海湾泥、碱渣和粉煤灰作为园林种植基质的微生物学特性研究

以滨海盐土、扰动人为新成土(客土)为对照,就利用海湾泥、碱渣和粉煤灰作为城市园林绿化种植基质的土壤微生物特性进行了研究。结果表明,不同土壤条件下0～40cm土壤微生物数量差异极显著表现为防护林>客土绿地>滨海盐土,0～20cm土层微生物数量是20～40cm的3～4倍。在细菌、放线菌和真菌三大类群中,细菌占绝对优势,其次是放线菌和真菌。滨海盐土微生物的季节变化不大,防护林试验地和客土绿地微生物总数最多时均出现在秋季。芽孢杆菌的11个种在不同土壤条件下的生态分布明显不同,最常见的是蜡质芽孢杆菌、拟霉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和蜂房芽孢杆菌。放线菌主要是链霉属放线菌,包括链霉菌属的10大类群,分布最广的类群是灰褐类群、金色类群和青色类群。真菌分布有11个属,在不同土样中其组成的差异和生态分布也有着明显的差异。

传统食醋酿造过程中微生物群落的多样性及功能研究进展

采用传统酿造工艺的传统食醋,不仅具有独特的风味,而且是一种健康的功能食品。传统食醋的酿造过程靠经验控制,酿造微生物经过自发地在生产原料中富集,形成了复杂的群落结构。传统酿造工艺经过上千年的改良和传承,酿造微生物不断地发生着驯化,逐渐形成了相对稳定的菌群结构,不同的微生物群落结构可能是造成不同食醋风味迥异的原因。近年来,各国科研人员对食醋的传统酿造工艺机制展示出了浓厚的兴趣,本文综述了国内外在传统食醋酿造过程中的微生物群落的多样性和功能方面的研究进展。

微生物3-甾酮-△^1-脱氢酶的研究进展

3-甾酮-△1-脱氢酶(KSDH)属于黄素蛋白酶类,位于细胞膜上,能在3-甾酮化合物的C1和C2之间引入双键,提高原有底物的抗炎活性,在甾体药物的生产上发挥着重要作用。文章对已报道的不同微生物来源的KSDH进行比较分析,着重介绍了关于KSDH基因表达和敲除方面的研究,并对该酶在甾体转化方面的应用做一简要总结。

微生物转化法制备雌酮的研究

从实验室保藏菌种中诱变筛选到一株简单节杆菌(Arthrobacter simplex)DW 5,该菌株能将底物雄烯二酮衍生物转化为雌酮。本文主要对DW 5菌株转化培养基和转化条件进行研究。结果表明,当转化培养基碳源为葡萄糖,氮源为蛋白胨,转化初始pH为7.0,装液量25 mL/250 mL三角瓶时,当投入底物浓度为5 g/L,14 h后雌酮转化率达90%。

微生物酶法生产L-半胱氨酸的产酶条件优化

以假单胞菌(Pseudom onas sp.)TS1138为供试菌株,对微生物酶法生产L-半胱氨酸的条件进行了初步研究。通过对产酶培养基中的碳氮源进行研究,得到了TS1138菌株产酶的最佳碳氮源分别为葡萄糖和尿素,DL-ATC的最适添加量为5 g/L;通过对产酶培养基的产酶条件进行研究,得出了最适的种子接种量为10%,产酶培养基的最适初始pH为8.0,500 mL三角瓶的最适装液量为40 mL。

β-环糊精对甾体微生物转化菌种生长特性的影响

研究了β-环糊精(简称β-CD)对两种甾体生物转化菌种蓝色犁头霉(Absidia coerulea)和分枝杆菌(Myco- bacterium sp．)生长特性的影响。采用以β-CD作为唯一碳源的固体培养法和添加有β-CD的液体培养法,分别观察菌种对β-CD的利用以及β-CD对菌体生长过程和生物量的影响。结果表明,两种菌种均不能利用β-CD;在培养液内添加不同量的β-CD或在菌体生长的不同时期添加一定量的β-CD均不影响菌种的生长特性。

