SFRP1基因表达与大肠肿瘤发生的关系研究

目的:探讨SFRP1与大肠癌发生的关系。方法:运用半定量RT-PCR方法及免疫组化方法检测SFRP1、β-catenin、E-cad在正常大肠粘膜、大肠腺瘤以及大肠腺癌中的表达。结果:大肠腺癌、腺瘤组织的β-catenin、E-cad胞膜表达不同程度缺失,β-catenin呈胞质和胞核异位表达,腺瘤β-catenin的异位表达率为87.5%,低于大肠腺癌(100%,P<0.05)。大肠腺瘤β-catenin、E-cad胞膜表达缺失率分别为37.5%、37.5%,低于大肠腺癌(58.8%、76.4%,P均<0.05)。半定量RT-PCR显示,SFRP1基因在大肠腺瘤、大肠腺癌组织中的表达水平均明显低于大肠正常组织的对照组,且大肠腺癌组织中SFRP1基因的表达水平低于大肠腺瘤(P<0.05)。结论:SFRP1基因下调使其拮抗Wnt途径的功能削弱,导致Wnt的持续存在,其下游基因β-catenin、E-cad异常表达,从而导致大肠粘膜细胞获得恶变潜能。故SFRP1可能为预防大肠肿瘤的发生、大肠肿瘤的早期诊断提供新思路,并为防治大肠肿瘤提供新靶标和实验依据。

原代肿瘤细胞三维立体培养药物敏感性检测在乳腺癌个体性化疗中的应用研究

背景与目的研究乳腺癌患者化疗药物敏感性差异,探讨原代肿瘤细胞三维立体培养法化疗药物敏感性检测（CD-DST）在乳腺癌个体性化疗中的意义。 方法采用CD-DST法检测乳腺癌原发病灶肿瘤组织120例（粗针吸活检10例，手术110例）对5种乳腺癌常用化疗药物（紫杉醇、表阿霉素、5-氟尿嘧啶、顺铂、诺维本）的敏感性，观察检测成功率、患者问药物敏感性的个体差异及检测结果与临床应用效果的吻合度。

双向分化恶性肿瘤血管生成拟态分子机制初步研究

血管生成拟态是1999年美国Iowa's大学的Maniotis等在研究人眼葡萄膜黑色素瘤微循环的过程中发现了一种全新的肿瘤血液供应模式.恶性黑色素瘤细胞通过自身变形和细胞外基质相互作用模仿血管壁结构形成可输送血液的管道系统,从而重塑肿瘤的微循环,并与宿主血管相连通使肿瘤获得血液供应.

蛋白质组学技术及其在肿瘤研究中的应用

蛋白质组学是近年来生命科学领域里继基因组学之后的全球研究热点 ,目前它在肿瘤学基础与临床应用研究中正蓬勃开展。本文综述了蛋白质组学的经典与新兴技术手段以及它在寻找肿瘤特异标志物、肿瘤早期诊断与分类判别。

基因工程抗体及免疫毒素抗肿瘤研究进展

基因工程免疫毒素由于具有高特异性、高细胞毒活性 ,是肿瘤治疗的方法之一。现就基因工程抗体及免疫毒素的改造。

2008-2016年天津市河西区恶性肿瘤发病与死亡趋势分析

目的:分析天津市河西区恶性肿瘤发病与死亡的流行趋势,为肿瘤防治提供科学依据。方法:分析2008-2016年河西区户籍居民的肿瘤随访登记数据,计算发病率、死亡率、中国人口标化率、世界人口标化率、0~74岁累积率,并分析其时间趋势。结果:2008-2016年河西区恶性肿瘤粗发病率为370.17/10万,中标发病率为190.07/10万,世标发病率为184.09/10万,累积发病率(0~74岁)为21.13%。恶性肿瘤粗死亡率为211.80/10万,中标死亡率为92.50/10万,世标死亡率为90.98/10万,累积死亡率(0~74岁)为10.32%。恶性肿瘤发病顺位第1位的是肺癌,发病率为91.30/10万,其次为乳腺癌、结直肠癌、肝癌和胃癌,前10位恶性肿瘤占全部恶性肿瘤发病的76.65%;恶性肿瘤死亡率第1位的是肺癌,死亡率为75.85/10万,其次为肝癌、结直肠癌、胃癌和胰腺癌,前10位恶性肿瘤占全部恶性肿瘤死亡的81.34%。2008-2016年期间河西区恶性肿瘤发病率呈平稳上升趋势,而恶性肿瘤标化死亡率呈下降趋势。结论:2008-2016年天津市河西区恶性肿瘤的发病率呈上升趋势,肿瘤负担依然严峻。

