原代肿瘤细胞三维立体培养药物敏感性检测在乳腺癌个体性化疗中的应用研究

背景与目的研究乳腺癌患者化疗药物敏感性差异,探讨原代肿瘤细胞三维立体培养法化疗药物敏感性检测（CD-DST）在乳腺癌个体性化疗中的意义。 方法采用CD-DST法检测乳腺癌原发病灶肿瘤组织120例（粗针吸活检10例，手术110例）对5种乳腺癌常用化疗药物（紫杉醇、表阿霉素、5-氟尿嘧啶、顺铂、诺维本）的敏感性，观察检测成功率、患者问药物敏感性的个体差异及检测结果与临床应用效果的吻合度。

蛋白质组学技术及其在肿瘤研究中的应用

蛋白质组学是近年来生命科学领域里继基因组学之后的全球研究热点 ,目前它在肿瘤学基础与临床应用研究中正蓬勃开展。本文综述了蛋白质组学的经典与新兴技术手段以及它在寻找肿瘤特异标志物、肿瘤早期诊断与分类判别。

2008-2016年天津市河西区恶性肿瘤发病与死亡趋势分析

目的:分析天津市河西区恶性肿瘤发病与死亡的流行趋势,为肿瘤防治提供科学依据。方法:分析2008-2016年河西区户籍居民的肿瘤随访登记数据,计算发病率、死亡率、中国人口标化率、世界人口标化率、0~74岁累积率,并分析其时间趋势。结果:2008-2016年河西区恶性肿瘤粗发病率为370.17/10万,中标发病率为190.07/10万,世标发病率为184.09/10万,累积发病率(0~74岁)为21.13%。恶性肿瘤粗死亡率为211.80/10万,中标死亡率为92.50/10万,世标死亡率为90.98/10万,累积死亡率(0~74岁)为10.32%。恶性肿瘤发病顺位第1位的是肺癌,发病率为91.30/10万,其次为乳腺癌、结直肠癌、肝癌和胃癌,前10位恶性肿瘤占全部恶性肿瘤发病的76.65%;恶性肿瘤死亡率第1位的是肺癌,死亡率为75.85/10万,其次为肝癌、结直肠癌、胃癌和胰腺癌,前10位恶性肿瘤占全部恶性肿瘤死亡的81.34%。2008-2016年期间河西区恶性肿瘤发病率呈平稳上升趋势,而恶性肿瘤标化死亡率呈下降趋势。结论:2008-2016年天津市河西区恶性肿瘤的发病率呈上升趋势,肿瘤负担依然严峻。

EHSH1蛋白在中枢神经系统中的功能研究进展

唐氏综合征Down syndrome．DS）又称为先天愚型或21三体综合征，是最常见的胎儿先天性缺陷疾病之一，其主要特征为严重的先天性智力障碍、特殊的面容，并常伴有各种先天性畸形．其出生率约占活产新生儿的1／800～1／700,是人类第21号染色体部分或全部出现三倍体所致。患者到了四五十岁大都出现阿尔茨海默病（Alzheimer disease，AD）的典型病理特征，如B淀粉样肽斑块、神经结节、基底节胆碱样神经元变性和痴呆。

GM-CSF基因修饰的肿瘤疫苗

肿瘤细胞瘤苗是最早的瘤苗形式,至今仍是人们研究的热点。近些年随着基因转染技术的发展,人们在增强用于疫苗的肿瘤细胞免疫原性方面做出了不懈的努力,其中采用了转基因的方式提高肿瘤疫苗的免疫效果。在众多转染细胞因子的瘤苗中,转染粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)基因的肿瘤疫苗效果相对显著。GM-CSF是一种强烈刺激巨噬细胞和树突细胞等抗原呈递细胞的增殖、分化、活化、成熟和趋化的细胞因子。GM-CSF基因修饰的肿瘤细胞用放射线灭活后体内注射,可增加局部炎性反应,大量多核细胞、巨噬细胞、树突状细胞(DC)浸润,促进了肿瘤抗原的呈递,能够诱导强烈的抗肿瘤免疫反应。GM-CSF转导疫苗为GVAX系列肿瘤疫苗,对GVAX肿瘤疫苗进行了大量的I/Ⅱ期临床研究,其中包括黑色素瘤、前列腺癌、非小细胞肺癌(NSCLC)和肾癌。这些临床试验均证实这种方法是十分安全的,并能有效刺激机体产生抗肿瘤免疫反应。

