2型猪链球菌天津分离株的鉴定及其遗传特征分析

为了解天津市某猪场引起育肥猪神经症状的病原及其特性和遗传特征,本研究采集8份患病猪脑组织样品经细菌分离、形态学观察、gdh基因和cps2J基因的PCR扩增及序列分析,确定8份样品中的分离株均为同一2型猪链球菌(SS2),命名为TJS75。测定其生长曲线、并按照文献方法进行溶血性试验、黏附/侵入试验和对小鼠的致病性试验,分析该SS2分离株特性。结果显示,TJS75菌株经TSB培养6 h~15 h可达对数生长期,对绵羊血红细胞(RBC)具有崩解效果,可黏附并侵入PK-15细胞(黏附率和侵袭率分别为5.16%和7.90%),且感染TJS75株的BALB/c小鼠出现不同程度的行动迟缓、呼吸急促、精神萎靡和神经症状等,经测定其LD50为2.15×107cfu/mL。进一步采用高通量测序,并预测其毒力基因,分析该菌株的遗传特征,结果显示,TJS75菌株基因组全长2368195 bp,GC含量40.88%,含有2299个编码基因,其中有1822、1830和1077个基因分别注释于GO、COG和KEGG数据库,携带的16S r RNA基因序列与国内分离的SS强毒株98HAH33和05ZYH33的亲缘性较近,毒力基因的预测结果显示该菌株携带499种毒力相关基因(编码173种毒力相关因子),依据功能分类,这些毒力基因参与SS2的黏附和侵袭、溶血、促进铁转运、自溶酶的合成、降解胶原酶、唾液酸的合成等。本研究首次分离到携带MRP毒力因子的ST25型SS2,为深入开展SS2 TJS75株的致病机制研究提供了科学依据。

褪黑素缓解双酚A诱导的猪卵母细胞氧化应激的作用机制研究

本研究旨在探究褪黑素(MT)缓解双酚A(BPA)诱导的猪卵母细胞氧化应激的作用机制。将猪未成熟的卵丘-卵母细胞复合体(COCs)分为3组,其中,对照组在常规培养液中体外成熟培养44 h,BPA组在含有75μmol/L双酚A的培养液中体外成熟培养44 h,BPA+MT组的COCs先在含BPA的常规培养液中体外成熟培养18 h,再转入含10-7 mol/L MT的体外常规培养液中继续培养至44 h。成熟培养结束后,检测各组卵子成熟质量和卵子内抗氧化基因和蛋白表达等相关指标。结果显示:与对照组相比,BPA组极体率降低(P<0.05),线粒体分布不均匀(P<0.05),抗氧化酶活力下降(P<0.05),细胞成熟相关基因表达下降(P<0.05),ROS、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平上升(P<0.05),Nrf2和HO-1蛋白水平和基因表达水平上调(P<0.05)。与BPA组相比,BPA+MT组的极体率提高(P<0.05),ROS和MDA水平降低(P<0.05),抗氧化酶活力提高(P<0.05),Nrf2和HO-1的蛋白和基因表达水平下调(P<0.05)。由以上结果可知,MT通过Nrf2/HO-1通路发挥作用,减缓了BPA诱导的猪卵母细胞氧化应激损伤。

全基因组重测序及其在群体基因组学的研究方法

利用群体基因组学的工具分析重测序数据可以更好地将选择位点与种群历史相结合,精确估计有效种群规模、种群历史和种群结构,确定特定遗传位点和变异。该文简述了全基因组测序技术,介绍了其在群体基因组学的主要研究方法和实现软件,讨论了这些方法的优缺点,并提出开发新的深度学习模型和机器学习算法或许是未来改进群体基因组学研究方法的方向。

基因芯片在奶牛遗传育种中的应用

基因芯片是微阵列技术应用中的一种,可以用于检测待测基因的位置、含量、类型等,并具有高通量、高灵敏度和高特异性的特点。该文综述了基因芯片在奶牛遗传育种中的应用及其重要性,阐述了基因芯片在奶牛群体遗传学研究、全基因组关联分析及基因组选择等方面的研究进展,为奶牛群体遗传改良以及遗传资源的挖掘利用提供参考。

