猫初级视皮层神经元视觉训练相关的方位调制特性可塑性变化研究

目的方位调制特性是V1区神经元最显著的特性之一,方位调制特性的发育具有视觉经验依赖的可塑性,本研究旨在定量测定和分析关键期后期幼猫V1区神经元由配对光栅视觉训练诱发的方位调制特性的可塑性变化。方法 采用在体细胞外记录技术,观察轻微麻醉和完全麻痹状态下3只幼猫初级视皮层V1区28个神经元的最优方位和方位选择指数(orientation selection index,OSI),采用非最优方位的高频配对光栅视觉训练13m in,观察训练后神经元最优方位偏移方向和偏移度大小,比较训练前后OSI的大小。结果 视觉训练后,最优方位在86%(24/28)的神经元中偏向训练刺激的方向(正偏离),在14%(4/28)的神经元中偏离训练刺激的方向(负偏离),平均偏移度为7.978°(SD=7.463°)。训练后OSI(0.199±0.096)较训练前OSI(0.159±0.078)增加,差异有统计学意义(t=-3.989,P<0.05)。结论 在发育关键期后期幼猫的初级视皮层,神经元具有明显的方位调制特性,感受野内非最优方位参数的光栅训练,通过高频配对刺激诱发的短时程突触传递效能可塑性变化的方式介导了神经元的方位调制特性的修饰变化。

单眼剥夺性弱视小鼠图形视觉诱发电位时间频率调制变化的研究

目的探讨单眼剥夺性弱视小鼠图形视觉诱发电位(PVEP)的时间频率调制的变化。方法生后26 d健康C57BL/6J小鼠18只,随机均分为正常对照组和单眼剥夺(MD)组。MD组小鼠右眼眼睑行褥式缝合,5 d造成单眼形觉剥夺,建立弱视模型。对照组在相同环境下饲养至生后31 d。随后,2组小鼠均于视皮层硬脑膜表面埋置电极。于生后32 d在麻醉状态下对小鼠的右眼行不同时间频率(2.50、1.25、1.00、0.75、0.50和0.25 Hz)的图形视觉刺激,记录PVEP,比较2组在不同时间频率的视觉刺激下PVEP的P100波幅值的差异。结果对照组小鼠对所有6种时间频率的PVEP P100波反应幅值差异无统计学意义(F=2.214,P>0.05);MD组小鼠对6种时间频率的PVEP P100波反应幅值差异有统计学意义(F=6.588,P<0.01),其时间频率调制曲线表现为低通特性。与对照组相比,高时间频率(2.50和1.25 Hz)视觉刺激条件下,MD组P100波幅值显著降低(t分别为2.362和2.425,P<0.05)。在中低时间频率(1.00、0.75、0.50和0.25 Hz)刺激条件下,与对照组相比,MD组的P100波反应幅值差异无统计学意义(均P>0.05)。结论 MD小鼠对高时间频率视觉刺激的PVEP反应降低,而中低时间频率下的PVEP反应未受到明显影响。

眼皮肤白化病患者TYR基因突变筛查及临床分型

背景 眼皮肤白化病（OCA）是由于先天性黑色素缺乏导致的眼、皮肤、毛发部分或全部色素缺失的一组遗传性疾病,可分为OCA1～7型,其中TYR基因（TYR）突变可引起OCA1型.OCA具有明显的遗传和表型异质性,突变基因的分子诊断有助于对OCA患者进行分型并进行分子发病机制研究. 目的 对OCA患者进行TYR基因突变筛查,分析基因突变类型与临床表型之间的关联性. 方法 于2011年1月至2014年12月在天津市眼科医院纳入10例OCA患者,观察并记录患者的临床表现.采集所有患者及1例患者直系亲属的外周静脉血各3 ml,提取基因组DNA,采用PCR法进行扩增,然后行TYR全基因序列分析,包括TYR基因的全部5个外显子编码序列及外显子5＇端和3＇端与内含子拼接部非编码区序列.结果 10例OCA患者的毛发呈白色或红棕色,皮肤呈白色,虹膜不同程度的色素缺少.患者最佳矫正视力为0.05～0.2,部分患者合并眼球震颤.直接检眼镜下眼底呈晚霞样改变,黄斑结构缺失.全TYR基因测序发现,例1患者携带复合性杂合突变体c.832C＞T（p.R278X）和c.1217C＞T（p.P406L）,其父母分别为第4外显子P406L杂合突变和第2外显子R278X杂合突变,患者为OCA1A亚型,其表型为白发和白色虹膜;例3患者携带c.1265G＞A（p.R422Q）和c.1217C＞T（p.P406L）复合杂合性突变,表现为OCA1B亚型,表型为头发红棕色,虹膜为灰黄色.其他8例患者未携带TYR基因突变体. 结论 TYR基因突变是导致OCA1型的主要诱因,OCA1A亚型表型的患者毛发和眼部全部色素丧失,OCA1B亚型为部分色素缺失.OCA的突变基因不同,可能是遗传和表型异质性的原因.