非霍奇金淋巴瘤EB病毒感染和HLA-DQ抗原与p53蛋白表达关系研究

目的 :探讨非霍奇金淋巴瘤 (non Hodgkin’slymphoma ,NHL)EB病毒感染与HLA DQ抗原表达和p5 3蛋白表达阳性率及其相关性。方法 :应用免疫组化SP法检测 160例不同病理类型的NHL石蜡包埋组织的LMP 1阳性率和HLA DQ抗原表达与p5 3蛋白表达率。 结果 :B细胞NHL (B NHL)、T细胞NHL(T NHL)的EB病毒检出率分别为 2 8 9% ( 3 9/13 5 )和 16 0 % ( 4 /2 5 )。HLA DQ抗原表达的阳性率 ,B NHL和T NHL分别为 2 5 2 % ( 4 /13 5 )和 2 8 0 %( 7/2 5 )。EB病毒感染程度与HLA DQ抗原表达阳性程度呈正相关。p5 3蛋白表达阳性率 ,B NHL和T NHL分别为 48 9% ( 66/13 5 )和 3 2 0 % ( 8/2 5 )。结论 :EB病毒潜伏感染在NHL发病中起一定作用。EB病毒、HLA DQ之间可能存在内在联系并相互影响 ,HLA DQ抗原的表达可能会增强EB病毒进入机体的易感性。而NHL中p5

2008年至2016年天津市河西区结直肠癌发病与死亡趋势

目的:对天津市河西区结直肠癌发病与死亡的流行趋势进行分析。方法:收集、整理2008年至2016年天津市河西区户籍居民的肿瘤登记随访数据,对结直肠癌的发病率、死亡率、中国人口标化率(中标率)、世界人口标化率(世标率)、0~74岁累积率和时间趋势等指标进行计算并分析。结果:2008年至2016年天津市河西区结直肠癌粗发病率为36.45/10万,中标率为16.80/10万,世标率为16.52/10万,累积发病率(0~74岁)为2.01%。结直肠癌粗死亡率为18.59/10万,中标率为7.64/10万,世标率为7.50/10万,累积死亡率(0~74岁)为0.83%。2008年至2016年期间天津市河西区结直肠癌粗发病率和粗死亡率均呈上升趋势,年均上升分别为2.28%和4.44%。结肠癌上升幅度高于直肠癌,男性上升高于女性。经年龄调整后,男性结直肠癌发病率和死亡率均呈上升趋势,女性均呈下降趋势。结论:天津市河西区结直肠癌的发病率和死亡率均处于较高水平,且呈长期上升趋势。

DC+CIK联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌的临床疗效评价

目的:评价DC+CIK联合常规化疗治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的临床疗效。方法:选择70例晚期NSCLC患者进行研究,采用DC+CIK与常规化疗间隔进行的方案(生物治疗联合化疗组),对其进行生存分析;同时,对生物治疗联合化疗组、单纯常规化疗组同期配对NSCLC患者各61例,比较生物治疗联合化疗组与常规化疗对照组患者的生存率。结果:生物治疗联合常规化疗组患者预期1、2、3年生存率分别为59.6%、29.6%、21.80。生物治疗联合化疗组和单纯常规化疗组比较1年生存率分别为57.2%和37.3%,2年生存率分别为27.0%和10.1%(P<0.05)。结论:临床研究证实了DC+CIK联合常规化疗能够延长晚期NSCLC患者的生存期,提高患者的生存率和生活质量。

