青年教师团队在医学细胞生物学留学生教学中的骨干作用

从青年教师团队成员的个人优势和团队的团结协作两方面阐述了青年教师团队在医学细胞生物学留学生教学中的骨干作用,提出青年教师团队应把握机遇更好地担负起留学生教学工作的观点。

《医用生物学》的教学改革与实践——综合素质教育

21世纪是以高新技术为主导的科学技术迅猛发展和激烈竞争的时代.传统的应试教育已严重制约了新时代对于具有高素质、高技能、高情感的复合型人才的需要,发展素质教育已是迫在眉睫.本文围绕着素质教育这个话题从五个方面探讨了在<医用生物学>的教学过程中所进行的一系列改革尝试.通过这些实践,我们希望能进一步提高教学质量,为加快素质教育的进程做出贡献.

弓形虫组织包囊细胞生物学的研究进展

本文简述了弓形虫在中间宿主体内进行速殖子与缓殖子转化及影响这一过程的因素。

天津机场蝇类监测分析

本文对天津机场1992—1994年蝇类季节消长规律、分布和蝇种构成进行监测,结果表明,以家蝇、丝光绿蝇、大头金蝇为主要蝇种,分别为39.39％、27.87％、10.93％。蝇密度高峰期出现在6—8月。五种场所蝇分布,以垃圾堆蝇捕获数最高,其次为民贸市场、饮食服务业、居民区、停机坪。蝇密度与气象条件、痢疾发病率有明显关系。

电子垃圾处理区域人群遗传损伤的研究

目的探讨长期居住在电子垃圾处理环境中居民遗传损伤。方法于2005年11月在天津市郊县电子垃圾处理较集中的3个村采集居民1256份血液标本进行染色体核型分析,从中随机抽取171份血液标本进行微核实验,随机抽取12份标本进行彗星试验。对照组为远离电器拆废地区的60位村民(男女各半)。结果暴露组染色体结构畸变率为6.23%,染色体数目畸变率为0.29%。随体相连、四射体等均超出了正常范围,与对照组比较有统计学意义(P<0.05);暴露组微核出现率为16.99‰,对照组为3.47‰,差异有统计学意义(P<0.01)。彗星试验结果显示,暴露组头、尾部DNA百分含量、尾长、彗星全长、尾矩、Olive尾矩高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.001)。结论居住在该电子垃圾处理区域人群的染色体畸变率、微核发生率及彗星电泳检测的DNA损伤率均高于对照组。提示不科学的电子垃圾处理产生的污染物是该地区人群潜在的遗传诱变剂。

电子废物回收处理污染对人类的遗传毒性

目的对长期居住在天津市近郊某镇电子垃圾处理较集中的3个村庄的居民进行细胞遗传学研究,分析电子垃圾污染物对人体的损伤效应。方法在当地居民中随机选择171位村民进行染色体畸变(CA)和胞浆阻滞微核(CBMN)分析,并进行彗星分析检测DNA损伤。选取与该镇毗邻区域且从未接触电子垃圾处理的30位村民(男女各半)作为对照组。结果暴露组染色体总畸变率5.50%,与对照组差别有统计学意义(P<0.01);微核率暴露组16.99‰,对照组3.47‰,差异有统计学意义(P<0.01);彗星分析检测彗星尾部DNA百分含量(TDNA%)、尾矩(TM)、Olive尾矩(OTM)差异均有统计学意义(P<0.01)。女性的染色体畸变率、微核率和DNA损伤水平均明显高于男性。结论电子垃圾污染物是潜在的遗传诱变剂,能够造成污染人群的细胞遗传学损伤。

胃癌患者外周血淋巴细胞微核、姊妹染色单体互换及染色体畸变的观察

对16例胃癌患者和16例正常健康人的外周血淋巴细胞的微核、姊妹染色单体互换(SCE)以及染色体畸变进行了观察和比较。结果发现,正常健康人和患者的微核率分别为0.053％和0.197％;SCE频率均值为6.34±0.46和10.17±1.24;染色体畸变率分别为2.71％和6.67％。胃癌患者均高于正常健康人,且有显著性差异。表明胃癌的发生与染色体不稳定性及DNA修复能力有关。