Wnt3a促进人晶状体上皮细胞增生及相关机制的研究

背景晶状体上皮细胞（LECs）的异常增生是晶状体后囊膜混浊（PCO）的重要病理基础，以往研究证实Wnt3a信号可促进上皮细胞的增生，但其对LECs的作用机制尚不清楚。目的研究Wnt3a对人LECs增生的作用，探讨相关分子机制，为PCO的临床治疗提供新的靶点。方法将人LECs系SRA01／04细胞进行培养后以4×10^5个／孔的密度接种于6孔板继续孵育。构建Wnt3a cDNA表达载体，采用脂质体介导转染技术将Wnt3a cDNA表达载体瞬时转染入SRA01／04细胞中，对照组转染pcDNA3-HA表达载体。采用Western blot技术验证载体在转染细胞中的表达；MTT法和流式细胞仪检测Wnt3a在SRA01／04细胞中的过表达对细胞增生能力的影响；Western blot法检测Wnt3a过表达对Wnt／β-catenin下游信号分子β—catenin、cyclin D1和c—myc蛋白表达的影响；应用免疫荧光法检测Wnt3a过表达后β—catenin表达的定位变化；采用免疫细胞化学法检测Wnt3a过表达后增生细胞核抗原（PCNA）蛋白表达的变化。结果本研究成功构建了人Wnt3a基因的表达载体Wnt3acDNA，获得Wnt3a过表达的wnt3a／SRA01／04细胞及对照peDNA3-HA／SRA01／04细胞。Western blot检测证实，与pcDNA3-HA／SRA01／04相比，Wnt3a／SRA01／04细胞内Wnt3a蛋白表达明显升高。MTT法检测表明，Wnt3a cDNA转染组SRA01／04细胞的增生率明显高于对照组（F分组=15．235，P=0．005；F时间=369．677，P=0．000），转染后各时间点2个组间SRA01／04细胞的增生率差异均有统计学意义（t=20．843，P=0．001；t=26．214，P〈0．01；t=25．177，P=0．001；t=35．516，P〈0．01；t=615．056，P〈0．01）。细胞周期分析发现，Wnt3a cDNA转染组G．期细胞比例为51．74％，明显少于对照组的79．44％，而s期细胞的比例为36．23％，明显多于对照组的12．34％。Wnt3a cDNA转染组SRA01／04细胞PCNA蛋白表达阳性率为47．00％±7．58％，明显高于对照组的16．00％±3．61％，差异有统计学意义（t=8．256，P〈0．01）。转染后48h，β—catenin蛋白密集分布于Wnt3a／SRA01／04细胞核和细胞质中，而在对照组仅出现于细胞质之中。Wnt3a／SRA01／04细胞中Wnt3a蛋白表达水平上调，β—catenin细胞定位由细胞质转入细胞核；Wnt／β-catenin信号通路靶蛋白Cyclin D1和c—Myc蛋白表达上调。结论在SRA01／04细胞中，Wnt3a过表达使Wnt／β-catenin信号通路活化，下游靶蛋白Cyclin D1和c—Myc表达上调，可促进人LECs的增生。

光学成像模糊对微扫视性眼球运动影响的研究

目的:比较正常屈光成像和光学成像模糊条件下人眼微扫视性眼球运动的行为学差异,探讨异常视觉经验对微扫视性眼球运动的影响。方法:将屈光矫正正常或无屈光不正的受试者13例分别在正常屈光成像状态(主导眼为Nd组,非主导眼为Nn组)和增戴-3.00D镜片(主导眼为Bd组,非主导眼为Bn组)条件下进行测试。采用高速眼球运动记录系统对受试者的双眼分别进行注视性眼球运动记录,采用Matlab程序对微扫视性眼球运动成分进行识别、提取和分析。Origin 8.0统计软件及Matlab 2008统计学工具包对各组微扫视幅度、峰值速度、发生频率、微扫视间隔时间等量化指标进行分析和比较。结果:各组间平均微扫视幅度差异无统计学意义,Bd组、Bn组峰值速度和微扫视发生频率较Nd组、Nn组显著降低,Bd组、Bn组微扫视间隔时间较Nd组、Nn组明显延长,两种屈光成像状态下主导眼与非主导眼的以上4个指标比较差异无统计学意义。结论:高速眼球运动记录对评价视觉质量、研究视觉感知与眼球运动行为之间的关系具有重要临床和科学价值。

