EMT介导口腔鳞癌淋巴结转移及其机制研究

目的:探讨EMT在口腔鳞癌淋巴结转移中的作用及其调控机制。方法:应用免疫组织化学SP法检测CXCR4及EMT相关因子在60例口腔鳞癌中的的表达,应用x^2或Fisher确切概率法分析各指标与口腔鳞癌患者临床病理资料的关系、Spearman相关性分析CXCR4与EMT相关因子的相关性。结果:x^2或Fisher确切概率法检验显示CXCR4、β-catenin、E-cadherin、N-cad-herin、Twist、Snail在淋巴结转组与非淋巴结转移组中表达的差异有统计学意义(P<O.05),且CXCR4与分化程度有关,β-catenin与分化程度及T分期有关,E-cadherin与原发部位及分化程度有关,Twist与分化程度有关(P<0.05)。Spearman分析显示β-catenin的表达与CXCR4呈负相关,相关系数为-0.497;Snail、Twist、N-cadherin的表达与CXCR4呈正相关,相关系数分别为0.256、0.300、0.333(P<0.05)。结论:提示EMT在口腔鳞癌的淋巴结转移过程中发挥重要作用,CXCL12/CXCR4生物学轴可能作用于EMT的某个环节,并调控其发生。

信号传导及转录激活因子调控微RNA-21影响人舌鳞状细胞癌细胞侵袭能力的体外研究

目的探讨信号传导及转录激活因子3（signal transducers and activators of transcription，STAT-3）调控微RNA-21影响人舌鳞状细胞癌侵袭能力的效果和机制。方法实验共分3大组：空白对照组、二甲基亚砜组（DMSO组）、小分子抑制剂组（WP1066组）。采用STAT-3小分子抑制剂WP1066下凋STAT-3表达；甲基噻唑基四唑（methyl thiazolyl tetrazoliam，MTT）法测定Tscca和Tca8113P160舌癌细胞WP1066的半数抑制浓度（inhibitory concentration，IC50）；蛋白质印迹法检测WP1066处理后舌癌细胞STAT-3及pSTAT-3表达；实时定量PCR法检测微RNA-21表达水平；用Matrigel基质生长实验和Transwell体外侵袭实验检测肿瘤细胞生长形成球形克隆、侵袭能力；蛋白质印迹法检测肿瘤细胞侵袭相关蛋白表达。荧光素酶报告基因实验验证STAT-3与微RNA-21调控关系。结果MTT法结果：Tscca、Tca8113P160细胞WP1066的IC50分别为3．1和3．5μmol／L；WP1066组STAT-3及pSTAT-3表达水平低于空白对照组；WP1066组微RNA-21表达水平低于空白对照组。WP1066组细胞生长形成球形克隆能力减弱，直径减小（Tscca：F=15．751，P=0．004；Tca8113P160：F=12．964，P=0．007）；通过Transwell小室聚碳酸酯膜的细胞数少于空白对照组（Tscca：F=1688．926，P=0．000；Tca8113P160：F=327．528，P=0．000）；基质金属蛋白酶2／9蛋白表达水平下调；金属蛋白酶抑制剂蛋白表达水平上调。荧光素酶报告基因实验证明微RNA-21是STAT-3的调控靶点。结论抑制舌癌细胞中STAT-3活性可以下调微RNA-21表达并降低舌癌细胞的侵袭能力；为进一步探究STAT-3参与调控舌癌细胞侵袭转移能力的分子机制提供实验依据。