激活态雪旺细胞源性神经营养因子对脐血间充质干细胞分化的影响

目的观察激活态雪旺细胞（ASCs）分泌神经营养因子对诱导人脐血间充质干细胞（HUCBMSCs）神经方向分化的作用。方法采用双酶消化组织块法结合机械分离法分离培养ASCs；Ficoll法分离得到人脐血单个核细胞（HCMNCs）并经贴壁培养、分离后获得HUCBMSCs。采用全反式微甲酸＋碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）＋表皮生长因子（EGF）（对照组）、ASCs培养基半量换液法（实验组）。应用免疫组织化学、蛋白印迹法（Westernblot）半定量、荧光实时聚合酶链反应（Real—timePCR）[神经纤维200（NF200）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、髓磷脂碱性蛋白（MBP）]定量分析等方法在诱导培养后1、2、3、4周进行综合评价HUCBMSCs诱导分化，对实验结果进行统计学分析。结果免疫组织化学染色结果证实HUCBMSCs在ASCs和全反式微甲酸及bFGF、EGF的作用下向神经源性细胞分化。不同诱导时间细胞阳性率、Westernblot半定量、Real—timePCR定量分析结果显示差异有统计学意义（P〈0．05），而同一时间内两种诱导方法比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论ASCs可以分泌多种神经营养因子并促进HUCBMSCs向神经源性细胞分化，与传统全反式微甲酸诱导方法比较更简单。