无精子因子微缺失及生殖激素水平在男性不育中的研究

目的筛查不育男性(严重少精子症和无精子症患者)Y染色体无精子因子(AZF)微缺失的发生情况,同时探讨无精子因子微缺失患者的生殖激素水平。方法对212例严重少精子症和96例无精子症患者进行常规的Y染色体无精子因子微缺失的分析,并运用化学发光法测定生殖激素的水平。结果 308例患者中发现28例Y染色体微缺失患者,缺失率为9.09%,其中少精子症患者18例,无精子症患者10例。缺失类型包括AZFb微缺失1例(3.57%),AZFb+AZFc微缺失4例(14.29%),AZFc微缺失20例(71.43%),AZFc+AZFd微缺失2例(7.14%),AZFd微缺失1例(3.57%)。生殖激素的检测,Y染色体AZF微缺失患者的促卵泡生成素(FSH)值明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Y染色体AZF微缺失是男性不育的主要遗传因素之一,其中AZFc的缺失为常见的类型,对这些患者进行生殖激素水平的检测是必要的。

251例不育男性Y染色体微缺失及生殖激素水平研究

目的:筛查严重少精子症和无精子症患者Y染色体微缺失的发生情况,并探讨Y染色体微缺失患者的生殖激素水平。方法:对183例严重少精子症和68例无精子症患者进行Y染色体无精子因子(AZF)微缺失分析,同时用化学发光法测定生殖激素水平。结果:251例患者中发现Y染色体微缺失患者21例,缺失率为8.37%,其中少精子症15例,无精子症6例。缺失类型包括AZFb微缺失1例(4.76%),AZFb+AZFc微缺失2例(9.52%),AZFc微缺失15例(71.43%),AZFc+AZFd微缺失2例(9.52%),AZFd微缺失1例(4.76%)。生殖激素检测中,Y染色体AZF微缺失患者的FSH值明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Y染色体微缺失是男性不育的主要遗传因素之一,其中AZFc的缺失为常见的类型,对这些患者进行生殖激素水平的检测并综合分析导致不育的因素进行指导治疗是必要的。

抑制素B与人类生殖

抑制素B(INH-B)由生殖系统细胞分泌,在女性可以较直接地反映卵巢储备,而了解卵巢储备能预测辅助生殖技术过程中卵泡对垂体促性腺激素的反应及预后。近年来,有较多学者研究了抑制素B与卵巢储备在辅助生殖技术中的意义,估计预后,采取最佳的超促排卵(COH)方案,以提高低反应者的妊娠率。近年还发现抑制素B参与男性精子的发生,在男性不育患者中预测无精症患者精子获得率等方面也有重要意义。

精子形态对体外受精胚胎移植妊娠结局的影响

目的:分析男性精液参数与卵裂率、优质胚胎率及妊娠率的相关性,探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期中精子形态对精子功能的影响。方法:分析82个受精率100%的IVF-ET周期。以Diff-Quickstain方法染色,密度梯度离心法处理精液,WHO精子形态学标准评估精子形态,精子正常形态率≥14%为正常组,<14%者为异常组。观察精液处理前后精子参数变化,比较妊娠组与未妊娠组的年龄、移植日子宫内膜厚度和精液各参数的情况。比较精液处理前后精子正常形态率与两组的正常受精率、卵裂率、优质胚胎率和妊娠率。结果:①密度梯度离心法处理后82例精液密度明显降低,活动力明显提高,差别有统计学意义。②精液处理前精子正常形态率:正常组11例(13.41%),异常组71例(86.59%);处理后正常组34例(41.46%),异常组48例(58.53%)。异常组精液处理后正常精子形态的比例提高,中位数(P25,P75)分别为8.15%(6.38%,10.50%)vs.12.41%(9.98%,18.58%),差别有统计学意义(P<0.01)。③精液处理前精子正常形态率正常组和异常组的密度和活动力差别无统计学意义(P>0.05)。④精液处理前后精子正常形态率正常组和异常组的妊娠率和优质胚胎率差异均无统计学意义(P>0.05);精子正常形态率正常组的卵裂率高于异常组(P<0.05)。⑤妊娠组和未妊娠组除男女双方年龄差异有统计学意义外,移植日子宫内膜厚度和各精液参数差异均无统计学意义。结论:精子形态对妊娠结局无预测,密度梯度离心法能提高正常精子形态百分数,需根据精液处理后的结果选择受精方式。