PCR-HRM分析筛查成骨不全一家系患儿基因突变

目的采用PCR-高分辨率熔解曲线(HRM)分析筛查成骨不全(OI)一家系患儿(先证者)COL1A1基因突变位点,探讨其基因型与临床表型的联系。方法对先证者进行家族史及临床资料的调查,采集先证者、家属及50名正常对照者血液标本,应用PCR-HRM分析筛查先证者及正常对照者COL1A1基因突变,基因测序确证突变位点。结果先证者COL1A1基因17外显子筛查结果异常,其熔解温度(Tm)值比正常对照者Tm值低约0.4℃。先证者与正常对照者的标准熔解曲线及差异熔解曲线均有明显差异。测序结果为c.1138G>A,突变导致380位氨基酸由甘氨酸(Gly)变成丝氨酸(Ser):p.(Gly 380 Ser),为错义突变。先证者父亲、祖母均具有相同突变位点。先证者母亲及正常对照者基因测序结果无此突变。该突变在中国人群中未见报道。该家系遗传特征为常染色体显性遗传,先证者临床诊断为Ⅳ型OI,临床表型较严重。结论 PCR-HRM分析是有效的OI基因筛查新方法。COL1A1基因c.1138G>A突变在中国人群中为新发现的突变位点。α螺旋结构域Gly被替换可能导致较严重的临床表型。

823例无精子症患者的染色体畸变类型及生殖激素水平

目的探讨无精子症患者的染色体畸变类型及性激素变化情况。方法对本室2000-2005年823例无精子症患者进行染色体核型分析并采用R IA法检测患者血浆生殖激素水平。将激素水平不同的患者分为4组进行临床分析。结果823例无精子症病人中检出染色体畸变158例,占19.2%。其中,性染色体异常152例,占96.2%,常染色体异常6例,占3.80%。性染色体数目异常中,K linefelter综合征119例,占75.30%,47,XYY 4例,占2.53%。性染包体结构畸变中46,XY,delYqtl-tel-16例,占10.12%,其它类型的性染色体结构畸变共计6例,占3.80%。性反转7例,占4.43%。各类型的染色体畸变患者的生殖檄索水平有不同的表现。823例无精子症患者中染色体核型正常者665例占80.8%。激素水平不同的4组组间比较有非常显著性差异。FSH、LH升高T降低病变在睾丸。病变不在睾丸和特发性无精子症者,各种激素值表现不一。结论对无精子症患者进行染色体与生殖激素的检测有利于鉴别无精子症的类型:染色体,尤其是性染色体畸变可导致无精子症的发生,使得生殖激素分泌异常,不同类型的染色体结构畸变患者的性激素水平存在差异;生殖激素FSti、LH、T、PRL水平可以反映无精子症患者睪丸病变部位,及受损伤的严重程度。

检测弓形虫的PCR法和ELISA法的比较

目的:建立快速、敏感、特异的PCR方法,用于检测弓形虫感染。方法:选择弓形虫B1基因194bp片段作为扩增模板,优化反应条件,并测定其敏感性和特异性;以104弓形虫RH株速殖子腹腔接种小鼠,用PCR法检测感染动物全血DNA,并与ELISA法检测血清IgM进行比较。结果:本实验中,PCR方法的检测阈值为0.2pg弓形虫DNA,并且与人、小鼠、疟原虫、旋毛虫等DNA均无交叉反应。用PCR法检测感染动物全血DNA,感染后第2d即可测出阳性,总阳性数为1(313/15);而ELISA法检测血清IgM则到感染后第6d才测出阳性,总阳性数为2(2/15)。经统计学检验,二者存在显著差异(P<0.05)。结论:PCR是一种快速、敏感、特异的检测方法,可用于弓形虫病的早期诊断。