肿瘤免疫治疗疗效评价的新标准

目的:肿瘤免疫治疗近年来发展迅猛,已被越来越多的临床医生所认可,并广泛应用于多种恶性肿瘤的治疗。与传统的化疗不同,免疫治疗发生严重毒性反应的概率更低,患者耐受性更好,尤其对患者生活质量的改善作用更明显。但遗憾的是,目前临床上采用传统的肿瘤治疗评价体系对肿瘤免疫治疗疗效评价时往往不能令人满意,导致部分进入Ⅲ期临床试验的免疫治疗项目最后以失败告终。鉴于现有WHO或RECIST(response evaluation criteria in solid tumor)标准很难对肿瘤免疫治疗的临床疗效进行准确的解读和确切的评价,因此在2009年第23期的Clinical Cancer Research上专门刊载了由纽约Me-morial Sloan-Kettering癌症中心Wolchok教授等撰写的论文——《针对实体瘤免疫治疗疗效评价指南:免疫相关疗效评价标准》,深入探讨了肿瘤免疫治疗疗效评价新标准的意义和应用前景。本文以该论文为主,结合其他相关文献,对"肿瘤免疫疗效评价的新标准"这一肿瘤学界的热点问题作一介绍。

CLOCK基因单核苷酸多态性与乳腺癌易感性的病例对照研究

目的：探讨生物钟CLOCK基因的单核苷酸多态性与乳腺癌易感性的关系。方法：采用应用聚合酶链式反应一限制性片断长度多态性（PCR—RFLP）技术检测1499例中国汉族女性乳腺癌患者和1592例正常女性对照者CLOCK基因rs3805151位点的基因型，采用SPSS16．0软件进行数据处理。结果：CLOCK基因CC型、CT型和TT型在病例组和对照组闻的分布差异有统计学意义（x^2=9．712，P=0．008），与CC型相比，杂合型CT可以显著增加乳腺癌的发病风险（OR=1．41，95％CI：1．07～1．87），携带T等位基因（CTrrr）的个体乳腺癌风险增加35％（OR=1．35，95％CI：1．04-1．76）。分层分析显示，携带T等位基因绝经后、无肿瘤家族史者、无乳腺良性病史的个体患乳腺癌风险增加。结论：CLOCK基因rs3805151C〉T可增加乳腺癌发病风险，这一结论有待于进一步通过不同种族人群的关联研究以及功能学研究的证实.

恶性黑色素瘤浸润转移相关分子机制研究

目的:探讨MMP-2、MMP-9、TIMP-2、E-cadherin在高、低恶性黑色素瘤中浸润转移中的作用。方法:将临床资料完整的恶性黑色素瘤样本60例,按CK8、CK18染色结果分为高度恶性和低度恶性2组,并进行MMP-2、MMP-9、TIMP-2、E-cadherin免疫组化染色。结果:高度恶性组黑色素瘤MMP-2、TIMP-2的表达高于低度恶性组黑色素瘤的表达,低度恶性组黑色素瘤MMP-9、E-cadherin的表达高于高度恶性组,其中低度恶性组黑色素瘤MMP-9的表达结果同高度恶性组黑色素瘤的表达差别具有统计学意义(P<0.05)。结论:肿瘤浸润转移相关蛋白在不同肿瘤的浸润转移过程中作用各不相同,MMP-2、TIMP-2促进了肿瘤的浸润转移,而MMP-9、E-cadherin抑制肿瘤的转移。