巴卡亭Ⅲ转化生成10-脱乙酰基巴卡亭Ⅲ的微生物筛选与鉴定

10-脱乙酰基巴卡亭Ⅲ(10-DAB)是紫杉烷类抗肿瘤药物多烯紫杉醇的前体物质。以巴卡亭Ⅲ为底物,通过TLC、HPLC、LC-MS等方法,对课题组前期从污泥中得到的分离株进行筛选,获得了六株转化巴卡亭III生成10-DAB的菌株,分别命名为P1-A-19、P2-A-8、P2-A-10、P2-A-11、P2-A-12、P2-A-13,通过形态学观察、生理生化试验和16S r DNA序列分析确定其种属信息,P1-A-19被鉴定为解鸟氨酸拉乌尔菌(Raoultella ornithinolytica),P2-A-8被鉴定为成团泛菌(Pantoea agglomerans),P2-A-11、P2-A-12、P2-A-13均被鉴定为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)。其中,Raoultella ornithinolytica P1-A-19是首次发现的产10-DAB能力的微生物。

天津滨海盐碱土地区城市绿地土壤微生物特性研究

对天津滨海盐碱土地区城市绿地土壤微生物特性研究表明不同绿地植物配置模式下0～40cm土壤微生物数量差异极显著,防护林>灌+草>乔木>乔+草>草坪>滨海盐土,0～20cm土层微生物数量是20cm～40cm的3～4倍。在细菌、放线菌和真菌三大类群中,细菌占绝对优势,其次是放线菌和真菌。滨海盐土微生物的季节变化不大,防护林土壤中微生物总数最多时出现在秋季,乔木、乔+草、灌+草、草坪绿地土壤中微生物数量最多时出现在夏季或秋季。细菌、放线菌数量与土壤全盐含量呈显著负相关,细菌的数量与土壤有机质含量呈极显著相关,真菌数量与土壤养分相关不显著.芽孢杆菌的11个种在不同土壤条件和植物配置模式下的生态分布是不同的,最常见的是蜡质芽孢杆菌、拟霉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和蜂房芽孢杆菌,放线菌主要是链霉属,包括链霉菌属的10大类群,分布最广的类群是灰褐类群、金色类群和青色类群,真菌分布有11个属。在不同植物配置下芽孢杆菌、放线菌和真菌的组成、优势种的组合也存在显著差异。

白腐菌对秸秆中木质素生物降解的研究

研究了白腐菌及其产生的木质素降解酶系对秸秆的木质素生物降解方法,探讨了黄孢原毛平革菌和杂色云芝单一菌株生物降解及双菌株联合降解木质纤维素的规律,白腐菌双菌联合固态培养可使木质素降解率达到47.64%,脱木素选择性为4.74.采用模拟大规模白腐菌堆积培养(厚度30 cm)的方法降解秸秆木质素,培养30 d,木素降解率为32.54%,表明此方法是一种可行的大规模生物预处理方法.

三种真菌对洋地黄毒苷的生物转化特性研究

考察了新月弯孢霉(Curvularia lunata)AS3.3589、蓝色犁头霉(Absidia coerulea)CICC40302和雷斯青霉(Penicillium raistrickii)ATCC10490对洋地黄毒苷的生物转化特性.结果表明:新月弯孢霉AS3.3589转化洋地黄毒苷得到2个产物,即产物Ⅰ和产物Ⅱ,产物Ⅰ的转化率为27%,产物Ⅱ的转化率为5%;蓝色犁头霉CICC40302转化洋地黄毒苷得到1个产物,即产物Ⅲ,转化率为6%;雷斯青霉ATCC10490对洋地黄毒苷不发生转化反应.通过优化新月弯孢霉KA-91生物转化反应的工艺条件,使转化产物Ⅰ的转化率达到38%,产物Ⅱ的转化率达到10%.