转化生长因子β诱导蛋白研究进展

转化生长因子β诱导蛋白（transforming growth factor-β-induced protein,TGFBIp/βig-h3）是1个多功能细胞外基质分子,作为转化生长因子β（TGFβ）诱导基因已在肺腺癌细胞系A549中克隆成功。TGFBIp在细胞黏附、迁移、增殖、分化中起十分重要作用,其表达与细胞黏附、迁徙、角膜营养不良、肿瘤侵犯与转移、血栓、风湿性关节炎、动脉粥样硬化、

支气管肺泡灌洗液细菌培养分布及耐药性分析

目的:分析临床分离支气管肺泡灌洗液细菌培养分布及耐药状况。方法:回顾性分析1 081例支气管肺泡灌洗液病原菌分布及耐药情况。结果:共分离出病原菌506株,革兰阴性菌472株,占93.2%;革兰阳性菌34株,占6.8%。主要病原菌为铜绿假单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌、鲍曼不动杆菌、琼氏不动杆菌、鲁氏不动杆菌及金黄色葡萄球菌。铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌对阿米卡星敏感性在80%以上,嗜麦芽窄食单胞菌对复方新诺明敏感性高(80.6%);未发现耐万古霉素的金葡菌。结论:肺泡灌洗液的主要病原菌为革兰阴性杆菌,细菌多药耐药现象严重,合理用药是控制感染的关键。

构建用慢病毒载体介导的RNAi敲除ABCG2的Caco-2细胞模型

目的:用重组构建的靶向ABCG2基因的慢病毒载体,感染Caco-2细胞,构建长期稳定敲除ABCG2蛋白的口服药物肠吸收的Caco-2细胞体外模型。方法:采用三质粒系统慢病毒重组技术,针对ABCG2基因的4个靶点,构建4个靶向ABCG2基因的慢病毒和1个不靶向ABCG2基因的对照组慢病毒,感染Caco-2细胞,应用RT-PCR,real-time PCR进行定性和半定量检测ABCG2在细胞中mRNA水平的表达,用Western blotting检测其蛋白水平的表达。结果:慢病毒Lv-ABCG2-sh1、2、3、4感染的细胞组与Lv-Negative-sh对照组相比,ABCG2的mRNA表达量分别下调了11%、77%、2%和65%,蛋白水平的表达也相应地减少,Lv-ABCG2-sh2细胞组具最高敲除效率。结论:用慢病毒载体介导的RNAi成功构建了长期稳定敲除ABCG2的Caco-2细胞模型。

应用FISH和PCR方法对7例性发育异常患者进行分子细胞遗传学研究

目的应用FISH和PCR方法对7例性发育异常患者进行明确的遗传学诊断，分析患者性发育异常产生的原因。方法采用CEPX-Yq21双色探针及SRY特异探针进行原位杂交，分析患者X、Y染色体及SRY基因的分布情况；PCR的方法检测Y染色体短臂SRY、ZFY基因和Y染色体长臂AZF因子，确定Y染色体的完整性。结果7例患者中，有5例社会性别为男性：染色体核型为2例46，XX，2例嵌合型46，XX／46，XY；46，XX／46，XY／47，XXY、1例45，X；2例社会性别为女性：1例46，XY，SRY基因阴性；1例46，XX，SRY阴性、ZFY基因阳性。46，XX男性患者中1例SRY基因位于Xp，1例为SRY阴性；嵌合型男性患者中1例AZF多个位点缺失，另1例AZF无位点缺失；45，X男性患者为SRY阳性。结论性染色体畸变是引起性发育异常的重要原因之一，Y染色体在性别分化中起睾丸决定作用，SRY基因是性别决定的主导基因，但不是决定全部男性化的惟一因素。

弓形虫包囊超微结构的观察

目的 :观察弓形虫包囊的超微结构 ,鉴定体外细胞培养所形成的包囊。方法:体外用HeLa细胞作载体培养PP株弓形虫形成包囊;体内用感染Fukaya株弓形虫的小鼠脑包囊,分别做电镜标本并观察。结果 :两者都观察到包囊的特征性超微结构且结果相类似。结论:弓形虫在体外一定培养条件下可以形成包囊。