静脉复合麻醉取卵术中卵泡液丙泊酚浓度对妊娠结局的影响

目的：观察在静脉全麻取卵术中卵泡液丙泊酚浓度的变化及对体外受精-胚胎移植（IVF—ET）妊娠结局的影响。方法：研究对象为2011年3～12月在天津医科大学总医院生殖医学中心行经阴道超声引导下取卵的体外受精（IVF）和卵胞浆单精子注射（ICSI）的患者。静脉复合麻醉（A组）81例，静脉缓慢注入芬太尼0．05mg和丙泊酚2mg／kg，以丙泊酚8—12mg,／（kg·h）静脉维持；对照（B组）30例，术前静脉注射哌替啶50mg。取卵术毕留取所有患者卵泡液和静脉血浆，用高效液相色谱仪检测患者卵泡液和血浆丙泊酚浓度，观察卵泡液、血浆丙泊酚浓度与麻醉时间的关系，比较A、B两组及不同卵泡液丙泊酚浓度组获卵率、受精率、卵裂率、可用胚胎率、胚胎种植率、临床妊娠率、早期流产率、活产率、出生缺陷率。结果：麻醉持续时间为6—35（19．04±9．87）min，卵泡液中丙泊酚浓度与麻醉持续时间呈正相关关系（r=0．981，P〈0．05）。A、B组及不同卵泡液丙泊酚浓度组获卵率、受精率、卵裂率、可用胚胎率、胚胎种植率、I临床妊娠率、早期流产率、活产率、出生缺陷率比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：卵泡液丙泊酚浓度随麻醉时间延长而增加，丙泊酚浓度在0．002～0．460（0．125±0．062）μg／ml范围内不影响IVF—ET的妊娠结局，但仍建议静脉全麻取卵术中尽量缩短麻醉时间，控制丙泊酚使用剂量。

透明质酸对体外受精周期胚胎种植及围产结局的影响

目的探讨透明质酸对体外受精周期中胚胎种植情况及围产期状况的影响。方法对626例接受体外受精/卵胞浆内单精子注射(IVF/ICSI)治疗并进行新鲜胚胎移植的不育患者随机分组,使用富含透明质酸的EmbryoGlue作为移植液的296名患者为实验组(A组),使用不含透明质酸的G-2作为胚胎移植液的330例患者作为对照组(B组),比较两组临床妊娠率、胚胎种植率、多胎妊娠率、流产率及异位妊娠率等胚胎种植结局,比较早产率、出生体重、男女比例、剖宫产率、新生儿出生缺陷及新生儿死亡率等围产期状况。结果 (1)两组患者的一般临床资料相似,无统计学差异。(2)实验组患者的种植率较对照组明显升高(35.62%vs.25.95%,P<0.05);临床妊娠率较对照组明显升高(55.07%vs.41.82%,P<0.05);多胎妊娠率较对照组明显升高(22.30%vs.13.64%,P<0.05);异位妊娠率较对照组明显降低(2.45%vs.7.25%,P<0.05);(3)两组围产期状况如早产率、男女比例、胎龄、出生体重、新生儿出生缺陷等无统计学差异。结论富含透明质酸的EmbryoGlue移植液可以促进IVF-ET中胚胎种植,并可降低异位妊娠的发生,不增加新生儿出生缺陷,死亡率、早产率等。