部分水解聚丙烯酰胺生物降解的初步研究

聚丙烯酰胺降解细菌G1能在一定浓度的聚丙烯酰胺溶液中生长繁殖,具有降解水解聚丙烯酰胺(HPAM)并降低其溶液黏度的能力。实验通过改变HPAM溶液浓度、pH和降解菌初始接种量、培养温度、培养时间、及连续活化次数等,探究G1菌对HPAM溶液的降解特性。实验结果表明:G1菌连续活化3次,接种量10%,在浓度10 g.L-1HPAM的溶液中,30℃恒温振荡培养10 d,可使溶液黏度损失率达到29.8%。

反应介质对植物甾醇侧链生物降解的影响

分析考察了有机溶剂、表面活性剂和超分子等反应介质对分枝杆菌(Mycobacterium sp.NRRLB-3683)降解植物甾醇生成雄甾烯酮AD(D)的生物转化反应的影响.结果表明,采用有机溶剂和吐温80等表面活性剂作为反应介质的转化反应的转化率较低,而在含有环糊精的超分子反应介质中植物甾醇的转化率和转化速率均大幅度提高.采用直接添加的方式加入羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD),反应168h,植物甾醇转化率达89.8%,比对照提高了2.9倍.转化48h时加入与植物甾醇摩尔比为2∶1的HP-β-CD,72h时转化率达到87.5%,此时同期对照转化率为27.6%,缩短了反应周期.

促溶剂对生物催化甲基睾丸素C_(1.2)位脱氢的影响

研究促溶剂在简单节杆菌(Arthrobacter simplexAS 1.94)催化甲基睾丸素C1.2位脱氢过程中对甾体转化结果的影响。在简单节杆菌催化甲基睾丸素C1.2位脱氢过程中加入不同的亲水性有机溶剂,以甲基睾丸素的转化率为指标,选择最适的亲水性有机溶剂并确定其最佳的添加量,同时研究不同的促溶剂配比对转化的影响。结果发酵液中单一的添加4%的甲醇时底物甲基睾丸素的转化率可达80%,添加1‰的Tween-80可使转化率达到46%,两者作为混合促溶剂同时加入,对转化率的提高更明显,达到81%。因此选用4%的甲醇和0.1‰的Tween-80作为混合促溶剂对整个生物转化过程有良好的促进作用。

欧文氏菌噬菌体的分离纯化及生物学特性研究

以欧文氏菌胡萝卜亚种为宿主菌,从环境污泥中分离到10株噬菌体。噬菌体热稳定性、pH稳定性分析结果表明噬菌体Erj2、Erb1、Erc2在温度-20～40℃、pH4.0～9.0之间均表现出良好的稳定性。噬菌体生物学特性分析显示,它们的最佳感染复数分别为0.0001、0.001、0.0001;核酸类型均为双链DNA;一步生长曲线表明噬菌体Erj2感染宿主菌的潜伏期为15min,裂解期为13min,裂解量为442;电镜显示,噬菌体Erj2、Erc2的头部均为多面体立体对称结构,Erj2由头部和一长尾构成,Erc2由头部和一短尾构成。共培养实验中,噬菌体Erj2和Erc2分别与宿主菌共培养液OD_(600)均为0.5以下,其中噬菌体Erj2与宿主菌共培养液在4 h后其OD_(600)接近为0,表明该噬菌体能有效的抑制宿主菌的生长,显示具有生防效果和应用前景。

