果:发现4个差异表达的cDNA片段,其中3个cDNA片段在胃癌中高表达,1个cDNA片段在正常组织和癌前病变组织中高表达。1个在胃癌组织中高表达的cDNA片段与血影蛋白基因(SPTAN1)同源,RT-PCR检测也发现血影蛋白基因在胃癌组织中高表达。另外3个与GenBank中已知的基因序列同源,但其功能目前尚不清楚。结论:所发现的4个差异表达的基因有3个在胃癌组织中高表达,其中SPTAN1基因在胃癌组织的表达比正常胃粘膜及胃异型增生组织表达明显高。

PCR-ELISA检测端粒酶活性的方法及其在人体肿瘤中的应用

目的 :介绍PCR -ELISA端粒酶活性测定方法 ,并对不同组织来源肿瘤端粒酶活性检测结果进行分析。方法 :采用PCR -ELISA端粒酶活性检测方法对299例不同组织来源肿瘤端粒酶活性进行检测。结果 :本组结果显示PCR -ELISA端粒酶活性测定方法在敏感性与特异性方面与国外报道的同位素方法结果一致。在多种人类恶性肿瘤组织中可检出端粒酶活性 ,而与各种肿瘤对应的正常组织及良性病变中则多为阴性。结论 :本组结果提示PCR -ELISA法为一高敏感的半定量评价端粒酶活性的方法 。

氟铝联合对体外人胚大脑神经细胞毒作用的研究

为探讨氟铝联合对大脑神经细胞的毒作用及其机制，采用无血清体外细胞培养方法，观察氟铝对人胚大脑神经细胞生长发育及功能的影响，同时进行光镜和电镜形态学观察。结果显示高剂量铝（１０μｍｏｌ／Ｌ）可以抑制大脑神经细胞的生长发育，引起大脑神经细胞超微结构的损害表现为各种膜结构的损害及神经微丝微管排列紊乱。在本研究剂量范围，加入不同剂量的氟并未对铝的损伤作用产生明显的影响，说明本研究剂量的铝氟不存在拮抗或协同作用。

布洛芬糖浆剂药动学及相对生物利用度

目的：测定布洛芬糖浆剂的药动学及相对生物利用度。方法：８名健康男性志愿者单剂量随机交叉ｐｏ４００ｍｇ布洛芬后，采用ＨＰＬＣ测定血浆药物浓度。结果：口服糖浆剂及片剂后血药浓度达峰时间分别为（０．８６±０．３０）ｈ和（１．７８±０．３４）ｈ，峰浓度分别为（４８．９±９．７１）μｇ·ｍｌ－１和（４４．２±８．２３）μｇ·ｍｌ－１，药时曲线下面积分别为（１７５．１±３１．９）μｇ·ｈ·ｍｌ－１和（１７８．６±２３．２）μｇ·ｈ·ｍｌ－１。结论：统计分析表明，糖浆剂较片剂达峰时间短，吸收快。布洛芬糖浆剂相对生物利用度为（９８．３±１４．５）％。

钙粘蛋白基因高甲基化与胃癌发生、发展的关系

背景与目的:有研究报道基因启动子区CpG岛甲基化引起的钙粘蛋白(E-cadherin,E-cad)基因失活可能在胃癌的发生发展中起重要作用。本研究拟通过检测胃癌组织、癌前病变组织和正常对照组织中E-cad基因启动子区CpG岛甲基化水平及其表达,结合临床病理资料,分析其与胃癌发生、发展的关系。方法:用甲基化特异性聚合酶链反应(methylation-specific PCR,MSP)检测41例胃癌组织、40例癌前病变组织和38例正常对照组织中E-cad基因启动子5′CpG岛甲基化,将PCR扩增产物克隆并测序。应用免疫组化检测基因的蛋白表达。结果:胃癌组织中E-cad基因甲基化阳性率为19.5%(8/41),癌前病变组织为2.5%(1/40),而正常对照组织为0.0%(0/38),前组与后两组之间的差异均有统计学意义(P<0.05)。胃癌组织中E-cad蛋白阳性率为70.7%(29/41),癌前病变组织为97.5%(39/40),正常对照组织为100.0%(38/38),前组与后两组之间的差异均有统计学意义(P<0.05)。低分化型胃癌组织的E-cad基因甲基化阳性率明显高于高分化型(43.8%vs.4.0%)(P<0.05)。有淋巴结转移的胃癌组织中E-cad基因甲基化阳性率与无转移组的差异有统计学意义(33.3%vs.5.0%)(P<0.05)。浸润深达浆膜层的胃癌组织中甲基化阳性率与未达浆膜层组的差异有统计学意义(35.0%vs.4.8%)(P<0.05)。胃癌组织中,E-cad基因甲基化阳性组的蛋白阳性率显著低于甲基化阴性组(0.0%vs.87.9%)(P<0.05)。结论:胃癌组织中存在E-cad基因启动子5′CpG岛高甲基化;从胃癌前病变、低度恶性到高度恶性的胃癌,E-cad基因的高甲基化水平呈不断增加的趋势。