熊果酸磷脂纳米注射剂在小鼠体内的分布研究

目的:考察熊果酸磷脂纳米(UA-PL-NP)注射剂在小鼠体内的组织分布。方法:取昆明小鼠尾静脉注射UA-PL-NP后,分别于给药后5min、1h和4h收集血浆和各组织,采用反相高效液相(RP-HPLC)法检测各组织中熊果酸(UA)药物浓度。结果:(1)UA-PL-NP给药后UA主要分布于肝和胃肠组织(。2)主要分布组织的药物浓度呈现随给药剂量增加而线性增加的趋势(。3)胃、肠组织药物浓度于停药后迅速下降,至停药4h后浓度下降至极低水平;而肝组织药物浓度于停药后不断升高,停药后4h仍维持较高浓度([52.15±18.61)mg·kg-1]。结论:UA-PL-NP给药初期迅速分布于肝、胃、肠等组织,停药后胃肠组织药物释放入血后经再分布达平衡,使UA较长时间高度浓聚于肝组织,具有肝靶向分布特征。

CRY1基因单核苷酸多态性与乳腺癌风险的关联研究

背景与目的:隐花色素-1(cryptochrome-1,CRY1)基因属于生物钟基因家族,它最早在植物体内发现,是生物钟基因负反馈环的主要部分。近年来生物钟基因多态性与乳腺癌易感性的关系引起国内外研究者的广泛关注,本研究探讨生物钟基因CRY1的单核苷酸多态性与乳腺癌易感性的关系。方法:采用TaqMan单核苷酸多态性分型技术检测1 523例中国汉族女性乳腺癌患者和1 599名正常女性对照者CRY1基因rs1056560位点的基因型,采用SPSS 16.0软件进行数据处理。结果:CRY1基因rs1056560位点三种基因型(TT/GT/GG)在乳腺癌患者和对照间的分布差异具有显著性(χ2=6.394,P=0.041),与TT基因型相比,GT基因型可以显著降低乳腺癌的发病风险(OR=0.743,95%CI:0.580～0.951),携带至少一个G等位基因(GT/GG)的个体乳腺癌风险降低23.2%(OR=0.768,95%CI:0.606～0.971)。分层分析后发现,rs1056560 T>G保护作用在绝经后妇女、初潮≥13岁、初孕≥25岁、无肿瘤家族史者、无乳腺良性病史及流产0～1次妇女中尤为显著。结论:CRY1基因rs1056560 T>G单核苷酸多态性与中国人群乳腺癌的发病风险相关,这一结论有待于不同种族人群的关联研究以及功能学研究的进一步证实。

MDR1和Anxa2在乳腺癌组织中的表达与侵袭转移的关系研究

目的:探讨乳腺癌组织中多药耐药基因(MDR1)和膜联蛋白(Anxa2)表达的相关性及其与乳腺癌转移的关系。方法:应用荧光定量PCR的方法检测20例配对的乳腺导管内癌、100例乳腺浸润性导管癌、70例癌旁正常组织中MDR1和Anxa2 mRNA的相对表达情况。结果:MDR1 mRNA在乳腺导管内癌中的表达水平明显高于癌旁正常组织(P=0.005),乳腺浸润性导管癌组织中mRNA的表达明显高于癌旁正常组织(P=0.017)和导管内癌(P=0.019 6)。Anxa2 mRNA在乳腺导管内癌中表达与癌旁正常组织相比无显著性差异(P=0.188 9),但是在乳腺浸润性导管癌组织中的表达明显高于导管内癌(P=0.000 8)和癌旁正常组织(P<0.000 1);MDR1和Anxa2 mRNA的表达升高均与患者出现淋巴结转移有关(P<0.01);2种基因在乳腺浸润性导管癌中的表达呈正相关(P<0.000 1)。结论:在肿瘤进展过程中,MDR1和Anxa2 mRNA表达上调与乳腺癌的淋巴结转移有关,二者之间表达具有正相关提示肿瘤细胞的多药耐药的获得和肿瘤侵袭转移之间有着密切联系。