成年大鼠视皮层局部场电位振荡特性的研究

目的从神经元集群层次上探讨大鼠初级视皮层(V1区)局部场电位振荡的层间特性。方法利用细胞外记录技术,记录麻醉状态下成年大鼠V1区的局部场电位振荡活动。经过快速傅立叶转换获得功率频谱图,分析V1区2+3层(L2/3)和5层(L5)低频段和高频段的功率成分,并计算功率比值。绘制功率比值与微电极穿行皮层深度分布散点图,比较L2/3和L511～20Hz局部场电位的频段功率值和功率比值差异,来观察成年大鼠V1区局部场电位振荡的层间差异。结果成年大鼠V1区L2/3以低频(2～5Hz)振荡为主,L5除了2～5Hz频段存在功率频谱高峰,在10～20Hz频段也出现了强烈的振荡活动。对皮层深度与功率比值绘制散点图并进行相关分析,结果显示两者呈正相关(r=0.663,P=0.000),回归方程为y=-0.649+0.001x。L2/311～20Hz频段功率值为(0.97±0.50)×10-8μV2·Hz-1,L5该频段功率值为(6.38±2.94)×10-8μV2·Hz-1,2层间比较差异有显著统计学意义(P=0.000)。结论成年大鼠V1区自发局部场电位振荡存在层间特性,较高频段振荡活动倾向于出现在L5。

TGF-β/Smad信号转导通路与白内障发生的研究进展

晶状体是重要的屈光间质,其透明性的维持主要依赖晶状体上皮细胞（LECs）.LECs的正常发育、增生、分化和凋亡主要依靠细胞因子及信号转导通路等的调控,LECs的病理状态最终导致白内障的发生.转化生长因子-β（TGF-β）是晶状体在生理及病理状态下重要的调节因子,Smad蛋白家族是TGF-β在细胞内信号转导的重要因子.TGF-β/Smad信号转导通路在诱导白内障的发生中起到重要的作用.就TGF-β/Smad信号转导通路参与调节晶状体病理过程的细胞生物学作用进行综述.

创新发展眼科 提高办刊水平

斗转星移、时间冉冉，我们告别了瑞兔岁月，迎来了红红火火的龙腾之年。新年伊始，中华医学会中华眼科杂志编委会和编辑部向工作在医、教、研一线的眼科同仁致以最亲切的问候!过去的一年，世界政治风云多变幻，金融、债务危机困扰美国和欧盟，挥之不去，人们不禁在问：这个世界怎么了？

VERION数字导航系统行散光矫正型人工晶状体(Toric IOL)轴位标记与传统裂隙灯标记方法的对比研究

目的评价VERION数字导航系统行散光矫正型人工晶状体(Toric intraocular lens,Toric IOL)轴位标记的准确性和有效性。方法回顾性分析2016年6月至2017年5月行白内障超声乳化摘出联合Toric IOL植入术的患者75例(75眼),所有患者术前应用VERION数字导航系统采集眼前节图像并设定IOL预设植入轴位(目标轴位),并于裂隙灯下采用1 m L注射器针头标记水平轴位。术中随机参考VERION导航下的IOL目标轴位或裂隙灯下标记的目标轴位植入IOL,记为VERION组(42眼)和裂隙灯组(33眼),术后1 d、1周、1个月、3个月记录患者最佳矫正视力,散瞳后进行眼前节照相,应用Photoshop软件进行图像分析,比较两组患者术后不同时间点的最佳矫正视力以及IOL实际轴位与目标轴位的偏差值。结果 VERION组术后1 d、1周、1个月、3个月最佳矫正视力≥0.8氉的眼数所占比例分别为61.9%、78.6%、71.4%、76.2%,裂隙灯组分别为69.7%、78.8%、81.8%、75.8%,各时间点两组相比差异均无统计学意义(均为P>0.05)。VERION系统标记的IOL目标轴位与裂隙灯下针头标记的IOL目标轴位的差值为(3.04±1.99)°。两组患者术后不同时间点IOL实际轴位与目标轴位的偏差值均无统计学意义(均为P>0.05)。结论应用VERION数字导航系统行Toric IOL轴位标记,术后效果准确稳定。