胆管癌患者外周血免疫抑制细胞的检测及其临床意义

目的研究胆管癌患者外周血中CD14+CD11b+HLA-DR-髓源性抑制细胞(MDSC)的表达及其与临床分期和术后病理检测的关系,并对其形成机制和功能进行初步研究。方法采用流式细胞术检测了25例胆管癌、10例胰腺癌、9例胆囊癌患者和25例同龄的健康对照者外周血中CD14+CD11b+HLA-DR-髓源性抑制细胞的比例并进行统计学分析。结果健康成人对照组外周血中CD14+CD11b+HLA-DR-MDSC的比例为(0.65±0.25)%,胆管癌组患者比例显著增高为(2.14±1.38)%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。同时,在胰腺癌组和胆囊癌组患者中MDSC的表达水平亦升高。MDSC的表达水平与胆管癌的临床分期相关,其中Ⅳ期胆管癌患者的MDSC水平最高。胆管癌患者术后的MDSC水平较术前显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。但是,MDSC的表达水平与胆管癌患者术后的病理分期无关。两种胆管癌细胞系(QBC939、TFK-1)体外均能诱导PBMC向MDSC的转化,且随着肿瘤负荷的增加而增加。和健康对照组比,胆管癌患者外周血中发挥抑制功能的精氨酸酶活性增加,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论胆管癌患者外周血中CD14+CD11b+HLA-DR-MDSC的比例显著升高,且与肿瘤的临床分期呈正相关,可作为胆管癌患者早期诊断的重要标记物。

重组人白介素18在毕赤酵母中的高效分泌表达

目的:构建人白介素18(hIL-18)真核表达载体,在毕赤酵母中高效分泌表达hIL-18。方法:通过PCR法扩增得到hIL-18基因,构建其真核表达载体pPICZaC/hIL-18,电转化毕氏酵母X-33,PCR、SDS-PAGE、Western blot等方法筛选获得高效表达rhIL-18的工程菌株,疏水层析和阴离子交换层析纯化表达产物,并初步测定其生物学活性。结果:rhIL-18经甲醇诱导后其表达产量约为202mg/L。Western blot检测了rhIL-18的特异性结合活性;rhIl-18纯化后纯度达95%左右,并证明rhIL-18能够协同IL-2诱导PBMC分泌IFN-γ。结论:构建了重组hIL-18的基因工程菌,并在毕赤酵母中实现了高效分泌表达,为进一步研究其活性和功能奠定了基础。

NucIeophosmin/B23对结肠癌侵袭能力的影响

目的:探讨核仁磷酸蛋白(Nucleophosmin/B23)在人结肠癌组织中的表达及对人结肠癌细胞侵袭能力的影响。方法:选取2000年6月至2005年10月就诊于天津医科大学附属肿瘤医院结肠癌患者31例,并收集其肿瘤组织、对应的癌旁组织和转移淋巴结组织,采用免疫组织化学染色方法检测323的表达情况。采用Western blotting技术检测不同结肠癌细胞系中B23的表达情况,利用小干扰RNA技术下调B23在结肠癌细胞中的表达,利用Transwell侵袭实验观察B23表达下降对结肠癌细胞侵袭能力的影响。结果:免疫组织化学染色显示B23在结肠癌组织的表达高于结肠癌旁组织表达(P=0.001 6),在转移淋巴结中的表达高于结肠癌旁组织(P=0.000 7),差异有统计学意义。Western blotting证实在转染B23特异性小干扰RNA的结肠癌细胞HCT116中B23的表达明显下降,同时明显抑制结肠癌细胞的侵袭能力。结论:B23在结肠癌和转移淋巴结中高表达,且能影响结肠癌细胞的侵袭能力。提示B23可能在结肠癌的发生、进展和浸润转移中起调节作用。

重组人白介素18的发酵、纯化及功能鉴定

目的:利用构建的重组菌株Pichia pastoris X-33/hIL-18,在3.7L发酵罐中表达重组人白介素18(hIL-18),探讨其大规模发酵及纯化工艺。方法:复苏工程菌X-33/hIL-18于BMGY培养基,在其A600达到6左右时转入发酵罐进行高密度发酵。发酵液经过滤浓缩柱、疏水层析和阴离子交换层析分离纯化。结果:工程菌在3.7L发酵罐采用甲醇诱导补料批式发酵,在pH6.0,溶氧值(DO)20%～30%,温度28℃,甲醇诱导48h重组hIL-18的表达产量为202mg/L,发酵液经纯化后纯度可达97%以上,并初步证明重组hIL-18能协同IL-2诱导PBMCs分泌IFN-γ和协同IL-2增强NK细胞的杀伤活性。结论:利用Pichia pastoris分泌型表达系统和建立的分离纯化方法,能获得大量较高纯度的重组hIL-18,为进一步研究其活性和功能奠定基础。