小RNA干扰PDK1抑制乳腺肿瘤细胞侵袭

目的:在肿瘤侵袭转移的细胞和生物学机制中,包含有多种基因和信号传导通路的改变。PDK1是PI3K分子通路上的一个重要分子,为了研究PDK1对乳腺肿瘤细胞侵袭能力的影响,我们以乳腺癌MDA-MB-231细胞为研究模型,用小RNA干扰法特异下调PDK1的表达,研究其侵袭能力的变化,为乳腺癌临床治疗探索新的分子靶点。方法:通过构建PDK1特异的小RNA干扰质粒,利用脂质体介导的方法转染乳腺癌细胞MDA-MB-231,无限稀释法筛选单克隆细胞系,并通过Western Blot的方法检测各组细胞中PDK1蛋白的表达水平,细胞计数的方法观察各组细胞之间的增殖情况,并利用Matrigel Transwell的实验方法研究细胞在体外的侵袭能力差别。结果:MDA-MB-231细胞经小RNA干扰后PDK1蛋白表达水平明显下降,与对照组相比,细胞的生长增殖能力没有显著差异(P>0.05),细胞的侵袭能力显著下降,并且差异有统计学意义(P<0.05)。结论:MDA-MB-231是一种侵袭能力高的乳腺癌细胞系,本研究利用小RNA干扰技术,特异性下调了乳腺癌MDA-MB-231细胞中的PDK1蛋白表达,结果表明,乳腺癌细胞的生长能力与对照组的细胞相比没有明显差别,但是,PDK1蛋白表达水平下降后乳腺癌细胞的侵袭能力明显下降,提示我们PDK1可能与乳腺癌MDA-MB-231细胞的侵袭能力肾密相关。鉴于PDK1处于PDK1-Akt-PKC信号通路的上游,以PDK1为靶标的分子干预可能对乳腺癌细胞的侵袭转移起到有效的作用。

乳腺癌转移相关基因表达调控网络的线性微分方程模型的初步研究

初步构建乳腺癌转移相关基因表达调控网络的线性微分方程模型,并分析模型的可靠性和生物学意义.采用基因芯片技术,分别对30例伴有淋巴结转移的乳腺癌组织及其相应淋巴结转移癌组织进行基因表达谱的比较,选择差异基因通过线性微分数学方法构建表达调控网络模型.差异表达基因共27个,其中Ratio>3的明显上调基因14个,而Ratio<0.33的明显下调基因13个.比较伴有淋巴结转移的乳腺癌组织和其相应淋巴结转移癌组织,分析筛选了27个表达差异基因,应用数学线性微分方程方法初步构建乳腺癌转移相关基因表达调控网络的线性微分方程模型,通过分析模型中重要节点、通路的生物学意义,判定网络的数学特性,初步表明,调控网络的可靠性和乳腺癌转移的形成是与多基因、多通路异常引起的细胞恶性转化相关.

EHD2调节乳腺上皮细胞极性的实验研究

目的:研究EHD2基因对上皮细胞极性的调控作用及其机制,探讨EHD2基因在乳腺癌组织中表达失调的肿瘤分子生物学和细胞生物学意义。方法:以乳腺永生化正常上皮细胞的二维和三维培养为模型,建立EHD2突变体的Doxycycline外源诱导表达体系,应用荧光显微镜和激光共聚焦显微成像技术,观察诱导表达前后细胞在二维培养条件下细胞内β肌动蛋白的微丝组装及聚合情况,以及三维基质胶培养条件下对上皮细胞腺泡形成的影响,综合判断EHD2蛋白在调控上皮细胞极性中的生物学作用。结果:EHD2突变的诱导表达显著影响乳腺上皮细胞的骨架重排,在细胞表面发生密集发散状微刺,细胞内定向排列的β肌动蛋白微丝结构消失。三维培养中,EHD2突变体的引入破坏了原本规则的腺泡型生长,细胞向外侵入基质。结论:EHD2突变可导致乳腺上皮细胞的骨架重排和极性改变,可能是乳腺肿瘤发生的重要机制之一。

