中药工业智能制造转型模式及监管问题探讨

中药制药工业质量控制水平的提升需要以科技创新为引领,以先进制药工程技术为支撑。智能制造融合了先进制造技术与信息技术,已经成为提高制造业质量与效益的先进生产方式。本研究聚焦中药工业实施智能制造重大战略工程,根据中药产品质量及其制造流程的特点,结合中药制药工业面临的管控问题以及智能制造技术特征,提出中药产业发展智能制造的转型方向,核心包括由基于经验的控制向以数据为驱动力的控制转型、产品检验向过程管控转型、分散向集成转型,以及药品制造向药品全生命周期服务转型等领域的突破。总结近年来中药标杆性企业在智能制造技术研究方面取得的成果以及产业转化进展,讨论中药产业在智能制造转型过程中面临的监管问题,以期为中药工业实施智能制造项目的系统架构规划与技术路线设计提供参考。

HPMEC-ELSD法检测注射用益气复脉(冻干)大分子物质

目的:建立一种利用HPMEC-ELSD检测注射用益气复脉(冻干)(YQFM)中高分子物质的方法。方法:采用UltrahydrogelTMlinear凝胶色谱柱,以0.02%甲酸水溶液为流动相,流量为0.6 ml/min,柱温为35℃,进样体积为10μl,ELSD(不分离模式,漂移管温度为105℃,压缩空气流量为2.5 L/min,增益值为1)建立大分子物质检测方法,并对10批YQFM进行大分子物质的检测。结果:该方法的专属性强、线性(Y=-0.5236 X+11.582,r=1.0000,线性范围为1027.5~13968 Da)、精密度(A的RSD≤0.7%、t_(R)的RSD≤0.1%)、重复性(A的RSD≤1.1%、t_(R)的RSD≤0.1%)、稳定性(48 h t_(R)的RSD≤0.1%)和方法耐用性良好。10批YQFM中均未检出大分子物质(分子量≥10000 Da)。结论:该方法简便、快捷,可作为YQFM中大分子物质的检测方法,亦可为其他品种的中药注射剂大分子物质检测提供借鉴。

注射用丹参多酚酸对缺氧所致SH-SY5Y细胞损伤的保护作用及机制研究

目的探讨注射用丹参多酚酸(SAFI)对氧糖剥夺损伤人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y的保护作用及其机制。方法采用氧糖剥夺(OGD)方法构建体外SH-SY5Y细胞缺氧损伤模型,通过CCK-8法检测缺氧6、8、10 h后SH-SY5Y细胞的存活率,评估细胞损伤程度;采用5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)染色比较各组细胞的增殖能力;采用Western blot法和免疫荧光标记法检测丝裂原活化蛋白激酶的激酶(MEK1/2)、细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)表达水平的变化。结果SH-SY5Y细胞缺氧6、8、10 h后,细胞存活率分别为(64.76±0.10)%、(62.94±6.06)%、(60.90±1.33)%;与模型组相比给予SAFI后细胞生存率明显升高。EdU染色结果显示,与正常组比较,模型组SH-SY5Y细胞中EdU阳性细胞数减少(P<0.001);与模型组比较,给予SAFI后SH-SY5Y细胞中EdU阳性细胞数明显增加(P<0.001)。Western blot和免疫荧光实验结果显示,与模型组相比,给予SAFI后SH-SY5Y细胞内MEK1/2和ERK1/2蛋白磷酸化水平明显升高(P<0.01)。结论注射用丹参多酚酸对人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y缺氧损伤具有保护作用,其机制可能与激活Ras/Raf/MEK/ERK信号通路,调节MEK1/2和ERK1/2蛋白磷酸化水平相关。