房水中多种细胞因子与2型糖尿病患者白内障术后黄斑水肿的关系

背景 多种炎性细胞和细胞因子参与2型糖尿病患者白内障术后黄斑水肿（ME）的发生和发展,一些因子已证实可作为2型糖尿病患者白内障术后ME的预测指标,对房水中多种相关细胞因子的同时检测具有重要意义.目的 探讨房水中多种细胞因子与2型糖尿病患者白内障术后ME发生的关系.方法 纳入2010年1月至2012年4月于天津市眼科医院行超声乳化白内障摘出术的2型糖尿病患者136例136眼,术中抽取房水0.lml,采用人磁性微球的多重免疫检测平板同时对房水中27种细胞因子的质量浓度进行测定.所有患者术前和术后4周进行黄斑区OCT检查,比较和分析房水中多种细胞因子与黄斑区视网膜厚度的关系.结果 纳入的136眼中均成功实施了超声乳化白内障摘出术,共116眼完成了4周的随访,占85.29％.术后第4周,34眼发生ME,占29.31％,为ME（＋）组,未发生ME者82眼,占70.69％,为ME（-）组,2个组间患者的基线资料匹配,差异均无统计学意义（均P＞0.05）.ME（＋）组术眼术后黄斑区视网膜厚度值为（237.24±24.16） μm,明显高于术前的（162.41±21.33） μm和ME（-）组术后4周的（185.53±18.35） μm,差异均有统计学意义（均P＜0.01）.ME（＋）组患者房水中白细胞介素-1β （IL-1β）、IL-6、IL-8、干扰素诱导蛋白-10（IP-10）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）和血管内皮生长因子（VEGF）的质量浓度明显高于ME（-）组,差异均有统计学意义（均P＜0.01）,术后4周黄斑区视网膜厚度值与术前房水中IL-1β、IL-6、IL-8、IP-10、MCP-1和VEGF质量浓度均呈正相关（r=0.288,P=0.005;r=0.345,P=0.008;r=0.256,P=0.016;r=0.377,P=0.007;r=0.423,P=0.001;r=0.279,P=0.012）.ME（＋）组术眼房水中IL-10和IL-12的质量浓度明显低于ME（-）组,差异均有统计学意义（P=0.003、0.017）.术后4周,黄斑区视网膜厚度与术前房水中IL-10和IL-12的质量浓度均呈负相关（r=-0.327,P=0.013;r=-0.264,P=0.036）.患者糖化血红蛋白水平及上述房水中高表达因子均为糖尿病患者白内障术后ME发生的危险因素（OR=1.25,P=0.026;OR=1.31,P=0.006;OR=3.62,P＜0.001;OR=1.82,P=0.007;OR=1.58,P＜0.001;OR =4.21,P＜0.001;OR=5.36,P＜0.001;OR=0.19,P=0.011;OR =0.31,P=0.013）.结论 2型糖尿病患者房水中细胞因子IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12、IP-10、MCP-1和VEGF质量浓度与白内障术后ME的发生密切相关.

干眼患者泪膜及睑板腺功能分析

目的探讨干眼患者泪膜功能及睑板腺功能随年龄和性别的变化趋势。方法本研究采用回顾性系列病例研究。选取154例（308眼）来我院就诊的干眼患者为研究对象，其中男76例（152眼），女78例（156眼），通过Oeulus角膜地形图眼表综合分析仪，测量每位患者双眼的首次泪膜破裂时间、平均泪膜破裂时间、首次泪膜破裂区域等数据，研究其随年龄及性别变化的规律；同时观察睑板腺形态，统计腺管根数及睑板腺缺失面积，通过睑板腺缺失面积评分系统研究其随年龄及性别变化的规律。结果干眼患者睑板腺缺失面积评分与年龄存在正相关关系（r=0．715，P〈0．05），其中男性r=0．821，P〈0．05，女性r=0．663，P〈0．05；腺管缺失根数百分比与年龄存在正相关关系（r=0．620，P〈0．05），其中男性r=0．629，P〈0．05，女性r=0．631，P〈0．05。睑板腺缺失面积评分在50-59岁组，男性为（9．47±1．00）分，明显高于女性的（7．53±2．21）分，差异具有统计学意义（P〈0．05）；在≥60岁组，男性为（10．69±1．20）分，明显高于女性的（9．87±1．70）分，差异具有统计学意义（P〈0．05）。泪膜破裂时间与年龄存在负相关关系，其中首次泪膜破裂时间为r=-0．49，P〈0．01，平均泪膜破裂时间为r=-0．54，P〈0．01；除〈30岁组以外，其他各年龄组中平均泪膜破裂时间均大于首次泪膜破裂时间，且差异均具有统计学意义（均为P〈0．05）。泪膜的首次破裂区域集中在角膜鼻下方，占所有分区中的31％。结论干眼患者在睑板腺的缺失面积及腺管缺失根数方面具有随年龄增长而逐渐加重的趋势，在泪膜破裂时间方面具有随年龄增长而逐渐下降的趋势，各年龄组干眼患者泪膜首次破裂区域集中在角膜鼻下方位置，这对干眼患者的诊断及治疗有一定指导价值。