CatSper蛋白对精子超活化运动和男性不育影响的研究进展

CtaSper通道是目前公认的哺乳动物精子细胞膜上最重要的Ca^(2+)通道,对精子运动、精子超活化和受精功能起着关键作用。Cat Sper蛋白只表达于精子尾部主段,由CatSper1-4和5个辅助单元β、γ、δ、ε和ζ构成。CatSper蛋白是Ca^(2+)功能结构域的主体,在时空上均有序调控精子尾部蛋白酪氨酸磷酸化(P-Tyr),维持了精子超活化运动。CatSper^(-/-)小鼠超活化表现为早发式、爆发式、散发式,能量很快耗尽,超活化提前终止。胞内p H值、膜电位、类固醇激素、多种蛋白质、环腺苷酸类似物等通过调控CatSper通道参与精子超活化、精子游动至受精部位和穿透卵子外膜。近年来,许多研究证实CatSper蛋白功能缺陷会严重影响精子功能,9个CatSper亚基的中任何一个丢失最终导致男性生育功能障碍。本文结合目前最新研究进展,从CatSper蛋白表达、定位、结构、调控等多角度就CatSper对精子超活化和男性不育的影响进行综述。

脱氢表雄酮对卵巢储备功能降低患者IVF-ET结果的影响

目的:探讨脱氢表雄酮(DHEA)对卵巢储备功能降低(DOR)患者行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗结局的影响。方法:对接受体外受精/卵胞浆内单精子注射(IVF/ICSI)助孕治疗的47例DOR患者DHEA辅助治疗前后周期进行自身对照研究,分析卵巢储备功能指标(基础激素水平、窦卵泡计数等)及周期治疗参数(卵泡数、获卵数、受精率、卵裂率、胚胎种植率、临床妊娠率、周期取消率、流产率等)的变化。结果:前后周期超促排卵方案无显著性差异,DHEA辅助治疗后基础窦卵泡计数、卵泡数、获卵数显著增加(P<0.05),卵裂率、胚胎种植率、临床妊娠率显著提高(P<0.05),周期取消率呈降低趋势(P>0.05),而受精率、流产率无差异(P>0.05)。结论:DHEA辅助治疗可以改善DOR患者卵巢储备功能,提高卵巢反应性,改善IVF治疗结局。

脱氢表雄酮在卵巢储备功能降低患者体外受精-胚胎移植中的应用

随着不孕症人口高龄化,卵巢储备功能降低的患者逐渐增多,如何改善卵巢储备功能降低患者体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的治疗结局一直是困扰临床医师的难题。近年临床研究显示,脱氢表雄酮(DHEA)可以改善卵巢储备功能,提高妊娠率,减少染色体非整倍性的发生,降低流产率。而基础研究对雄激素促进卵泡募集与生长发育的作用机制进行了探索。DHEA的这一作用引申出了一种新的观点:随着年龄的增长,卵巢储备功能降低是由卵巢微环境衰老所致,而非卵母细胞的衰老所致,DHEA可能代表着一类能够改善卵巢衰老微环境的新药。但是今后尚需进一步研究为临床应用提供更有力的证据。

胚胎透明带厚度及厚度变量与IVF-ET治疗结局关系探讨

目的:观察体外受精-胚胎移植(IVF-ET)中移植胚胎透明带厚度(ZPT)及透明带厚度变量(ZPTV)与IVF-ET治疗结局的关系。方法:利用图像采集系统测量51对夫妇51个IVF-ET周期119个新鲜胚胎ZPT并计算ZPTV。分别根据受精方式、治疗结局、ZPTV值、患者年龄、基础FSH值、种植率进行分组,分析胚胎ZPT和ZPTV对IVF-ET结局的影响。结果:①不同受精方式(IVF/ICSI)胚胎间ZPT、ZPTV值差异无统计学意义;②妊娠组与非妊娠组ZPT差异无统计学意义;妊娠组ZPTV(19.13±7.16%)大于非妊娠组(14.08±6.45%,P<0.001);移植胚胎ZPTV≥20%组的妊娠率(60%)高于ZPTV<20%组(38.89%,P<0.005);③患者年龄<30岁组、30～35岁组、≥35岁组ZPT值和ZPTV值差异均无统计学意义(P>0.05);④基础FSH≥8U/L组ZPTV为14.51±4.90%,低于FSH<8U/L组(17.16±7.69%,P<0.05),ZPT在两组间差异无统计学意义;⑤种植率分别为0、33.33%～66.67%、100%,3组间ZPT值差异无统计学意义;种植率为0组与其他两组比较ZPTV差异有统计学意义(P<0.001)。结论:ZPTV是评价胚胎质量和预测妊娠结局的有效指标。

