儿童原发性肾病综合征VCAM-1、hs-CRP水平及与脂代谢的关系

目的通过检测血管细胞黏附分子1(VCAM-1)及超敏C反应蛋白(hs-CRP)了解儿童原发性肾病综合征(PNS)脂代谢紊乱对血管内皮细胞功能、微炎症状态及凝血功能的影响。方法选取符合PNS标准的患儿65例为病例组,选取性别、年龄与之匹配的健康体检儿童45例为对照组。分别应用酶联免疫吸附测定(ELISA)法及免疫比浊法测定病例组治疗前后及对照组血清中VCAM-1和hs-CRP的水平,应用特种蛋白分析仪测定2组24 h尿蛋白定量,并检测血浆白蛋白(ALB)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、载脂蛋白(Apo)A1、ApoB、脂蛋白a[LP(a)]、纤维蛋白原(Fb)及D二聚体水平。采用Pearson法分析上述指标与VCAM-1、hs-CRP的相关性。结果病例组治疗前VCAM-1和hs-CRP水平明显高于对照组,治疗后VCAM-1和hs-CRP水平明显低于治疗前;血浆VCAM-1、hs-CRP与尿蛋白定量、血TG、TC、LDL-C、ApoB、LP(a)、Fb、D二聚体水平呈正相关,而与血清ALB、HDL-C呈负相关(P<0.05)。结论PNS患儿急性期VCAM-1、hs-CRP水平明显增高,监测血浆VCAM-1和hs-CRP水平可对PNS微炎症状态、内皮细胞损伤、高凝状态及血栓形成进行预测及评估。

Klotho蛋白对肾缺血再灌注大鼠急性肾损伤及纤维化的保护作用

目的探讨Klotho蛋白在缺血再灌注(I/R)大鼠引起的急性肾损伤及纤维化进程中的作用。方法60只健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组(Sham组)、肾脏缺血再灌注组(I/R组)和Klotho蛋白干预组(I/R+Kl组),每组20只。I/R组采用夹闭右侧肾蒂40 min再灌注法建立肾缺血再灌注急性肾损伤模型。Sham组游离出右侧肾动脉,但不夹闭右侧肾蒂,暴露40 min后缝合腹腔。I/R+Kl组手术方法同I/R组,造模成功后,腹腔注射Klotho蛋白(0.01 mg/kg)。3组分别于造模成功后第1、7、14、28天收集大鼠血、肾组织标本,分别检测大鼠血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平;HE染色观察肾组织损伤情况,Masson染色观察肾纤维化情况,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清及肾组织Klotho蛋白水平,Western blot法检测肾脏组织Klotho蛋白的表达。结果与Sham组比较,I/R组及I/R+Kl组血Scr及BUN水平均升高(P<0.05),与I/R+Kl组比较,I/R组各时间点血Scr及BUN水平均升高(P<0.05)。HE染色结果显示,第1天时I/R组肾小管出现广泛急性坏死,I/R+Kl组损伤较轻微。Masson染色结果显示,I/R组第14天出现了轻度的纤维化,第28天时纤维化程度更为显著,I/R+Kl组纤维化程度较轻微(P<0.05)。ELISA结果显示,第1、14、28天时与Sham组比较,I/R+Kl组及I/R组血清及肾组织Klotho水平下降(P<0.05),I/R组血清及肾组织Klotho水平均低于I/R+Kl组(P<0.05)。Western blot结果显示,与Sham组比较,各时间点I/R组及I/R+Kl组Klotho水平均下降,而I/R+Kl组Klotho水平均高于I/R组(P<0.05)。结论肾缺血再灌注肾损伤时Klotho表达下调;外源性补充Klotho蛋白可缓解缺血再灌注肾损伤大鼠的急性肾损伤及纤维化,起到肾保护作用。