9V型肺炎链球菌荚膜多糖降解研究

肺炎链球菌荚膜多糖分子质量较大,在制备结合疫苗的过程会有诸多不便,如溶液黏度大、结合过程易过度交联形成凝胶、不易于过滤以及纯化,而荚膜多糖分子片段化是降低其分子质量的有效途径。文章选取了酸水解和超声降解两种方法分别处理9V型肺炎链球菌荚膜多糖。利用不同相对分子质量的葡聚糖在HPLC上的保留时间绘制标准曲线,计算处理后多糖相对分子质量,并通过核磁共振检测结构稳定性,免疫双扩散检测抗原性。实验结果表明,在适宜的条件下,酸水解和超声降解均能有效降低肺炎链球菌荚膜多糖分子质量,减少重复单元,保留重复单元内部结构,保留时间从5.7 min延长到8.25 min,相对分子质量约为580 k。但是酸水解方法破坏了多糖的抗原完整性,而超声降解可以良好保持。

重组人血小板源生长因子的发酵表达,纯化及其生物信息学分析

血小板源生长因子由血小板、巨噬细胞和内皮细胞等分泌,是由A、B两种单体构成的二聚体结构,可形成PDGF-AA,BB和AB 3种异构体。文章采用重组毕赤酵母二级种子高密度发酵,所获得的发酵液通过澄清,阳离子交换捕获,凝胶层析精细纯化等步骤,获得了纯度达99%的rh PDGF-BB蛋白样品,经过进一步鉴定,检验分析之后,其指标完全满足其制剂要求,利用相关在线软件进行生物信息学分析,为进一步研究其生物学功能奠定了基础,加速了其药学研究过程。

rhFGF-21的高效表达及其纯化工艺的优化

成纤维细胞生长因子-21(FGF-21)是FGF家族的一员。现有研究表明,FGF-21是一种血糖调节因子,有望被开发成为治疗糖尿病的候选药物。本实验是在前期研究的基础上,对高效表达FGF-21基因的工程菌株进行接种、发酵、诱导表达,将表达产物纯化,PEG修饰提高其体内半衰期,通过改变反应体系的反应时间、反应温度、蛋白浓度和反应物之间的质量比优化修饰反应。阴离子交换层析纯化反应混合物,最终得到纯度大于98%的活性FGF-21蛋白。