核桃青皮粗提物诱导KYSE150食管癌细胞周期阻滞及凋亡

目的:研究核桃青皮粗提物诱导KYSE150人食管癌细胞周期阻滞和凋亡的作用机制。方法:MTT方法检测核桃青皮粗提物对KYSE150细胞增殖的抑制效果,流式细胞仪检测核桃青皮粗提物对KYSE150细胞周期和细胞凋亡的影响,Western blot检测核桃青皮粗提物引起的细胞周期相关蛋白和凋亡相关蛋白的变化。结果:MTT结果显示,核桃青皮粗提物对KYSE150细胞的增殖抑制呈时间和浓度依赖性,当核桃青皮粗提物浓度为100μg/mL时,在24 h,48 h和72 h对KYSE150细胞的增殖抑制率分别为(43.69±1.02)%,(88.73±1.32)%和(93.06±2.34)%;流式细胞术结果表明,核桃青皮粗提物诱导KYSE150细胞周期阻滞和凋亡;Western blot结果表明,核桃青皮粗提物通过上调p53,phospho-p53(p-p53)蛋白的表达,下调cyclinD1蛋白的表达,诱导KYSE150细胞周期阻滞在G0/G1期。另一方面,核桃青皮粗提物通过上调Bax蛋白,下调Bcl-2和Caspase-3蛋白的表达,从而诱导细胞凋亡。当核桃青皮粗提物浓度为40μg/mL时,可上调p53,p-p53,Bax的表达量分别为对照组的(1.8±0.07),(23.6±0.12)和(1.5±0.02)倍,下调cyclinD1,Bcl-2和Caspase-3的表达量分别为对照组的(0.3±0.02),(0.03±0.005)和(0.1±0.01)倍。结论:核桃青皮粗提物可以引发KYSE150细胞周期阻滞在G0/G1期,并且可以通过线粒体途径诱导KYSE150细胞凋亡。

Fingolimod对小鼠慢性胰腺纤维化的抑制作用

目的:观察新型免疫抑制剂Fingolimod(FTY720)对雨蛙素致小鼠慢性胰腺纤维化的治疗作用。方法:健康雄性C57BL/6小鼠30只,随机分为对照组、模型组和FTY720治疗组。模型组和治疗组腹腔注射雨蛙素,50μg·kg^(-1)·次^(-1),1周3次,连续6周;治疗组于第5周开始注射FTY720,1 mg·kg^(-1)·d^(-1),持续2周;对照组腹腔注射等量的生理盐水。于第7周第1天留取胰腺组织,行HE染色和苦味酸-天狼星红染色,分别于光镜和偏振光显微镜下观察病理改变和评分,并用免疫组织化学染色法观察α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、CD3、FOXP3表达情况。结果:模型组病理评分中,腺泡萎缩为2.52±0.36,炎细胞浸润为3.42±0.31,纤维化程度为3.25±0.42,显著高于对照组的病理评分。模型组α-SMA表达为25.33±5.64,CD3表达为68.83±8.38,FOXP3表达为34.83±6.85,均显著高于对照组(分别为0.33±0.52,1.83±0.75,1.33±0.82)。治疗组病理评分中,腺泡萎缩为1.69±0.27,炎细胞浸润为2.34±0.33,纤维化程度为2.19±0.35,均较模型组明显减少。治疗组胰腺组织中α-SMA表达为12.33±2.58,CD3为25.00±4.93,FOXP3为17.33±4.41,也明显低于模型组。结论:FTY720能明显减少雨蛙素所致的T淋巴细胞浸润和调节性T细胞数量,在一定程度上减轻胰腺间质胶原的表达,从而抑制胰腺纤维化程度。