脓毒症患儿外周血CD4+T细胞Bip、ATF6及DDIT3表达水平变化

目的:探讨脓毒症(Sepsis)患儿外周血CD4^+T淋巴细胞免疫球蛋白结合蛋白(Bip)、激活转录因子6(ATF6)及内质网应激(ERS)特异性促凋亡因子DNA损伤诱导转录蛋白3(DDIT3)mRNA水平的变化。方法:收集确诊脓毒症儿童60例,根据出院结局分为存活组和死亡组各30例,另外选取同期健康儿童30例作为对照组。对60例危重病例进行评分(PCIS);采集三组外周静脉血标本,分离外周血CD4^+T淋巴细胞,实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法测定外周血CD4^+T淋巴细胞Bip、ATF6及DDIT3 mRNA的相对表达水平。PCR产物行琼脂糖凝胶电泳鉴定特异性。结果:脓毒症存活组C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、白介素-6(IL-6)、血乳酸、D-二聚体及脑尿钠肽(BNP)均低于死亡组,PCIS评分高于死亡组,差异有统计学意义(t=7.77、11.40、21.88、5.11、9.53、4.27、2.80,均P<0.01)。三组Bip、ATF6及DDIT3 mRNA相对表达水平比较差异有统计学意义(F=586.49、313.55、764.23,均P<0.01),存活组Bip、ATF6及DDIT3水平高于对照组[(3.01±0.67)与(1.00±0.32)、(2.17±0.37)与(1.00±0.28)、(4.44±0.64)与(1.00±0.20)],而低于死亡组[(3.01±0.67)与(6.63±0.84)、(2.17±0.37)与(3.26±0.39)、(4.44±0.64)与(10.02±1.41)]。存活组确诊时与治疗后Bip、ATF6及DDIT3 mRNA相对表达水平比较差异有统计学意义(t=16.31、19.20、39.10,均P<0.01),存活组治疗后Bip、ATF6及DDIT3 mRNA相对表达水平低于确诊时水平。结论:脓毒症患儿外周血CD4^+T淋巴细胞Bip、ATF6及DDIT3表达水平增高,且随病情好转而降低,可通过ERS导致外周血CD4^+T细胞凋亡,从而在脓毒症多器官功能障碍综合征(MODS)的发生发展中起重要作用。

急性百草枯中毒患儿外周血CD4^＋T淋巴细胞肌醇依赖酶1、凋亡信号调节激酶1及c-Jun氨基末端激酶水平变化的意义

目的探讨急性百草枯（PQ）中毒患儿外周血CD4^＋T淋巴细胞肌醇依赖酶1（IRE1）、凋亡信号调节激酶1（ASK1）及c-Jun氨基末端激酶（JNK）mRNA水平的变化。方法选择2014年6月至2016年6月于天津市儿童医院就诊的急性PQ中毒患儿30例，其中男18例，女12例；年龄2～14岁。记录患儿的一般临床资料及实验室检查资料，误服后2～20 h采集外周静脉血标本。选取同期来天津市儿童医院体检的健康儿童30例为健康对照组，男18例，女12例；年龄2～14岁。分离外周血CD4^＋T淋巴细胞，实时荧光定量聚合酶链反应（Real-time PCR）测定外周血CD4＋T淋巴细胞IRE1、ASK1及JNK mRNA的相对表达水平。PCR产物行琼脂糖凝胶电泳鉴定特异性。数据采用SPSS 13.0软件进行分析。结果30例患儿均有口腔黏膜溃烂、恶心、呕吐、腹痛，少尿、无尿19例，消化道出血16例，头痛、头晕12例，胸闷、憋气、呼吸困难11例，抽搐8例，黄疸5例。PQ中毒组IRE1、ASK1及JNK mRNA相对表达水平均明显高于健康对照组（1.70±0.16比1.02±0.18、3.56±0.85比1.05±0.31、5.22±0.87比1.01±0.33，t=15.26、15.21、24.78，均P〈0.01）。结论PQ中毒患儿外周血CD4^＋T淋巴细胞IRE1、ASK1及JNK mRNA相对表达水平升高，可能与PQ所致氧化应激和免疫激活有关，通过内质网应激形成复杂的细胞因子网络，导致CD4^＋T淋巴细胞凋亡，影响多脏器衰竭的发生、发展。