CD146(Mel-CAM)的生理学及病理学意义

重点介绍CD14 6的结构、功能及表达的调节 ,阐述其在发育人群、成年人组织中及肿瘤组织中的表达及进展。探讨CD14

重组牛胰蛋白酶抑制剂对四氯化碳致大鼠慢性肝损伤的保护作用

目的观察重组牛胰蛋白酶抑制剂(rBPTI)对大鼠慢性肝损伤的保护作用。方法大鼠98只,随机分成7组,分别为正常对照组、模型组、rBPTI3个剂量组(20,40和80MU.kg-1)、抑肽酶组(80MU.kg-1)和促肝细胞生长素组(100mg.kg-1)。除正常对照组外,其余各组皮下注射四氯化碳制备慢性肝损伤模型。8周后每天ip给药,给药4周后测定血清谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)活性、白蛋白(Alb)含量、白蛋白/球蛋白(A/G)比值、唾液酸(SA)含量及肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量,并进行组织病理学检测。结果与正常对照组比较,模型组大鼠血清GPT和GOT活性、SA含量及肝组织Hyp含量明显升高,血清Alb含量和A/G比值明显降低。与模型组比较,rBPTI各剂量组大鼠血清GPT和GOT活性、SA含量及肝组织Hyp含量降低,血清Alb含量和A/G比值明显增高。肝组织病理观察显示,rBPTI明显减轻由四氯化碳所致肝细胞脂肪变性及纤维组织增生等病理改变。结论rBPTI对四氯化碳诱导的大鼠慢性肝损伤具有保护作用和抗纤维化作用,在所观察的剂量范围内作用效果与抑肽酶相当。

小RNA干扰Akt2对U87恶性胶质瘤细胞迁移和侵袭能力的影响

目的探讨转染Akt2-siRNA表达载体阻断Akt2信号转导通路对U87恶性胶质瘤细胞运动、迁移和侵袭能力的影响。方法利用siRNA技术,稳定转染恶性胶质瘤细胞系U87;用RT-PCR和免疫印迹技术分别检测Akt2的mRNA和蛋白的表达;划痕实验和体外侵袭实验分别检测恶性胶质瘤细胞的运动和侵袭能力;用细胞黏附实验检测细胞的黏附能力,纤维型肌动蛋白(F-actin)聚合实验检测F-actin的聚合能力;免疫印迹技术检测LIMK的磷酸化,证明Akt2影响F-actin聚合的机制。结果稳定转染siAkt2载体后,Akt2的mRNA和蛋白水平均下降;细胞向划痕移动的速度比对照组慢(P<0.05);侵袭并穿透基质胶(Matrigel)的细胞数量比对照组少(P<0.01);细胞内F-actin聚合比对照组减少(P<0.05);黏附实验结果显示,黏附5min、15min后,低表达Akt2的细胞比对照组的黏附数量均减少(P<0.05)。结论Akt2基因沉默可以通过降低F-actin聚合、降低黏附于细胞外基质的能力而降低恶性胶质瘤细胞的运动和侵袭能力。

Girdin蛋白与肿瘤转移相关性的研究进展

目的:总结国内外对Girdin的结构及功能方面的研究进展。方法:应用Medline及维普数据库,以"Girdin、actincytoskeleton和细胞迁移"等为关键词,检索1996-01-2009-09的相关文献,共检索到英文文献786条,中文文献30条。纳入标准:1)Girdin的结构及相关功能的研究。2)细胞迁移所涉及的骨架结构的改变机制的研究。3)细胞迁移和侵袭相关内容的研究。根据纳入标准,精选35篇文献,最后纳入分析25篇文献。结果:Girdin(又被命名为APE、GIV、HkRP1)是一种新发现的肌动蛋白结合蛋白,它能与Akt相互作用,在调节肌动蛋白的结构及促进肿瘤细胞的运动等方面具有重要作用,但其详细机制还不明确。结论:Girdin作为抗肿瘤转移的新靶点,为指导肿瘤的临床治疗提供新的思路。