注射用丹参多酚酸与氯化钠注射液配伍稳定性研究

目的:考查不同温度和光照条件下,注射用丹参多酚酸(SAFI)与氯化钠注射液(玻璃瓶和PP瓶)的配伍稳定性,为临床合理用药提供参考。方法:模拟临床应用,按说明书要求以氯化钠注射液(玻璃瓶和PP瓶)为溶媒与SAFI进行配伍,考查配伍溶液在室温、高温、日光、避光条件下,6 h内溶液颜色、性状、pH值、不溶性微粒、丹酚酸B含量、丹参多酚酸含量、指纹图谱、特征峰峰面积百分比和非共有峰峰面积百分比的变化。结果:配伍溶液(玻璃瓶和PP瓶)在6 h内,室温、高温、日光、避光条件下,其颜色及外观、pH值变化不明显,不溶性微粒均符合《中国药典》2020年版规定;丹酚酸B和丹参多酚酸含量变化相对标准偏差RSD不超过1.6%和0.9%;且各时间点指纹图谱与0 h相比,相似度均为1.000;特征峰峰面积百分比RSD不超过0.5%。结论:SAFI与氯化钠注射液(玻璃瓶和PP瓶包装)配伍后6 h内,在室温、高温、日光和避光条件下,溶液均较稳定。

正交试验法优选红参加工工艺

目的优化红参加工工艺。方法采用正交设计试验,对红参蒸制时间、烘干温度、烘干时间进行条件优选,考察指标为人参总皂苷以及活性皂苷Rg3。结果红参最优加工工艺为A2B3C1,即蒸制4 h,70℃下烘8 h。结论 3批验证试验结果表明该工艺稳定可行。

HPLC-ELSD法测定不同产地麦冬及山麦冬中的果糖

目的建立高效液相色谱-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)法测定不同产地麦冬Ophiopogonis Radix及山麦冬Liriopes Radix中果糖的含有量。方法分析采用Alltech PrevailTMCarbohydrate ES色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);乙腈-水为流动相,梯度洗脱;柱温30℃;体积流量0.8 m L/min。结果四川、浙江产麦冬,以及湖北、山东、福建产山麦冬中游离果糖的平均含有量分别为85.2、37.6、41.4、11.8、168.1 mg/g,而这些产地麦冬多糖水解液中果糖的含有量分别为121.0、139.2、153.1、179.4、136.8 mg/g。结论游离果糖的含有量以福建产山麦冬最高,而麦冬多糖水解液中果糖的含有量以山东产山麦冬最高。

注射用益气复脉(冻干)与果糖注射液的配伍稳定性考察

[目的]考察注射用益气复脉(冻干)在室温(25±1)℃下与果糖注射液配伍的稳定性。[方法]模拟临床用药浓度,将注射用益气复脉(冻干)8瓶,分别用注射用水溶解后转注入5%果糖注射液250 mL中,混合均匀后,在室温(25±1)℃下考察6 h内配伍液的色泽、澄清度、pH值、不溶性微粒、紫外全波长扫描图谱、总皂苷变化情况,并采用高效液相色谱法测定皂苷及五味子醇甲的含量,同时考察皂苷及木脂素的指纹图谱变化情况。[结果]在室温(25±1)℃下,0～6 h配伍液的色泽、性状、pH值、不溶性微粒、紫外全波长扫描图谱、皂苷、五味子醇甲含量、皂苷及木脂素指纹图谱均无明显变化。[结论]注射用益气复脉(冻干)与果糖注射液配伍,在室温(25±1)℃下6 h内配伍稳定。

注射用益气复脉(冻干)与木糖醇注射液的配伍稳定性研究

目的考察注射用益气复脉(冻干)在室温条件下与木糖醇注射液配伍的稳定性。方法模拟临床用药浓度和使用方法,将注射用益气复脉(冻干)8瓶,分别用木糖醇注射液5 ml溶解后转注入木糖醇注射液250 ml中,混合均匀后,在室温条件下考察6 h内配伍溶液的色泽、澄清度、pH值、不溶性微粒、紫外全波长扫描图谱、总皂苷变化情况,并采用高效液相色谱法测定皂苷及五味子醇甲的含量,同时考察皂苷及木脂素的指纹图谱变化情况。结果在室温条件下,配伍溶液的色泽、性状、pH值、不溶性微粒、紫外全波长扫描图谱、皂苷、五味子醇甲含量、皂苷及木脂素指纹图谱在0～6 h内均无明显变化。结论注射用益气复脉(冻干)与木糖醇注射液配伍,在室温条件下6h内配伍稳定。

