卵巢癌腹腔微环境中肿瘤相关巨噬细胞表型特点及其TLR表达谱的研究

目的:探讨卵巢癌腹水微环境中肿瘤相关巨噬细胞(TAM)浸润情况及其表型特征和TAM的Tol样受体表达情况。方法:应用免疫组织化学方法及流式细胞术检测卵巢癌及妇科良性病变腹水中CD68+TAM及其亚型的比例情况。应用Real-timePCR检测不同亚型TAM的Tol样受体的表达情况。结果:23例卵巢癌腹水细胞CD68+TAM平均值为73.6个/HP,20例良性病变平均计数为50.2个/HP。两组间CD68+TAM浸润差异无统计学意义(P>0.05)。CD68+TAM在卵巢癌及对照组腹水中所占比例无差异,分别为31.7%和18.8%(P>0.05)。卵巢癌腹水中M2型TAM占全部巨噬细胞54.3%,明显高于对照组10.0%(P<0.05);对照组M1型TAM占优势,为53.3%,明显高于卵巢癌组的30.5%(P<0.01)。不同亚型巨噬细胞Toll样受体表达差异无统计学意义。结论:卵巢癌腹腔微环境中同时存在M1和M2型TAM,但M2型TAM在卵巢癌中占优势,而M1型TAM在良性病变中占优势。Toll样受体不能区分M1-TAM与M2-TAM。

抑制ERK和Akt激酶对曲古柳菌素诱导的卵巢癌细胞凋亡的影响

目的:探讨抑制胞外信号调节激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)和蛋白激酶B(Akt)对曲古柳菌素(TSA)诱导的卵巢癌细胞凋亡的影响。方法:常规培养OVCAR-3卵巢癌细胞株,分为对照、TSA、TSA+PD98059和TSA+Y294002四组,其中TSA组为TSA 2.5μM处理24 h,TSA+PD98059组和TSA+Y294002组采用5μM PD98059或Y294002预处理1 h后,2.5μMTSA处理24 h。MTT法分析各组细胞生存情况,Western blot法检测P53及细胞色素C蛋白的表达,分光光度法检测Caspase-9,Caspase-8和Caspase-3活性。结果:MTT分析结果显示,与对照组比较,TSA处理后显著降低OVCAR-3细胞的存活率(P<0.05);与TSA单独处理比较,采用5μM PD98059或Y294002预处理可以进一步降低OVCAR-3细胞的存活率(P<0.05)。Western bot分析结果显示TSA处理可以显著增加OVCAR-3细胞中P53及细胞色素C蛋白的表达,增加OVCAR-3细胞Caspase-9,Caspase-8和Caspase-3活性;对比TSA单独处理,TSA和Y294002联合应用可以增加OVCAR-3细胞中P53及细胞色素C蛋白的表达,提高Caspase-9,Caspase-8和Caspase-3的活性(P<0.05),而TSA和PD98059联合应用无这种效果。结论:TSA可以诱导卵巢癌OV-CAR-3细胞凋亡,其机制可能与上调P53及细胞色素C蛋白表达,激活Caspase-9、Caspase-8、Caspase-3和线粒体凋亡途径有关。抑制Akt可以通过以上机制进一步促进TSA诱导的细胞凋亡。

上皮性卵巢癌脑转移的现状分析

脑部是上皮性卵巢癌转移的少见部位,但近20年来发生率有所提高。多数患者以头痛症状就诊,诊断依赖于CT或MRI影像学检查。目前尚无一个统一的治疗规范,采取手术和放化疗在内的综合治疗可以使患者受益。特别对于单发脑转移灶者,以手术为主的综合治疗可以改善患者预后。立体定向放疗的应用为该治疗提供了新的前景。该病的预后差,相关预后因素尚有争议,目前一致认为患者一般情况良好和未合并颅外病灶有利于预后。

第10号染色体上磷酸酶和张力蛋白同源缺失的基因对人卵巢癌A2780细胞侵袭和迁移能力的影响及相关机制

目的探讨第10号染色体上磷酸酶和张力蛋白同源缺失的基因（PTEN）对人卵巢癌A2780细胞侵袭和迁移能力的影响及相关机制。方法将携带外源性人PTEN基因的野生型质粒（WT—PTEN）和磷酸酶域突变型质粒（C124A—PTEN）转入人卵巢癌细胞株A2780中，利用Transwell小室法和划痕愈合实验检测转染前后细胞侵袭和迁移能力的变化，应用Western blot检测各组细胞PTEN及其下游相关蛋白表达的变化。以空载体质粒和未转染细胞作为对照。结果细胞侵袭实验显示，WT-PTEN／A2780、C124A—PTEN／A2780、GFP／A2780和A2780细胞穿透Matrigel胶的细胞数，分别为（24．3±2．5）个、（43．7±3．8）个、（44．7±2．1）个和（45．0±3．0）个，WT-PTEN／A2780细胞的穿膜数明显少于其他各组（P〈0．05）。划痕愈合实验显示，WT—PTEN／A2780、C124A-PTEN／A2780、GFP／A2780和A2780细胞的迁移距离分别为（54．1±3．7）μm、（78．7±3．4）μm、（78．1±3．1）μm和（76．8±3．5）μm，WT-PTEN／A2780细胞的迁移速度明显慢于C124A—PTEN／A2780、GFP／A2780和A2780细胞（P〈0．05）。WT-PTEN／A2780细胞中基质金属蛋白酶9（MMP-9）蛋白的表达明显低于C124A．PTEN／A2780、GFP／A2780和A2780细胞（P〈0．05）。结论野生型PTEN可有效抑制A2780细胞的侵袭和迁移，该抑制作用与A2780细胞中MMP-9表达下调有关。