重视和优选白内障术前生物学测量与人工晶状体屈光度计算的联合方案

随着白内障手术相关技术的优化,高端晶状体投入临床应用,白内障手术已处于屈光手术时代,通过手术矫正以恢复患者最佳屈光状态的技术方法备受关注,使得白内障术前的生物学测量及人工晶状体（IOL）屈光度的计算显得至关重要,因此临床医师应充分了解相关的测量机制及可控制误差的来源,尽可能减小术后屈光误差,提高术眼的视觉质量.白内障术前的生物学测量涉及不同方法,如眼轴长度、角膜曲率和前房深度的测量,而IOL的计算方法包括标准屈光度法、传统理论或经验公式法及光线追踪算法等.临床医师只有将白内障术前生物学测量与IOL屈光度计算方法进行适宜联合,才能确保术眼获得满意的视觉质量.

大鼠外侧膝状体神经元时空频率调谐特性发育观察

背景外侧膝状体（LGN）是视觉通路中重要的视觉信息处理器官，近年来发现LGN参与运动视觉信息处理，功能磁共振成像检查表明在LGN水平存在着双眼竞争，可能与弱视的发生有关。然而，LGN神经元时空频率特性的研究多限于猴或者猫，大鼠的相关研究较少。目的观察不同年龄段大鼠LGN神经元感受野时空频率调谐特性。方法取睁眼后14—16d组、20～22d组、27～30d组及睁眼后60d组Wistar大鼠各5只，用在体细胞外记录技术，通过正弦光栅视觉刺激分别对各组大鼠LGN神经元感受野时空调谐特性进行检测，观察大鼠LGN神经元时空频率调谐特性随着发育发生的动态变化。结果睁眼后14—16d组、20～22d组、27～30d组及睁眼后60d组大鼠LGN神经元时间和空间频率调谐低通调制和带通调制间神经元数量的差异均无统计学意义（，=0．68、0．47，P〉0．05），4个组大鼠LGN神经元感受野最优时间频率调谐特性成年后达最高值，大鼠LGN神经元的最优时间频率均值分别为（2．5±1．3）、（2．6±1．2）、（2．6±1．1）、（3．6＋1．1）Hz，差异有统计学意义（，=4．53，P〈0．05），睁眼后60d组的最优时间频率明显高于睁眼后14—16d组、20～22d组、27～30d组，差异均有统计学意义（q=4．43、4．10、4．03，P〈0．05），睁眼后14～16d组、20～22d组、27～30d组间的相互比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。4个组大鼠LGN神经元的最优空间频率均值分别为（0．04±0．04）、（0．04±0．03）、（0．05±0．03）、（0．05±0．04）cpd，差异均无统计学意义（F=0．58，P〉0．05），而时间频率瞬时带宽及空间频率带宽各年龄组问比较，差异均无统计学意义（F=0．37、1．22，P〉0．05）。结论大鼠LGN神经元感受野时空频率调谐发育特性的不同可能与其在视觉通路中的功能有关。

PET/CT在眼部肿瘤诊断中的应用

正电子发射断层与计算机断层成像（PET/CT）是将PET与CT 2种图像加以融合,PET提供病灶的代谢信息,CT显示病灶的解剖特征.利用PET/CT进行一次扫描可获得全身断层图像,可以高度敏感地反映体内生理及生化过程并对其精确定位.自1998年PET/CT机用于医疗体系以来,作为临床上重要的影像学诊断工具,近年来已被逐渐应用于检测眼部肿瘤,如脉络膜黑色素瘤、脉络膜转移癌、视网膜母细胞瘤、眼部淋巴瘤、泪腺腺样囊性癌等.就PET/CT的原理、标准摄取值（SUV）在临床中的应用价值以及PET/CT在眼部的临床应用进展进行综述.

