用UPLC-MS/MS法检测人干血斑中氯喹和羟氯喹的浓度

目的 建立并验证一种定量检测人干血斑中氯喹和羟氯喹浓度的方法。方法 样本经打孔、液液萃取、挥干复溶后,用液相-串联质谱联用仪测定。色谱柱:BEH C18柱(2.1 mm×50.0 mm, 1.7μm),流动相:含0.5%甲酸乙腈溶液-含0.5%甲酸水溶液,梯度洗脱,流速:0.4 mL·min^(-1),进样量:2μL;电喷雾正离子模式,多反应监测。考察该方法的专属性、标准曲线与定量下限、精密度与回收率、稳定性、基质效应、打孔位置影响、载血量影响和血细胞比容影响。结果 氯喹和羟氯喹均在8.0~1 600.0 ng·mL^(-1)内线性关系良好,定量下限均为8.0 ng·mL^(-1);批内和批间相对标准偏差均在15.72%以内,稳定性良好,内标归一化的基质因子的相对标准偏差均<15%。干血斑中药物浓度与打孔位置、载血量、血细胞比容相关。结论 本方法的专属性强、准确度高、重复性好,既可用于日常治疗药物监测,亦可用于药物过量中毒检测。

mCIM和eCIM联合检测产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌的应用

目的探讨改良碳青霉烯灭活试验(modified carbapenem inactivation method,mCIM)联合EDTA改良碳青霉烯灭活试验(EDTA-modified carbapenem inactivation method,eCIM)检测感染患者分离的耐碳青霉烯肠杆菌科细菌(Carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,CRE)碳青霉烯酶的方法对诊控CRE感染的应用价值。方法回顾性分析2017年1至12月天津医科大学总医院临床感染患者分离的78株非重复对碳青霉烯类抗生素耐药的肠杆菌科细菌的耐药情况,应用Vitek2 Compact全自动细菌鉴定仪鉴定至种并检测其对厄他培南和亚胺培南的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC),用分子生物学PCR试验检测其碳青霉烯酶基因bla_(KPC)、bla_(NDM)、bla_(IMP)和bla_(VIM),基因测序确定基因型作为金标准,同时采用mCIM联合eCIM试验对所收集的细菌进行碳青霉烯酶检测。以PCR结果为标准,计算mCIM和eCIM的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值及Kappa值,进行mCIM和eCIM联合检测结果与PCR结果的一致性检验。结果78株碳青霉烯耐药肠杆菌科细菌应用PCR法检测出碳青霉烯酶基因阳性74株,阴性4株,其中bla_(KPC-2)阳性60株,bla_(NDM-1)阳性2株,bla_(NDM-5)阳性7株,bla_(NDM-9)阳性3株,bla_(IMP-4)阳性1株,bla_(KPC-2)和bla_(NDM-1)同时阳性1株。mCIM检测碳青霉烯酶的敏感度为100%,特异度为100%,Kappa值为1.000;mCIM和eCIM联合检测丝氨酸碳青霉烯酶敏感度为100%,特异度为100%,Kappa值为1.000;联合检测金属碳青霉烯酶敏感度为92.9%,特异度为100%,Kappa值为0.955。结论采用mCIM、eCIM联合试验对CRE中的碳青霉烯酶进行检测,实用性强,结果易于判读,依据CRE细菌中基因型的不同,将为临床CRE诊断与抗菌药物精准治疗和感染控制提供重要诊断依据。

超高效液相色谱-质谱联用法检测人全血中氯喹、羟氯喹、阿比多尔及其临床应用

目的:建立并验证一种人全血中氯喹、羟氯喹、阿比多尔的检测方法,并将其用于临床检测。方法:全血样本经氯化铵裂解和乙腈蛋白沉淀后,采用液相-串联质谱联用仪测定。色谱柱为BEH C_(18),以含0.5%甲酸乙腈溶液-0.5%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速为0.4 mL·min^(-1),电喷雾正离子模式,多反应监测。结果:氯喹、羟氯喹、阿比多尔在8~1600 ng·mL^(-1)线性关系良好;批内和批间精密度(RSD)均在12.71%以内,批内和批间准确度(RE)均在-7.12%~13.51%;提取回收率均在76.50%~92.49%;内标归一化的基质因子变异系数(RSD)均小于15%;在多种储存条件下,处理前后的样品稳定性良好。结论:该方法专属性强,准确度高,重复性好,可用于3种药物治疗药物监测及中毒检测。