IVF-ET中胚胎移植位置对妊娠率和胚胎种植率的影响

胚胎移植（ET）是体外受精（IVF）技术中关键步骤之一，对妊娠结局有很大影响。本研究回顾性分析在腹部超声引导下将胚胎移植到子宫内不同位置对行体外受精胚胎移植的患者临床妊娠率和胚胎种植率的影响。

胚胎着床前期子宫内膜血流与IVF-ET治疗的关系

目的:探讨着床前期彩色多普勒超声子宫内膜血流检测与体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的关系。方法:选择行IVF-ET患者134例,检测自然周期排卵后第3天和超促排周期取卵后第3天(ET日)的子宫内膜血流状态和参数。结果:超促排周期Ⅲ级组的妊娠率和胚胎种植率(40%,13.7%)明显高于Ⅰ级(10%,4%)、Ⅱ级(29.41%,9.3%)组,差异有统计学意义(P<0.05)。超促排周期妊娠组子宫内膜血流参数阻力指数(RI)、搏动指数(PI)、收缩期峰值流速/平均流速比值(S/D)明显高于非妊娠组,差异有统计学意义(P<0.05)。妊娠组与非妊娠组自然周期血流状态差异有统计学意义(P<0.05)。结论:子宫内膜血流状态和血流参数RI、PI、S/D值可作为IVF-ET结局的预测指标。自然周期血流丰富可能提示较好的子宫内膜容受性。

荧光原位杂交在植入前遗传学诊断中的应用

随着辅助生殖技术的发展,植入前遗传学检查技术的进展也日新月异,荧光原位杂交(FISH)技术运用于植入前胚胎染色体异常的检测后,大大提高了体外受精的植入率和临床妊娠率,降低了流产率。目前荧光原位杂交技术主要应用于胚胎植入前遗传学筛查、染色体结构异常及性连锁遗传疾病的性别鉴定。但是,关于植入前遗传学诊断的远期安全性仍有很多争议,就目前荧光原位杂交技术在植入前遗传学诊断中的应用进行综述。

卵泡刺激素对体外培养大鼠颗粒细胞凋亡的影响

目的:探讨FSH对体外培养大鼠颗粒细胞凋亡的影响。方法:分别将新鲜卵巢和冻融卵巢卵泡颗粒细胞分离出来,体外培养4d,对比培养液中添加FSH与未添加FSH条件下的颗粒细胞凋亡率。结果:培养液中添加FSH后,冻融颗粒细胞凋亡率降低。结论:培养液中添加10ng/mlFSH,可减少从新鲜和冻融卵泡分离的颗粒细胞在体外培养过程中发生凋亡的几率。

卵巢储备功能测定在IVF-ET中的临床意义

随着辅助生殖技术（assisted reproduc tivetechnique，ART）的广泛应用．不孕不育妇女在辅助生育治疗之前对她们的生殖潜能做出初步评价是很有必要的。而生殖潜能直接取决于卵母细胞的质量和子宫内膜的容受性，前者的下降即卵巢储备功能的下降，可以影响ART的治疗效果。

荧光原位杂交技术在研究人精子染色体中的应用

荧光原位杂交(FISH)技术以其简便、快捷、高敏感度及高特异度的优点,可一次检测成千上万的精子染色体而被广泛应用,并逐渐成为精子染色体检测的主要方法。许多研究用FISH技术检测男性的精子染色体发现,有毒物接触史、肿瘤患者放化疗后、染色体平衡易位患者及不育男性的非整倍体率较正常男性明显增加。特别是随着卵母细胞胞浆内单精子注射(ICSI)的应用,FISH在检测不育男性精子染色体中的作用更加明显。综述近年FISH在研究精子染色体非整倍体方面的进展。