Ophtha TOP测量角膜屈光参数的稳定性及其与Pentaeam测量的一致性评估

背景角膜屈光参数的准确测量对于眼表疾病的诊治、屈光手术的设计、人工晶状体屈光度的计算等至关重要，Ophtha TOP是一种用于临床的新型角膜人工晶状体测量仪，但验证其测量角膜屈光参数稳定性及准确性的研究尚少见。目的评估Ophtha TOP测量正常人群角膜屈光参数的稳定性，并评价白内障术前患者用Ophtha TOP测量的角膜屈光参数与Pentacam测量结果的一致性。方法采用诊断试验可靠性评价方法，2013年9月至2014年10月在天津市眼科医院选取健康志愿者30人60眼行Ophtha TOP检查，评价Ophtha TOP测量角膜屈光参数的稳定性；另选取拟行白内障手术的白内障患者30例30眼进行Ophtha TOP检查，以评估Ophtha TOP测量角膜屈光参数与Pentacam测量结果的一致性。记录角膜曲率最平坦曲率径线（Kf）、最陡峭曲率径线（Ks）、平均角膜曲率（Km），并记录轴位J0和J45的散光度。正常眼使用Ophtha TOP连续测量5次以上，采用组内相关系数（ICC）、变异系数（CoVs）和重复度（2．77Sw）评价Ophtha TOP测量上述参数的稳定性；白内障患者用Ophtha TOP和Pentaeam连续测量2次以上，采用Bland—Ahman一致性分析法评估Ophtha TOP测量的角膜屈光参数和散光参数与Pentacam测量结果的一致性。结果Ophtha TOP测量的正常眼Kf、Ks、Km、J0和J45的ICC均≥0．90，重复度2．77Sw均≤0．36，Kf、Ks、Km的CoVs均≤0．30。Ophtha TOP与Pentacam测量的白内障眼的角膜屈光参数Kf、Ks和Km的平均差值分别为（0．18±0．28）、（0．24±0．29）和（0．21±0．26）D，Ophtha TOP测量值均略高于Pentacam测量值，差异均有统计学意义（t=3．48、4．50、4．49，均P=0．00）；而2种测量仪器测量的散光参数J0、J45的平均差值分别为（0．07±0．21）D和（-0．02±0．18）D，差异均无统计学意义（均P〉0．05）。Bland-Ahman一致性检验显示，2种测定方法测量的Kf、Ks和Km的95％一致性区间（LoA）分别为-0．37-0．73、-0．33-0．81和-0．30-0．72D，J0和J45的95％LoA分别为-0．34-0．48和-0．37-0．33D。结论Ophtha TOP对正常人眼角膜屈光参数测量结果的稳定性较好。在白内障术前患者中，Ophtha TOP测量的角膜曲率和角膜散光结果与Pentacam测量值一致性好。

光暴露与人晶状体上皮细胞氧化损伤和凋亡的关系及其机制

背景 研究表明,光暴露可导致晶状体上皮细胞（LECs）的损伤,与活性氧簇（ROS）的累积和自由基反应有关,其发病机制一直是研究的热点.目的 研究LECs光损伤的病理机制.方法 将人LECs系HLEB-3细胞株进行复苏和培养并分为4个组.将20 000 lx光照度的发光二极管（LED）光源置于密封的培养箱并光照培养的细胞6、12、24 h,未行光照射的细胞作为正常对照组.采用流式细胞术检测各组LECs内ROS的表达及细胞凋亡率,分别使用real-time PCR和Western blot技术检测各组细胞中bax和转化生长因子-β2（TGF-β2） mRNA及其蛋白的相对表达水平;采用MTT法检测并比较正常对照组与光照24 h组细胞的增生值（A570）.结果 正常对照组培养的细胞排列紧密,光照后随着时间延长,细胞肿胀,细胞间隙增宽.LECs内ROS平均荧光强度（MFI）、早期凋亡率、总凋亡率随光照时间的延长逐渐上升,各组间总体比较差异均有统计学意义（F=8.276,P=0.036;F=27.878,P=0.006;F=9.333,P=0.028）.光照6h组、12h组和24 h组,bax mRNA的相对表达量较正常对照组分别升高（1.45±0.33）、（5.45±2.58）和（15.86±3.93）倍,TGF-β2mRNA的表达分别升高（1.22±0.12）、（1.79±0.38）和（4.01±0.93）倍,4个组间总体比较差异均有统计学意义（F=13.679,P=0.023;F=13.320,P=0.024）.光照24 h组bax和TGF-β2蛋白的表达量分别较正常对照组升高约1.85倍和2倍.正常对照组细胞增生值（A570）为0.959±0.058,明显高于光照24 h组的0.897±0.093,组间差异有统计学意义（t=-3.130,P=0.003）.结论 20 000 lx的光照可导致体外培养人LECs的氧化损伤和凋亡,bax和TGF-β2可能参与光诱导人LECs的损伤过程.