胃癌发生过程中相关基因甲基化的研究

目的:通过研究上皮钙粘蛋白(E-CD)、错配修复基因(hMLH1)启动子甲基化状况,来揭示胃癌发生过程中分子水平变化。方法:甲基化特异性PCR(MSP)检测E-CD、hMLH1基因启动子甲基化;免疫组化检测蛋白表达情况。结果:E-CD甲基化阳性率在胃癌组显著高于胃癌前病变组和正常组,且与癌细胞分化程度、浸润深度、淋巴结转移、TNM分期相关;hMLH1甲基化阳性率在胃癌组显著高于胃癌前病变组和正常组;胃癌组MSI的发生率显著高于胃癌前病变组和正常组。结论:E-CD、hMLH1基因甲基化及MSI可作为较早期诊断胃癌的辅助指标。

HPLC法测定布洛芬与盐酸伪麻黄碱血药浓度

目的建立布洛芬和盐酸伪麻黄碱血药浓度HPLC测定方法。方法采用蛋白沉淀法处理血样,以萘普生为内标,测定布洛芬血药浓度。采用液-液萃取法,以硝基苯胺为内标,测定盐酸伪麻黄碱血药浓度。测定了5名志愿受试者服药后布洛芬和盐酸伪麻黄碱血药浓度。结果布洛芬在0.5～120 mg·L^(-1)内线性良好,回归方程为：Y=7.770 6ρ+1.2224,r=0.9988,日内日间RSD为2.57%,6.02%；盐酸伪麻黄碱在20～4000μg·L^(-1)内线性良好,回归方程为：Y=1180.163 0ρ+5.5970,r= 0.9984,日内、日间RSD为5.33%,6.62%。结论本方法灵敏、结果准确,可供临床血药浓度检测和药动学研究使用。

高效液相色谱法测定血液中阿奇霉素浓度

阿奇霉素(azithromycin)为新一代的大环内酯类抗生素,抗菌谱较红霉素广,并且在酸性环境中有较高的稳定性,具有吸收好、生物利用度高、半衰期长、部位组织及细胞浓度高、能向病灶定向转运、毒性低及耐受性好等优点.为了研究注射用阿奇霉素在动物及人体内的药动学参数,本实验建立了高效液相色谱法测定阿奇霉素血药浓度的方法.

胃癌微卫星不稳定性和hMSH2基因表达的研究

目的 通过研究胃癌及其癌前病变中微卫星不稳定性与错配修复基因hMSH2蛋白表达 ,来揭示微卫星不稳定性在胃癌演化过程中可能作用机制 ,并探讨导致胃癌中微卫星不稳定性的基因机制。方法 用PCR方法检测 5个微卫星位点MSI表现 ;并通过免疫组化SP法检测hMLH1、hMSH2错配修复蛋白的表达。结果 胃癌组、慢性胃炎组中MSI的阳性率分别为 5 8 82 %(30 5 1) ,2 1 0 5 %(12 5 7)。肠型胃癌与弥漫型胃癌的MSI阳性率间差别有显著性意义 (P <0 0 5 )。在所有标本中仅检测到 1例hMSH2表达缺失 ,异常表达的病例为胃乳头状腺癌。结论 MSI在散发性胃癌的发生及发展过程中均起到了一定作用 ,hMLH1启动子区异常甲基化是导致胃癌MSI的重要因素。

雪莲黄酮甙A_1对小鼠中枢神经系统的作用

结果表明，给药组小鼠自主活动次数明显减少，脑电图θ波均有不同程度的增加，同时尚有α波的减少。并能增强戊巴比妥钠的中枢抑制作用，使翻正反射发生率明显减少。在小鼠学习能力的实验中，可见小鼠总反应时间、非条件反射潜伏期均被延长，形成条件反射总次数减少。逃避性条件反射顺序号数值加大。表明该药能对小鼠中枢神经系统产生明显的抑制作用。