乳腺癌凋亡过程中细胞内Ca^(2+)的变化与Caspase3、Caspase8蛋白酶相关作用机制的研究

目的:探讨不同途径给药乳腺癌BCML-TA299移植瘤组织中Ca2+的变化与Caspase3、Caspase8蛋白相互作用的机制。方法:用а-干扰素不同给药途径处理BCML-TA299移植瘤组织。采用流式细胞仪、免疫组化技术分别测定乳腺癌BCML-TA299细胞的DNA含量、细胞周期变化及细胞内钙离子浓度水平变化与Caspase3、Caspase8蛋白表达相关性。结果:细胞形态学观察显示瘤内注射组出现典型的凋亡改变。瘤内注射组胞内Ca2+和Caspase3Caspase8蛋白表达明显高于皮下注射组和预防注射组(P<0.01)。结论:1)Caspase3、Caspase8和胞内Ca2+共同参与了乳腺癌BCML-TA299细胞的凋亡调控过程,可能在乳腺癌发生、发展中起重要作用。2)不同途径给药对肿瘤细胞Caspase3、Caspase8表达和Ca2+浓度可产生不同的影响。

ITSN1-S对胶质瘤细胞凋亡的作用研究

目的:研究ITSN1-S蛋白在调节恶性胶质瘤细胞增殖与凋亡方面的作用,并进一步探讨其相关的分子机制。方法:利用小RNA干扰技术抑制体外培养的人胶质母细胞瘤细胞LN-229中ITSN1-S蛋白的表达,并应用MTT、流式细胞术、TUNEL染色等方法检测胶质母细胞瘤细胞的增殖与凋亡情况,进而应用Western blotting法检测与细胞凋亡密切相关的蛋白(Bad、Bcl-2)的表达情况。结果:与对照组相比,转染组细胞的增殖受到明显抑制(P<0.05),凋亡显著增加(P<0.05),并且促凋亡蛋白Bad的表达增加,抗凋亡蛋白Bcl-2的表达下降。结论:ITSN1-S参与调节胶质母细胞瘤细胞的增殖与凋亡,该作用可能与其调节凋亡相关蛋白的表达有关。

细胞运动抑制剂4-甲基-3-硝基-苯甲酸的基础研究

目的:检测小分子化合物4-甲基-3-硝基-苯甲酸的药物毒性作用、对多种恶性肿瘤细胞运动能力的影响以及在小鼠体内对肿瘤生长的抑制作用。方法:将4-甲基-3-硝基-苯甲酸给药剂量按等比数列排列,从而测定它在小鼠体内的半数致死量;体外采用趋化实验检测4-甲基-3-硝基-苯甲酸对肺癌细胞A549、肝癌细胞SSMC-7721、恶性黑色素瘤细胞LiBr及胃癌细胞MGC-803趋化运动能力的影响;体内实验,将BL6-B16细胞接种到C57小鼠,经灌胃给药后,观察4-甲基-3-硝基-苯甲酸对小鼠移植瘤生长的影响,并以生理盐水作对照,同时以体重变化为指标衡量4-甲基-3-硝基-苯甲酸的毒性作用。结果:4-甲基-3-硝基-苯甲酸在小鼠体内的半数致死量LD50为771.73mg/kg;趋化实验表明4-甲基-3-硝基-苯甲酸对多种肿瘤细胞的细胞运动都有明显的抑制作用,并且最适浓度为2.0μM;4-甲基-3-硝基-苯甲酸抑制小鼠黑色素移植瘤生长,肿瘤体积(P<0.05)和重量(P<0.01)显著低于对照组,4-甲基-3-硝基-苯甲酸对小鼠体重变化无影响。结论:4-甲基-3-硝基苯甲酸有望成为治疗恶性肿瘤的新药。

EHSH1蛋白在中枢神经系统中的功能研究进展

唐氏综合征Down syndrome．DS）又称为先天愚型或21三体综合征，是最常见的胎儿先天性缺陷疾病之一，其主要特征为严重的先天性智力障碍、特殊的面容，并常伴有各种先天性畸形．其出生率约占活产新生儿的1／800～1／700,是人类第21号染色体部分或全部出现三倍体所致。患者到了四五十岁大都出现阿尔茨海默病（Alzheimer disease，AD）的典型病理特征，如B淀粉样肽斑块、神经结节、基底节胆碱样神经元变性和痴呆。