小切口角膜基质透镜取出术中负压脱失的临床研究

目的探讨飞秒激光小切口角膜基质透镜取出术(SMILE)术中负压脱失的原因,并分析其处理方法及临床效果。方法巢式病例对照研究。选取2013年9月至2017年9月在天津市眼科医院屈光手术中心接受SMILE的患者信息,术中发生负压脱失的患眼纳入负压脱失组,与负压脱失组同日行SMILE但无术中及术后并发症的患者纳入对照组。分别于术前及术后1d、1周、1个月、3个月、6个月评估患者屈光度及视力。负压脱失组与对照组之间正态分布的计量参数比较应用独立样本t检验,计数资料及单向有序计数参数用χ2检验。负压脱失组与对照组术眼术后实际矫正等效球镜度数(SE)随着术前预测SE的变化评估采用Pearson直线相关分析。结果本研究共纳入206例(344只眼)患者,年龄为(22.9±5.0)岁,男性109例,女性97例。其中负压脱失组25例(27只眼),对照组181例(317只眼)。负压脱失发生时间:(1)扫描透镜后表面(5只眼,18.5%);(2)透镜侧切(1只眼,3.7%);(3)扫描透镜前表面(16只眼,59.3%);(4)扫描切口(5只眼,18.5%)。主要原因有术中眼球异常转动(14只眼,51.9%),角膜表面水分过多(13只眼,48.1%)。负压脱失组与对照组之间角膜帽直径分别为(7.78±0.22)和(7.60±0.25)mm,差异有统计学意义(t=2.341,P=0.040)。术后3个月时,负压脱失组3.7%(1只眼)术眼最佳矫正视力降低1行;对照组仅2.6%(6只眼)术眼最佳矫正视力降低1行。负压脱失组及对照组术眼裸眼视力>0.10的比例分别为92.6%(25只眼)及91.3%(209只眼),术眼残余SE在±0.50D之间者分别占85.2%(23只眼)及93.4%(214只眼)。结论SMILE术中负压脱失最常见于扫描透镜前表面时,角膜表面水分过多、术中突然眼动或角膜帽直径过大均可能诱发负压脱失;负压脱失可能造成患者术后视力恢复速度缓慢,但有效的处理可使患者最终的视力恢复不受影响。