体外构建合成成纤维细胞生长因子-1mRNA及其表达的初步研究

目的:参照m RNA稳定性理论,设计并体外转录合成具有一定稳定性的FGF1 m RNA,对其表达进行初步验证。方法:在p T7TS载体上加poly A、βglobin 3′、5′UTR,增加GC含量优化设计FGF1序列,并结合m RNA二级结构分析其稳定性,目的序列琼脂糖凝胶电泳及测序验证后,体外转录合成FGF1 m RNA,待浓度及片段大小验证后,行动物实验,通过ELISA法检测FGF1 m RNA表达。结果:二级结构分析显示,优化后FGF1序列稳定性更高;双酶切后琼脂糖凝胶电泳显示p T7TS-FGF1重组载体构建成功,测序验证正确;聚丙烯酰胺凝胶电泳显示合成m RNA大小正确。ELISA检测显示,实验组(92.48 pg/m L)小鼠血清中FGF1蛋白含量较对照组(13.59 pg/m L和15.54 pg/m L)明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);对照组间FGF1蛋白含量接近,二者无统计学差别(P>0.05)。结论:成功构建并体外转录合成稳定的FGF1 m RNA,m RNA与鱼精蛋白结合后回输小鼠在体内成功表达。

病例分析讨论法在医学遗传学教学中的应用

医学遗传学教学中应用病例分析讨论教学法，能激发学生学习主动性，提高学生独立思考及综合分析能力，培养学生的团结合作精神，在医学遗传学教学中密切师生关系，是值得推广的教学模式之一。

体外合成JSRV mRNA及其体内表达特异性中和抗体的研究

目的:应用假病毒中和法检测体外合成JSRV-env mRNA免疫小鼠产生的特异性抗体。方法:优化PT7TS载体序列,插入目的序列经电泳测序验证后,体外转录合成JSRV-env mRNA,将mRNA与鱼精蛋白结合后皮下注射免疫BALB/c小鼠。采用慢病毒包装系统制作JSRV假病毒,测定假病毒滴度,取不同组免疫小鼠血清进行假病毒为基础的抗体中和实验,检测小鼠体内针对JSRV-env mRNA的特异性抗体。结果:成功体外合成具有稳定性的JSRV-env mRNA;重组了基于慢病毒质粒结构的JSRV假病毒,且具有感染能力;假病毒体外中和实验检测出JSRV-env mRNA免疫小鼠体内产生了针对JSRV的特异性抗体。结论:针对JSRV病毒包膜的信使RNA,经皮下注射到小鼠体内,能够表达产生针对JSRV-env的中和抗体。

建立综合设计实验考核模式探索

传统考核方式作为实验课的独立单元用以了解学生对该课的理解和对实验课内容的掌握,评价动手能力。现代医学检验教育对实验课提出更高的要求,学生在掌握充实的理论基础上增加实验动手能力,对于学生适应社会人材的需求尤为重要。该文针对这一目标将实验课考核有机融于整个教学计划,建立综合设计实验模式,做为实验课的延伸和提高,摆脱学生为"考"而考的现状,变"学"为"考",对提高学生的学习主动性进行探索。

生殖异常姐妹的基因组拷贝数变异研究

目的:通过对出现生殖异常姐妹的基因组拷贝数变异情况的研究,探讨基因组拷贝数变异与苯对生殖健康的影响。方法:选取1个家系,包括从事苯作业2年后,连续生育两胎畸形儿的姐姐和出现不孕妹妹,及她们育有一女的弟弟和姐妹从事苯作业前生育的儿子。采集外周血,进行核型分析、微核试验和比较基因组杂交芯片研究,并用荧光定量PCR技术分析姐妹芯片结果中出现的共同缺失区域中的人类妊娠特异性糖蛋白(PSG)家族的4个典型基因。结果:5例染色体G显带核型均未发现异常。姐妹的微核率高于另外3例,且高于正常范围。基因芯片的结果显示,姐妹在19q13.31区域存在1个共同的缺失区域。PCR结果与芯片结果相一致。结论:单倍体PSG基因在正常妊娠中更易受到外界环境因素的影响,苯作为环境污染物,严重影响人类健康。