丙泊酚后处理对离体培养胎鼠海马神经元凋亡及cPKCγ/GAP-43信号通路的影响

目的探究丙泊酚后处理对离体胎鼠海马神经元凋亡及经典型蛋白激酶Cγ(cPKCγ)/生长相关蛋白-43(GAP-43)信号通路的影响。方法取培养7 d的胎鼠海马神经元,随机分为对照组、缺氧组、丙泊酚组。缺氧组和丙泊酚组于90%NO_(2)+10%CO_(2)的无氧培养箱中缺氧处理30 min。丙泊酚组在缺氧处理后立即加入终浓度为50μmol/L的丙泊酚新培养基,对照组和缺氧组换等体积的新培养基孵育2 h。采用MTT法检测神经元存活率,流式细胞仪检测神经元凋亡率,比色法检测神经元超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,实时荧光定量聚合酶链反应、Western blotting检测cPKCγ、GAP-43 mRNA和蛋白的表达。结果免疫组织化学染色结果显示,培养7 d的海马神经元胞质饱满,状态良好。与对照组比较,缺氧组和丙泊酚组海马神经元存活率、SOD活性降低(P<0.05),凋亡率升高(P<0.05),MDA含量增加(P<0.05);与缺氧组相比,丙泊酚组海马神经元存活率、SOD活性升高(P<0.05),凋亡率降低(P<0.05),MDA含量减少(P<0.05)。与对照组比较,缺氧组和丙泊酚组海马神经元cPKCγ、GAP-43 mRNA和蛋白相对表达量降低(P<0.05);与缺氧组比较,丙泊酚组海马神经元cPKCγ、GAP-43 mRNA和蛋白相对表达量升高(P<0.05)。结论缺氧的胎鼠海马神经元经丙泊酚后处理后可以增加神经元抗氧化应激水平,降低神经元凋亡率,其保护作用可能与激活cPKCγ/GAP-43信号通路有关。