PCR-DGGE分析木瓜酵素自然发酵过程中微生物的多样性

为探究木瓜酵素自然发酵过程中的微生物多样性及变化规律,采用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(polymerase chain reaction-denaturing gradient gel electrophoresis,PCR-DGGE)技术分析木瓜酵素自然发酵过程中细菌和酵母的多样性及变化规律。结果表明,木瓜酵素自然发酵过程中主要细菌有植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、假肠膜明串珠菌(Leuconostoc pseudomesenteroides)、类肠膜魏斯氏菌(Weissella paramesenteroides)及不可培养的丙酸菌(Uncultured Propionibacterium sp.),其中植物乳杆菌为主要优势细菌;主要酵母有:酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、假丝酵母(Candida xestobii、Candida intermedia)、毕赤酵母(Pichia guilliermondii、Komagataella phaffii、Pichia punctispora、Pichia galeiformis)、棒孢酵母(Clavispora sp.)及Cyberlindnera fabianii,其中酿酒酵母和毕赤酵母为主要优势酵母;Lac plantarum、Pic galeiformis分别与Uncultured Propionibacterium sp.、Cyb fabianii之间的亲缘性较高,与其他菌之间的亲缘性较小。木瓜酵素自然发酵过程中菌群交替生长,有一定的亲缘性,菌落结构变化较小,分布较为均匀,这为进一步的研究提供理论基础。

枯草芽孢杆菌工程菌株产普鲁兰酶发酵条件的优化

利用基因工程手段获得的产长野芽孢杆菌普鲁兰酶的枯草芽孢杆菌基因工程菌株WB600/pWB-pulB,通过单因素筛选及正交试验进行发酵培养基优化,得到产酶最佳配方为玉米淀粉3.0%,酵母膏2.0%,CaCl20.03%,Na2HPO41.0%。同时对重组菌株摇瓶条件下液体发酵的主要影响因素初始pH、接种量、装液量、转速、温度等进行探讨,确定了产酶最佳培养条件为,以3%接种量接种于优化后培养基,初始pH7.0,装液量30 mL/250 mL,37℃,200 r/min摇床培养36 h。在此优化条件下,普鲁兰酶活力达到20.16 U/mL,是之前研究结果(10.94 U/mL)的1.84倍。

制药工程专业建设和发展的总结

从历史沿革、学科支撑、课程设置、人才培养方案和实践教学体系等方面总结天津科技大学生物工程学院在制药工程专业建设中彰显生物制药特色、突出创新和实践能力培养的情况。提出专业建设发展中要紧密结合区域产业、不断优化和完善课程体系、加强实践和创新能力训练、构建科学的教学管理体系的研究思路,为今后制药工程专业的发展奠定良好基础。

亚硫酸盐分泌量提高的啤酒酵母基因工程菌株发酵性能研究

对亚硫酸盐分泌量提高的啤酒酵母基因工程菌株Y2在不同发酵时期SO2、H2S生成量和抗氧化性能进行了研究。啤酒发酵实验表明,啤酒酵母基因工程菌株Y2 g-1较原株M8的SO2生成量提高74.4%,TBA值下降14.9%,DPPH自由基清除率提高38.2%,H2S生成量基本不变,抗氧化能力明显改善,但遗传稳定性较差。

山茱萸果汁RP-HPLC梯度洗脱优化实验研究

采用反相高效液相色谱（RP—HPLC），建立山茱萸果汁定性定量分析方法．经梯度洗脱优化出的色谱条件为：用Hypersil GOLD C18色谱柱，以体积分数为0．1％磷酸水溶液（含2％乙腈）为流动相A，乙腈为流动相B，梯度洗脱时间分别为0、8、12、26和55min时，B体积分数（％）分别为0、0、8、8和26，流速为1．0ml Mmin，柱温为35℃，波长为259nm．采用中位数法筛选10批山茱萸果汁HPLC图谱的特征峰，确定15个共有峰为果汁定性分析的指标峰．以马钱苷吸收峰为参照，对果汁HPLC图谱中马钱苷进行定量测定，其线性范围为0．092～0．920μg，平均回收率为99．06％（RSD：1．62％），马钱苷平均含量为2．162mg／mL（n=10）．

氨基酸发酵工业中的提取、精制技术

本文利用氨基酸与微生物菌体、培养基成分以及副产物之间的物理、化学性质的差异,以提取单元操作如膜分离、离子交换树脂和结晶技术的实例,进行基础理论方面的综述,同时对提取、精制技术的新进展的实例进行介绍和概述。