胃癌MSI、hMLH1基因甲基化及其蛋白表达研究

目的:通过研究散发性胃癌中错配修复基因hMLH1启动子区5’CpG岛甲基化及蛋白表达、微卫星不稳定性(MSI)发生的情况及各指标之间的关系,探讨hMLH1基因、MSI在胃癌发生过程中的作用,揭示胃癌发生的分子机制。方法:取标本55例,其中胃癌41例,正常组织(包括正常及浅表性胃炎)14例。酚/氯仿法提取DNA,PCR扩增-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳-硝酸银染法检测BAT-26、D2S123两个位点的MSI,酶切产物特异性扩增法检测hMLH1基因启动子区5’CpG岛甲基化异常情况,免疫组化SP法检测hMLH1蛋白的表达。结果:胃癌组MSI发生率为51.2%(21/41),显著高于正常组(P<0.05)。胃癌组hMLH1基因启动子区5’CpG岛甲基化发生率为41.5%,其中88.5%表现为蛋白表达缺失或降低,正常组织中未发现甲基化。胃癌组MSI(+)中,甲基化发生率81.0%。结论:hMLH1基因甲基化是导致胃癌组织出现MSI的重要因素,MSI在散发性胃癌发生、发展过程中发挥一定作用。由于错配修复基因甲基化而丧失修复功能,引起MSI的产生,促进肿瘤的发生。对胃癌组织中hMLH1基因、MSI的深入研究,可以为肿瘤早期发现、早期诊断提供信息。

高效液相色谱法同时测定血液中氯硝安定、佳静安定和安定

高效液相色谱法同时测定血液中氯硝安定、佳静安定和安定天津医科大学法医教研室３０００７０洪燕敏井连平天津医科大学实验中心３０００７０董伟林张竟超氯硝安定、佳静安定和安定为临床上较常用的镇静安眠药。近年来临床应用越来越广。由于市面上较易购到，故而中毒的病...

肺癌端粒酶活性与临床相关性研究

最近研究表明，端粒酶活化是正常细胞向恶性细胞演化过程中一个至关重要的步骤。对大量不同组织来源恶性肿瘤的研究结果都显示在较高程度上表达端粒酶活性。因此，端粒酶活性有可能成为肿瘤恶性程度评价的一个普适性标志物。端粒酶与肿瘤临床相关性的研究表明，不同组织类...

加味炙甘草汤注射液治疗病态窦房结综合征的电生理研究

目的 :观察加味炙甘草汤注射液对窦房结功能损伤 (SND)兔电生理的影响 ,探讨加味炙甘草汤注射液治疗病态窦房结综合征 (病窦征 )的临床疗效和机制。方法 :应用经静脉和经食管心房调搏方法观察加味炙甘草汤注射液的窦房结电生理作用。结果 :应用加味炙甘草汤注射液后 ,SND兔的窦房结恢复时间 (SNRT)、校正SNRT(SNRTc)较对照组明显缩短 (P均 <0 .0 1) ,心脏固有心率 (IHRo)明显上升 (P<0 .0 5 ) ,总窦房传导时间(TSACT)无改变 (P>0 .0 5 )。临床电生理结果与动物实验完全一致。 13例病窦征患者服用加味炙甘草汤后 5例窦房结电生理指标由异常恢复正常 ,有效率为 38.5 %。应用加味炙甘草汤后心房有效不应期 (AERP)和房室传导有效不应期 (AVERP)与用药前无显著性差异 ,房室传导文氏阻滞周长 (AWBCL )用药后显著缩短 (P<0 .0 5 )。结论 :加味炙甘草汤注射液可改善受损窦房结的自律性 ,对临床病窦征具有一定治疗作用 ;促进窦房结自律性的恢复是其治疗病窦征的电生理机制。此外 ,加味炙甘草汤还可改善病窦征患者的房室传导功能。

莲心碱对正常大鼠血压和左室收缩功能的影响

目的 了解莲心碱对正常大鼠的降压作用与左室收缩功能的关系。方法 分别经大鼠静脉注射2mg/kg和6mg/kg的莲心碱,左心室插管,同步记录左心室压力和微分,测算心肌收缩因子最大缩短速度(V_(Max))等参数。结果 2mg/kg和6mg/kg莲心碱可不同程度的降低大鼠收缩压(SAP)、舒张压(DAP)、左室压力(LVP)上升最大速率(dp/dt_(Max))和V_(Max),对心率和左室开始收缩到开始射血的时间(t-dp/dt_(Max))则无明显影响。莲心碱降低V_(Max)的有效作用时间与SAP基本一致,莲心碱降低DAP的有效作用时间长于LVP、dp/dt_(Max)和V_(Max) 结论 经心碱具有明显的降低血压作用,莲心碱降低DAP的作用大于SAP,莲心碱降低血压的主要作用部位在外周血管。莲心碱可降低正常大鼠左室收缩功能,这一效应可能参与莲心碱的早期降压作用。