抗坏血酸盐对小鼠囊胚冷冻结果的影响

目的:探讨在慢速冷冻和玻璃化冷冻中添加抗坏血酸盐对小鼠囊胚冷冻结果的影响。方法:用慢速冷冻法和玻璃化法冷冻小鼠囊胚,将0.1mmol/L抗坏血酸盐分别加到冷冻和解冻液中作为观察组,不加抗坏血酸盐冷冻作为对照组,观察解冻后囊胚腔重新扩张率和囊胚孵出率。结果:在慢速冷冻方法中观察组囊胚腔重新扩张率和囊胚孵出率高于对照组(P<0.05)。而玻璃化法两者差别无统计学意义(P>0.05)。结论:抗坏血酸盐可在慢速冷冻方法中提高冻融囊胚继续生长发育能力,玻璃化法没有此作用。

多重置换扩增在植入前胚胎性别诊断中的应用

目的用多重置换扩增(MDA)方法,对植入前胚胎的单个卵裂球全基因组扩增后进行植入前胚胎性别的遗传学诊断。方法用单细胞多重置换扩增方法对20个胚胎共20个单卵裂球进行全基因组扩增,用荧光PCR检测SRY、AMEL、XHPRT及X22 4个性别相关的基因座,检测胚胎性别,同时用同一胚胎另一卵裂球FISH结果作为对照。结果 20个卵裂球MDA均扩增成功,扩增成功率100%。20个胚胎均得到诊断,性别诊断成功率100%,其中12例为男性胚胎,8例为女性胚胎,与FISH结果一致率100%,诊断准确率100%。结论可以用单卵裂球MDA后荧光PCR检测多个基因座的方法对胚胎性别进行快速、准确的植入前诊断。

FISH在罗伯逊易位携带者胚胎植入前遗传学诊断中的应用

胚胎植入前遗传学诊断(PGD)是辅助生殖技术中的一种重要手段,染色体异常的诊断是植入前遗传学诊断的一个重要部分。利用荧光原位杂交(FISH)技术对罗伯逊易位携带者体外受精的胚胎行植入前遗传学诊断,可解决生育问题、减少遗传风险,达到优生目的。综述荧光原位杂交技术及近年来该技术在罗伯逊易位携带者胚胎植入前遗传学诊断中的应用。

拮抗剂方案不同卵巢反应患者新鲜周期与冻融胚胎移植周期妊娠结局的比较

目的:比较促性腺激素释放激素(GnRH)拮抗剂方案下,不同卵巢反应患者新鲜周期与全胚冷冻后第一次冻融胚胎移植(frozen-thawed embryo transfer,FET)的妊娠结局。方法:回顾性分析2016年5月—2018年9月于天津医科大学总医院(我院)生殖中心行体外受精/胞浆内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)治疗且使用GnRH拮抗剂方案的251个周期不孕症患者的数据。根据获卵数不同分为3组,A组33个周期(获卵数≤3个),B组157个周期(获卵数4～15个),C组47个周期(获卵数>15个)。各组又进一步分为新鲜周期移植组(A1组18个周期、B1组99个周期、C1组15个周期)与全胚冷冻后第一次FET组(A2组15个周期、B2组58个周期、C2组46个周期)。比较各组患者促排卵情况和移植妊娠结局。结果:A1/A2组患者、B1/B2组患者、C1/C2组患者的年龄、体质量指数(BMI)、基础卵泡刺激素/黄体生成激素(bFSH/bLH)、不孕类型、Gn总量、使用Gn时间、受精方式及受精率比较,差异无统计学意义(均P>0.05)。C2组患者获卵数比C1组多,差异有统计学意义(t=-2.963,P=0.000)。在结局指标中,B2组患者临床妊娠率比B1组高,差异有统计学意义(χ2=5.502,P=0.019)。C2组移植胚胎数和移植胚胎质量评分比C1组高,差异均有统计学意义(均P<0.05),但胚胎种植率、临床妊娠率和流产率差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论:卵巢低反应患者建议优先选择新鲜周期移植;卵巢反应正常者建议优先考虑全胚冷冻后行FET;卵巢高反应患者为最大程度避免卵巢过度刺激的发生,建议全胚冷冻后行FET。