重组病毒在循环肿瘤细胞检测中的应用及研究进展

循环肿瘤细胞（Circulating tumor cells,CTCs）是液体活检的重要手段之一,也是非侵入性的个体化实验诊断工具.以FDA首个批准的CTCs检测平台CellSearch为代表的商品化CTCs分离平台已被证实可有效富集监测CTCs,但出现上皮—间质转化的CTCs因不表达上皮细胞粘附分子而可能被漏检.此外大多CTCs检测平台因无法区分活细胞和死细胞而不能有效反映CTCs功能状态,因此如何利用常规设备开发新型分离方法用于检测具有转移潜力的CTCs具有更加重要的现实意义.插入人端粒酶启动子和绿色荧光蛋白（Green fluorescent protein,GFP）的复制选择性溶瘤病毒,主要为单纯疱疹病毒（Herpes simplex virus,HSV）和腺病毒（Adenovirus,ADV）具有特异示踪CTCs的作用.肿瘤细胞感染重组病毒24 h后稳定表达GFP,通过荧光显微镜或流式细胞仪直接检测荧光信号即可对CTCs进行计数,结合PCR、测序等方法亦可进行相关下游分析.此外,通过基因工程改造的复制选择性溶瘤病毒仅在活细胞中生长繁殖,有利于在早期发现具有转移潜能的高活性CTCs.以重组病毒为基础的CTCs检测方法灵敏准确、简便易行,具有较好的临床应用前景.

HOPX在宫颈癌组织和血清中的表达及其与CEA和CA125的相关性

目的:探讨HOPX基因在宫颈癌组织和血清中的表达水平及其对宫颈癌HeLa细胞的作用及其机制,并分析其与肿瘤标志物CEA和CA125表达的相关性。方法:选取2015年6月至2017年12月天津市滨海人民医院和武清区人民医院50例宫颈癌患者癌组织、癌旁组织和外周血清样本,同时取50例正常人的血清样本。qRT-PCR检测宫颈癌组织和血清中HOPX的表达水平,免疫组化染色检测宫颈癌患者血清中HOPX蛋白的表达,通过NCBI-GEO和TCGA数据库收集宫颈癌癌组织标本和患者预后的相关数据,分析HOPX基因在宫颈癌组织中的表达水平及其与患者预后的相关性。过表达的HOPX和对照的质粒转染HeLa细胞后,MTT和克隆形成实验检测转染的HeLa细胞的增殖能力,Transwell实验检测HeLa细胞迁移和侵袭能力,Western blotting检测其EMT相关蛋白的表达。结果:标本检测和数据库分析均显示,HOPX mRNA和蛋白在宫颈癌肿瘤组织及血清中均低表达,且与患者生存期呈正相关(r=0.736,P<0.05);HOPX在组织及血清中表达与CEA和CA125的表达显著负相关(r=-0.678,P<0.05)。过表达HOPX抑制HeLa细胞增殖、迁移和侵袭能力,而且能够促进HeLa细胞中ETM相关的E-cadherin的表达、抑制Vimentin和ICAM1的表达(均P<0.05或P<0.01)。结论:HOPX基因在宫颈癌组织及血清中相对低表达,且与CEA和CA125水平呈负相关,与患者的生存期呈正相关。HOPX结合肿瘤标志物CEA/CA125联合检测可提高宫颈癌患者的早期诊断率,也为宫颈癌的精准治疗提供一个新的思路。

miRNA-34b/c-5p对乳腺癌中神经激肽1受体-截短型表达的影响

目的:探究乳腺癌中miRNA-34b/c-5p对神经激肽1受体-截短型(neurokinin1 receptor-truncated,NK1R-Tr)表达的影响及miRNA-34b/c-5p和NK1R-Tr对乳腺癌细胞迁移侵袭能力的影响。方法:收集2013年2月至5月天津医科大学肿瘤医院50例乳腺癌患者组织标本,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测miRNA-34b/c-5p及NK1R-Tr的表达,采用蛋白免疫印迹实验检测乳腺癌MDA-MB-231和MCF-7细胞中miRNA-34b/c-5p对NK1R-Tr表达的影响,采用划痕及Transwell实验检测miRNA-34b/c-5p及NK1R-Tr对MDA-MB-231细胞迁移及侵袭能力的影响。结果:在乳腺癌组织及MDA-MB-231和MCF-7细胞中,miRNA-34b-5p和miRNA-34c-5p与NK1R-Tr表达呈负相关。发生淋巴结转移的乳腺癌患者组织中NK1R-Tr的相对表达量为5.75,未发生淋巴结转移者相对表达量为4.29,两者比较差异具有统计学意义(P=0.026)。过表达miRNA-34b/c-5p及敲低NK1R-Tr可以显著抑制MDA-MB-231细胞的迁移侵袭能力(均P<0.001)。结论:乳腺癌中miRNA-34b/c-5p与NK1R-Tr表达呈负相关,且miRNA-34b/c-5p和NK1R-Tr可能成为抑制乳腺癌转移的潜在治疗靶点。

ABCF2在卵巢癌组织中的阳性表达及临床意义

目的探讨三磷酸腺苷结合盒F超家族成员2(ABCF2)在卵巢癌组织中的表达及临床意义。方法选取2014年2月-2016年2月在该院进行治疗的卵巢癌患者113例,分为化疗敏感组(79例)和化疗耐药组(34例),两组患者年龄及病理类型比较差异无统计学意义(P>0.05)。两组患者均行肿瘤细胞灭活术及紫杉醇类与铂类联合化疗,采用免疫组化法检测卵巢组织中ABCF2的表达,随访患者化疗耐药情况及生存情况。结果化疗耐药组Ⅲ~Ⅳ期和ABCF2阳性表达比例分别为76.47%和88.24%,明显高于化疗敏感组(P<0.05);ABCF2阳性表达患者1、2年生存率分别为86.80%和39.70%,ABCF2阴性表达患者1、2年生存率分别为92.80%和71.60%,ABCF2阴性表达患者生存率优于ABCF2阳性表达患者(P<0.05)。结论 ABCF2阳性表达可能与卵巢癌患者化疗耐药及生存期有一定的联系,需进一步研究。