卫矛醇通过调节Toll样受体4/髓样分化因子88/核因子-κB信号通路缓解脂多糖诱导的猪肠道上皮细胞损伤

本试验旨在通过构建猪肠道上皮细胞(IPEC-J2细胞)经脂多糖(LPS)刺激后细胞损伤模型,揭示卫矛醇(DUL)对LPS处理后的IPEC-J2细胞屏障受损和炎症损伤的缓解作用及其可能的分子机制。采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测IPEC-J2细胞活力,以确定LPS造模浓度(150μg/mL)和最佳DUL处理浓度(200μmol/L)。试验设3个组:对照(CON)组、LPS组和DUL组。IPEC-J2细胞贴壁后,CON组先用完全培养基处理24 h,然后用DMEM培养基处理24 h;LPS组先用完全培养基处理24 h,然后用含有150μg/mL LPS的DMEM培养基处理24 h;DUL组先用含有200μmol/L DUL的完全培养基处理24 h,然后用含有150μg/mL LPS的DMEM培养基处理24 h。观察各组IPEC-J2细胞生长状态,划痕试验评价细胞的迁移和增殖能力,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测屏障和炎症相关基因的mRNA和蛋白相对表达水平。结果表明:1)在IPEC-J2细胞上,确定200μmol/L的DUL为最佳处理浓度,150μg/mL的LPS为有效致炎浓度。2)相较于LPS组,DUL预处理缓解了细胞密度降低、细胞空泡增多、细胞边界不清晰的情况。3)相较于LPS组,DUL预处理显著增加了细胞迁移距离和细胞迁移面积(P<0.05)。4)相较于LPS组,DUL预处理显著升高了屏障相关基因闭锁小带蛋白-1(ZO-1)、闭锁蛋白(OCLN)、封闭蛋白1(CLDN1)的mRNA和蛋白相对表达水平及黏蛋白2(MUC2)、大肿瘤抑制激酶1(LATS1)、YES相关蛋白1(YAP1)的mRNA相对表达水平(P<0.05)。5)相较于LPS组,DUL预处理显著降低了通路相关基因髓样分化因子88(Myd88)、核因子-κB抑制蛋白-α(IκB-α)、核因子-κB(NF-κB)、白细胞介素-1β(IL-1β)的mRNA和蛋白相对表达水平和Toll样受体4(TLR4)的蛋白相对表达水平以及核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、白细胞介素-18(IL-18)的mRNA表达相对表达水平(P<0.05)。由此可见,DUL通过下调TLR4/Myd88/NF-κB信号通路相关蛋白表达,调节炎症因子分泌,提高紧密连接相关基因表达,缓解LPS引起的IPEC-J2细胞屏障损伤和炎症反应。

京津冀地区猪繁殖与呼吸综合征流行特点及防控建议

猪繁殖与呼吸综合征(Porcine respiratory and reproductive syndrome,PRRS)俗称“猪蓝耳病”,临床以母猪繁殖障碍和仔猪及生长猪群呼吸道症状为主要特征。该病1987年在美国东南部首次报道,之后迅速扩散至美国主要养猪地区和加拿大。1990年和1991年该病相继在欧洲和亚洲暴发和流行。

