基于母体血浆单体型分析无创产前检测脊髓性肌肉萎缩症的研究

目的:探索无创产前检测(NIPT)脊髓性肌肉萎缩症(SMA)在临床应用的可行性。方法:招募生育过SMA先证者且再次妊娠的24个家系,其家系中夫妻双方及先证者致病突变经多重连接探针扩增技术(MLPA)测定。采集家系外周血及孕11周以后的孕妇血浆,通过目标序列捕获及高通量测序技术,首先对夫妻双方及先证者外周血DNA样品进行目标区域捕获测序,获得与致病位点连锁的亲本单体型信息,再结合血浆测序数据中提供的单核苷酸多态性位点的分析结果,构建隐马尔可夫模型,推断胎儿单体型,从而得到胎儿的基因型。同时利用有创产前诊断MLPA检测验证其准确性。本次研究主要针对SMN1基因第7、8号外显子的检测。结果:24个家系通过NIPT检测检出患胎5例,携带者7例,余12例正常;MLPA检测结果为5例患胎,8例携带者,11例正常。患胎均为SMN1基因第7、8号外显子纯合缺失。NIPT与MLPA检测结果一致率为95.83%(23/24),两种方法诊断结果差异无统计学意义(P=0.317)。结论:基于母体血浆目标区域捕获测序、单体型分析NIPT胎儿SMA风险的方法准确、安全,应用于有先证者遗传信息的SMA NIPT有一定可行性。

基于单体型的杜氏肌营养不良无创产前检测研究

目的:探讨利用先证者辅助单体型分析方法(PAHP)对杜氏肌营养不良(DMD)进行无创产前检测(NIPT)的可行性。方法:招募生育过DMD先证者并再次妊娠的家系17例。对孕妇、孕妇丈夫与先证者外周血基因组DNA(g DNA)样本进行目标序列捕获测序,获得孕妇与致病位点连锁的单体型信息。然后在夫妻双方单体型的辅助下,通过对血浆数据中各个信息可供单核苷酸多态性(SNP)位点分析及统计,推断在DMD基因区域胎儿获得的母源单体型是否与先证者一致。携带与先证者相同单体型的男胎为患胎,女胎为携带者,其余为正常胎。将NIPT结果与DMD基因诊断金标准进行比较,验证其准确性。结果:NIPT结果提示17个家系中9例为男性胎儿,8例为女性胎儿;患胎3例,携带者4例,正常胎10例。该结果与胎儿的DMD基因诊断结果一致,无假阳性与假阴性结果。结论:基于先证者辅助单体型分析方法的NIPT取材方便,能避免宫内介入性操作,同时结果准确,应用于DMD的产前检测具有一定的可行性。

低深度全基因组测序技术分析107例胎儿圆锥动脉干畸形病例的染色体异常

目的探讨圆锥动脉干畸形胎儿的染色体异常。方法2013年1月至2017年2月，107例孕妇（均为单胎妊娠）在首都医科大学附属北京安贞医院诊断为胎儿圆锥动脉干畸形，终止妊娠后获得胎儿脐带组织标本，应用低深度全基因组测序方法检测染色体非整倍体及拷贝数变异。分析染色体异常种类，统计学分析采用x^2检验。结果共检出染色体异常22例（21％，22／107），主动脉弓离断胎儿染色体异常检出率最高（2／2），其次为法洛四联症、肺动脉闭锁／狭窄伴室间隔缺损胎儿[28％（12／43）]；主-肺动脉间隔缺损胎儿染色体异常检出率最低（0／2）；各类型CTD胎儿染色体异常检出率差异有统计学意义（x^2=12．744，P=0．026）。22例染色体异常胎儿中染色体非整倍体异常7例（13-三体综合征3例，18-三体综合征2例，21-三体综合征1例，45，X1例），致病性拷贝数变异15例[22q11．2微缺失综合征11例，17p12p11．2微缺失（Smith—Magenis综合征）2例，8p23．3p21．3微重复1例，2p23．1p25．2微重复1例]，其中12例为新生性变异，1例为父源传递，另外2例由于父母拒绝染色体检查不能明确拷贝数变异来源。结论胎儿圆锥动脉干畸形易合并非整倍体异常及染色体微缺失／重复异常，不同类型CTD胎儿合并染色体异常概率不同，染色体异常种类以染色体微缺失／重复多见，且多为新生性变异。故产前超声诊断CTD的胎儿建议完善染色体检查。

二代测序诊断幼儿单纯疱疹病毒1型脑炎一例

患儿女,8月龄.因＂发热12 d,间断抽搐8 d,睡眠增多6 d＂于2017年5月在首都儿科研究所附属儿童医院就诊.入院12 d前出现发热,热峰2次/d,最高体温39.6℃,伴有轻微咳嗽,无抽搐,无呕吐、腹泻,无嗜睡.就诊于当地医院,血常规提示白细胞大致正常,淋巴细胞比例为主,予中成药口服4 d,热峰温度较前增高,每日热峰4~6次/d.入院前8d高热时抽搐1次,表现为呼之不应,双眼凝视,右下肢抖动,无牙关紧闭、口周发绀及大小便失禁等,数秒钟自行缓解,1h后再次出现抽搐1次,表现同前,于当地医院镇静后1 min缓解,复查血常规提示白细胞升高,中性为主,予＂头孢曲松＂静脉滴注2 d,发热情况无好转.入院6 d前出现嗜睡,奶摄入量较少,偶有烦躁,完善腰椎穿刺检查提示脑脊液常规：有核细胞0;脑脊液蛋白570 mg/L,糖和氯化物正常范围;予人免疫球蛋白5 g/d共2 d,患儿嗜睡同前,间断烦躁,仍有间断抽搐,发作形式同前,伴有间断肢体抖动.