色差计法测定注射用丹参多酚酸溶液的颜色

目的:利用色差计建立注射用丹参多酚酸溶液颜色测定的方法。方法:采用《中华人民共和国药典》2010版附录XIA"溶液颜色检查法"第三法(色差计法)测定溶液的颜色。结果:该方法精密度和重复性良好,3 h内色差值△E*的RSD值为1.28%。测定的6批样品均小于黄色3号标准比色液(Y3)。结论:相比目视法,该方法将溶液颜色进行了量化检测、数据直观准确,可作为注射用丹参多酚酸溶液颜色测定的方法。通过色差法对中药注射剂质量进行控制将成为一种趋势,对提高中药注射剂安全性具有重要意义。

HPLC-峰面积归一法测定注射用益气复脉(冻干)中总木脂素的含量

目的:建立注射用益气复脉(冻干)总木脂素的含量测定方法。方法:采用Phenomenex luna C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-水梯度洗脱;柱温30℃;检测波长218nm;进样量10μL;流速1mL/min。结果:五味子醇甲进样量在0.096～0.578μg范围内线性关系良好,其回归方程为:Y=404589x-9426.4,r=0.9998,精密度RSD1.88%,稳定性RSD2.29%,重复性试验RSD1.49%,平均回收率为99.84%、RSD 2.08%。结论:实验结果表明该方法简便,灵敏,专属性强,重复性好,可作为注射用益气复脉(冻干)的质量控制方法。

不同材质及不同截留分子量超滤膜对人参皂苷类成分的影响

目的考察不同材质及不同截留分子量超滤膜对人参皂苷类成分的影响。方法以人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg2、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3、人参皂苷Rd、人参皂苷Rg3为检测指标,通过HPLC观察其超滤前后所得成分变化。考察不同材质及孔径的超滤膜对有效成分透过率的影响。结果随着膜截留分子量的变大,各人参皂苷类成分的透过率有所提高,且纤维素材质的超滤膜对原人参二醇型皂苷人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd、人参皂苷Rg3的透过率明显大于相同截留分子量的聚醚砜膜材质的超滤膜。结论纤维素材质的超滤膜对人参皂苷的透过率要优于相同截留分子量聚醚砜材质的超滤膜。

川麦冬药材中黄酮类成分HPLC指纹图谱的研究

目的:建立川麦冬药材中黄酮类成分的HPLC指纹图谱分析方法,为整体控制和评价川麦冬药材的质量提供依据。方法:采用Waters Symmetry C18柱(4.6mm×250mm,5μm),乙腈-0.05%磷酸梯度洗脱,流速为1.0mL.min-1,检测波长296nm,柱温30℃。以甲基麦冬黄烷酮A为参照物,对10批市售川麦冬药材进行指纹图谱的分析。结果:建立了川麦冬药材黄酮类成分的HPLC指纹图谱共有模式,标定了13个共有峰,10批川麦冬药材的相似度在0.960～0.995。结论:该指纹图谱方法简便、准确、重复性好,可专属性地研究川麦冬药材的指纹图谱,为有效地控制该药材的内在质量提供了科学依据。

HPGPC-ELSD法检测注射用益气复脉(冻干)中糖苷类大分子物质

目的建立HPGPC-ELSD法检测注射用益气复脉(冻干)中糖苷类大分子物质(杂质)的限量方法。方法采用ELSD为检测器,Ultrahydrogel 250色谱柱(7.8 mm×300 mm),以甲酸-水(1∶5 000)为流动相,建立大分子物质(杂质)的液相测定方法,并对10批注射用益气复脉(冻干)进行了糖苷类大分子物质的检测。结果 10批注射用益气复脉(冻干)中均无糖苷类大分子物质。结论此方法简便、快捷和灵敏,可用于注射用益气复脉(冻干)中糖苷类大分子物质的检查,具有一定的实用意义。

电位滴定法测定五味子提取物中总有机酸的含量

目的:建立电位滴定方法测定五味子提取物中总有机酸含量。方法:五味子提取物用水溶解,经001×1阳离子交换树脂将盐还原为酸。以琥珀酸为对照品,用电位滴定法测定五味子提取物中总有机酸的含量。结果:以琥珀酸计,五味子提取物中总有机酸测定的精密度RSD 0.81%,稳定性RSD 0.86%,重复性试验RSD 1.67%,平均回收率为101.77%、RSD 2.36%。结论:本研究所建立的电位滴定方法适合于五味子提取物中总有机酸的含量测定。