固态发酵果胶酶的酶蛋白组成和活力分析、体外酶解效果及对蛋鸡生产性能的影响

为了探究固态发酵果胶酶的酶蛋白组成和活力、体外酶解豆粕效果及对蛋鸡生产性能的影响,试验采用液相色谱串联质谱技术对果胶酶进行酶蛋白组成分析;采用现行国家标准或者行业标准对果胶酶酶系中不同种类酶进行酶活力的测定;采用体外模拟胃-肠两步消化法,以豆粕为酶解底物,在反应体系中添加50 U/g的果胶酶消化5 h,研究果胶酶对豆粕的酶解效果;在蛋鸡日粮中添加100 mg/kg果胶酶(50000 U/g),饲喂35 d,研究果胶酶对蛋鸡生产性能的影响。结果表明:固态发酵果胶酶酶系中共检测出51种酶蛋白,包括果胶酶类14种,木聚糖酶类8种,蛋白酶类6种,纤维素酶类9种,β-甘露聚糖酶类2种,阿魏酸酯酶类2种,淀粉酶类4种,半乳糖苷酶类3种,其他酶类3种。固态发酵果胶酶酶系中果胶酶活力为50794 U/g,木聚糖酶活力为1521 U/g,β-葡聚糖酶活力为3942 U/g,糖化酶活力为4712 U/g,低温淀粉酶活力为230 U/g,酸性蛋白酶活力为198 U/g,中性蛋白酶活力为102 U/g,β-甘露聚糖酶活力为87 U/g,纤维素酶活力54 U/g。果胶酶组酶解豆粕产物中半乳糖醛酸的含量为78.42 mg,比对照组提高了25.01%(P<0.05);干物质消失率为66.60%,比对照组提高了4.29%(P<0.05)。果胶酶组料蛋比比对照组降低了3.06%(P<0.05),每只鸡比对照组多增加收入约0.008元/d。说明固态发酵果胶酶的酶系丰富,对豆粕具有较好的酶解效果;在蛋鸡日粮中添加100 mg/kg的固态发酵果胶酶,能够提高蛋鸡的经济效益,具有较高的市场应用潜力。

湖羊STAT5a基因第10内含子多态性及其与泌乳性状的关联分析

【目的】探究绵羊信号传感器和转录激活器5A(signal transducer and activator of transcription 5A,STAT5a)基因第10内含子多态位点及其与泌乳性状的相关性,为湖羊分子标记选育提供参考依据。【方法】采集71只湖羊母羊血液,通过PCR扩增和Sanger测序法检测湖羊STAT5a基因第10内含子单核苷酸多态性(SNP)位点,并利用SAS 9.4软件分析STAT5a基因SNP位点多态性与7~56 d湖羊产奶量、乳脂率、乳蛋白率、体细胞数等性状的相关性。【结果】湖羊STAT5a基因第10内含子检测出1个SNP位点:g.41838147 A>G,在该位点发现AA、AG和GG 3种基因型。卡方适合性检验表明,g.41838147 A>G突变位点偏离Hardy-Weinberg平衡状态(P<0.05)。多态信息含量(PIC)计算显示,g.41838147 A>G位点为中度多态(0.25G位点的GG基因型个体7~56 d总产奶量极显著或显著高于AA、AG基因型(P<0.01;P<0.05),平均乳糖率显著高于AA基因型(P<0.05);AG、GG基因型个体的平均体细胞数显著低于AA基因型(P<0.05)。【结论】STAT5a基因第10内含子存在1个多态性位点,与湖羊总产奶量、平均乳糖率和平均体细胞数均有显著关联性。

花椒籽对蛋鸡生产性能、血清指标及蛋品质的影响

试验旨在研究饲粮中添加花椒籽对蛋鸡生产性能、血清指标和蛋品质的影响。试验选择42周龄的京粉6号蛋鸡360只,随机分为2组,每组6个重复,每个重复30只。对照组(CON组)饲喂基础饲粮,试验组(ZBMS组)饲喂使用2%花椒籽替代基础饲粮中的玉米的饲粮。预试期7 d,正式试验期28 d。结果显示:与CON组相比,ZBMS组第1~14、15~28、1~28 d的平均蛋重显著提高(P<0.05),软破蛋率显著降低(P<0.05);ZBMS组蛋鸡血清谷草转氨酶(AST)活性及白细胞介素-1β(IL-1β)、干扰素-γ(IFN-γ)水平均显著降低(P<0.05),白细胞介素-4(IL-4)水平、总抗氧化能力(T-AOC)均显著提高(P<0.05)。与CON组相比,ZBMS组第28 d时的蛋黄色泽显著提高(P<0.05);ZBMS组鸡蛋中棕榈油酸、亚油酸、α-亚麻酸、山嵛酸和二十二碳六烯酸(DHA)的含量均显著提高(P<0.05),肉豆蔻酸、十七碳酸、硬脂酸、反油酸、油酸、二十碳一烯酸、附子酯酸和花生三烯酸的含量均显著降低(P<0.05)。研究表明,使用2%花椒籽替代玉米可增强蛋鸡免疫力和抗氧化能力,提高蛋重,降低软破蛋率,提升蛋黄色泽和蛋黄比率,增加鸡蛋中多不饱和脂肪酸的含量。