先天性眼球震颤眼球运动波形的相图特点分析

背景先天性眼球震颤患者的眼球运动波形表现各异，其时间动力学的非线性特征复杂，常规的时间序列波形图不便于对患者进行临床诊断及评估。眼球运动系统是非线性反馈控制系统，而相图法是一种用于描绘非线性系统运动特征的分析技术，但相图法在先天性眼球震颤检测中的应用尚未见报道。目的尝试建立先天性眼球震颤眼球运动波形的相图法分析技术，为先天性眼球震颤的临床诊断与定量评估提供新的方法。方法采用前瞻性病例观察设计，纳入2012年4月至2013年2月在天津市眼科医院就诊的25例先天性眼球震颤患者，其中先天性运动性眼球震颤（CMN）患者12例，隐性眼球震颤（LN）患者13例。所有患者行视频眼动图（VOG）检查，对VOG数据进行格式转换后，采用Matlab程序对数据进行处理，得到每个眼动波形周期的相位图，并从相位图上测得周期位移（CPS）、慢相峰值速度（SPV）及其标准化值（SSPV）、快相峰值速度（FPV）及其标准化值（SFPV）。比较先天性眼球震颤波形速度递增型和速度递减型的测量参数。结果先天性眼球震颤的眼球运动相图呈现周期性规律性往复运动轨迹，其慢相过程表现为密集带状轨迹，快相过程表现为稀疏环状轨迹。CMN的眼球运动波形以速度递增型为主，而LN的眼球运动波形以速度递减型为主，2种波形相图轨迹走行均呈顺时针方向。速度递增型CPS、SPV及FPV分别为（4．646±1．565）、（223．821±114．049）和（767．481±263．560）°／s，速度递减型CPS、SPV及FPV分别为（9．373±4．189）、（357．531±154．300）和（1148．706±541．362）°／s；速度递增型中SPV和FPV与CPS间均呈显著正相关（rFPV-CPS=0．685，P=0．000；rFPV-CPS=0．680，P=0．000）；速度递减型中SPV和FPV与CPS间均呈显著正相关（rFPV-CPS＝0.783，s=0．783，P=0．000；rFPV-CPS=0．803，P=0．000）。2种波形FPV均大于SPV，差异均有统计学意义（速度递增型：t=6．558，P=0．000；速度递减型：t=5．068，P=0．000）。速度递增型SSPV为（48．062±15．365）。／s，略大于速度递减型的（41．099±17．027）。／s，但差异无统计学意义（t=1．070，P=0．296）；速度递增型SFPV为（171，186±47．825）。／s，大于速度递减型的（125.317±38．266）。／s，差异有统计学意义（t=2．658，P=0．014）。结论相图法能够直观显示先天性眼球震颤眼球运动轨迹的周期性动态特征，便于测量其不同时相的运动幅度、速度等参数。

全外显子组测序技术对两个眼前节发育不良家系致病基因检测

目的筛查两个眼前节发育不良(anterior segment dysgenesis,ASD)家系的致病基因突变。方法对2个来自河北和河南的ASD家系进行分析。在获得受检者同意后,对家系成员进行详细的眼科检查,采集外周静脉血,提取全基因组DNA。依据测序需求选取家系1中2例患者及1名正常对照、家系2中1例患者及1名正常对照进行全外显子组测序,对测序结果筛选候选基因,运用Sanger测序进行验证。利用Poly Phen-2,SIFT Human Splicing Finder软件进行突变危害性预测。结果家系1连续3代均有患者发病,符合常染色体显性遗传特征,9例患者有均不同程度的双眼ASD。得到13个SNV和55个In Del候选突变,在候选基因PAX6中,家系1发现一已知错义突变c.T2A(p.M1K);家系2中共8名成员,其中2例患者,在测序中发现一已知剪切位点突变c.357+1g>c。3个预测软件作出危害性预测。结论外显子测序技术快速检测出PAX6基因中T2A(p.M1K)和c.357+1g>c突变,并确定其为ASD的致病突变。

晶状体功能失调指数在年龄相关性白内障诊断及手术中的应用

目的探讨采用iTrace视功能分析仪测量晶状体功能失调指数（DLI）在不同类型年龄相关性白内障诊断及手术中的价值。方法采用回顾性病例观察方法。纳入2016年11月至2017年4月于济南市明水眼科医院行白内障手术的年龄相关性白内障手术患者132例132眼，根据白内障类型分为核型组39例39眼、皮质型组48例48眼和后囊下型组45例45眼。术前记录最佳矫正视力（LogMAR视力），根据LOCSⅢ分级体系判断晶状体混浊程度并评分，采用iTrace视功能分析仪测量DLI值，所有患者进行常规白内障超声乳化摘出术，记录术中超声乳化累积释放能量（CDE）值。采用Pearson相关检验分析各参数间的相关性。结果核型组患者DLI与LogMAR视力、晶状体核混浊度（NO）评分值、晶状体核颜色（NC）评分值、CDE值均呈负相关（r＝－0.593、－0.618、－0.606、－0.524，均P〈0.01）。皮质型组和后囊下型组患者DLI与LogMAR视力、LOCS Ⅲ评分值均呈负相关（皮质型组：r＝－0.653、－0.614，均P〈0.01；后囊下型组：r＝－0.583、－0.577，均P〈0.01），2个组DLI与CDE值均无明显相关性（r＝－0.245，P＝0.093；r＝－0.225，P＝0.137）。3个组患者LogMAR视力、LOCS Ⅲ评分值与CDE值均呈正相关。结论 对于不同类型的年龄相关性白内障，DLI与LogMAR视力和LOCS Ⅲ分级评分值均呈负相关，可以反映视力损害程度和晶状体混浊程度。DLI可以为核型白内障的术中超声乳化能量使用情况提供参考。