PCR-ELISA检测端粒酶活性的方法及其在人体肿瘤中的应用

目的 :介绍PCR -ELISA端粒酶活性测定方法 ,并对不同组织来源肿瘤端粒酶活性检测结果进行分析。方法 :采用PCR -ELISA端粒酶活性检测方法对299例不同组织来源肿瘤端粒酶活性进行检测。结果 :本组结果显示PCR -ELISA端粒酶活性测定方法在敏感性与特异性方面与国外报道的同位素方法结果一致。在多种人类恶性肿瘤组织中可检出端粒酶活性 ,而与各种肿瘤对应的正常组织及良性病变中则多为阴性。结论 :本组结果提示PCR -ELISA法为一高敏感的半定量评价端粒酶活性的方法 。

肺癌端粒酶活性与临床相关性研究

最近研究表明，端粒酶活化是正常细胞向恶性细胞演化过程中一个至关重要的步骤。对大量不同组织来源恶性肿瘤的研究结果都显示在较高程度上表达端粒酶活性。因此，端粒酶活性有可能成为肿瘤恶性程度评价的一个普适性标志物。端粒酶与肿瘤临床相关性的研究表明，不同组织类...

人STAT3基因siRNA真核表达质粒的构建及鉴定

目的:构建针对人STAT3基因的siRNA真核表达质粒,检测其在细胞水平对STAT3基因表达的抑制效果。方法:用DNA重组技术将针对人STAT3基因mRNA序列不同位点设计的3个siRNA序列克隆到真核表达质粒pRNAT-U6.1/neo中构建重组体pRNAT-U6.1-siRNA,重组质粒经PCR检测及测序分析,用脂质体转染重组质粒至人食管癌Eca-109细胞,G418筛选获得阳性克隆,RT-PCR和Western blot检测STAT3基因mRNA和蛋白的表达,筛选最佳沉默效率的siRNA。结果:PCR检测及测序分析结果均提示重组质粒构建正确。RT-PCR和Western blot检测证实pRNAT-U6.1-siRNA3具有最佳的沉默效率。结论:成功构建人STAT3基因siRNA真核表达质粒,并证实其能够从mRNA和蛋白水平抑制STAT3基因的表达。