动态浊度法测定益气复脉(冻干)中细菌内毒素的含量

目的建立益气复脉（冻干）细菌内毒素定量分析方法。方法按照2005年版《中华人民共和国药典》二部收载的细菌内毒素检查法的要求,将益气复脉（冻干）作倍比稀释,采用动态浊度法通过干扰试验和验证试验考察其最佳稀释倍数,对益气复脉（冻干）中细菌内毒素进行检测。结果益气复脉（冻干）8倍稀释后对细菌内毒素检查无干扰,平均回收率均在50%-200%。结论该方法可以进行益气复脉（冻干）中细菌内毒素的定量检测。

HPLC-ELSD测定注射用丹参多酚酸中甘露醇含量

目的：采用合适的分离方法将注射用丹参多酚酸中甘露醇与酚酸类物质分离后,用HPLC-ELSD测定注射用丹参多酚酸中甘露醇的含量。方法：采用Prevail Carbohydrate ES柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相：以乙腈-四氢呋喃（100∶2）为流动相A,0.1%乙酸水为流动相B,A∶B=83∶17进行等度洗脱;流速：0.8 mL.min-1;以ELSD检测器进行检测,参数设置为：增益10,气压25 psi,漂移管65℃,Neb heater 60%;柱温：30℃。结果：甘露醇峰面积的自然对数值与浓度（μg.mL-1）的自然对数值呈良好的线性关系,甘露醇的线性回归方程为y=1.3986x＋2.3695,R2=0.9991,线性范围为59.84~598.40μg.mL-1,平均回收率为102.86%（RSD 2.48%）。结论：本方法操作简单,且重现性好,可用于注射用丹参多酚酸中甘露醇的含量测定。

HPGPC法检测注射用益气复脉(冻干)中的糖苷类大分子物质

目的建立注射用益气复脉(冻干)(红参、麦冬、五味子)中的大分子物质的HPGPC检测方法。方法采用高效凝胶色谱法,色谱柱为Ultrahydrogel 250(7.8 mm×300 mm);流动相0.1 mol/L氯化钠溶液;体积流量0.3 mL/min;柱温30℃;示差折光检测器,检测器温度40℃;进样量20μL。结果对5批注射用益气复脉(冻干)测定发现均无大分子物质。结论该方法简便、快捷,能用于注射用益气复脉(冻干)中大分子物质的排除性检查。

HPLC-UV法测定五味子中5-羟甲基糠醛

目的建立五味子药材中5-羟甲基糠醛（5-HMF）的定量测定方法。方法采用HPLC-UV,Diamonsil C18（2）色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相为甲醇-0.5%醋酸水（15∶85）;检测波长284 nm;体积流量1 m L/min;柱温30℃。结果 5-羟甲基糠醛在1.14~18.21μg/m L范围内线性关系良好,平均回收率为100.1%,RSD为1.0%。五味子鲜果和干燥种子中均未检出5-HMF,干燥果肉中5-HMF含有量较高,12批五味子中5-羟甲基糠醛的含有量范围为0.09~2.40 mg/g。结论五味子中的5-羟甲基糠醛主要是由五味子鲜果果肉在加热烘干过程中产生,不同批号的五味子中5-HMF的量差异较大。

参麦胶囊干法制粒工艺研究

目的:研究参麦胶囊干法制粒工艺的影响因素,优选参麦胶囊干法制粒的最佳工艺条件。方法:以吸湿性、颗粒一次成型率为评价指标确定混合辅料的种类、最优比例及混合辅料的用量;通过单因素试验并结合正交试验,以送料变频、压片变频、制粒变频为自变量,颗粒一次成型率为因变量,优化参麦胶囊干法制粒工艺参数。结果:辅料为微晶纤维素与淀粉3∶2混合,辅料量为30%;最佳制粒工艺条件为:送料变频30 Hz、压片变频15 Hz,制粒变频10 Hz。通过3批干法制粒工艺验证表明,制得的颗粒具有流动性好,堆密度高,吸湿率低的优点。结论:优选的干法制粒工艺稳定可行,为以后该产品的大生产提供技术参考和依据。