MAPK通路对胚胎干细胞向心肌细胞分化的作用

目的研究促分裂素原活化蛋白激酶(MAPK)通路对胚胎干细胞诱导分化心肌细胞的影响。方法采用10-4M维生素C诱导小鼠R1胚胎干细胞分化为心肌细胞。以未经处理ESC心肌细胞分化(ESCM)相应时间点的总RNA作对照组,20μM细胞外信号调节激酶(ERK)特异性抑制剂PD98059和20μM p38 MAPK特异性抑制剂SB203580孵育细胞,诱导分化后期通过计数搏动拟胚体的比率和实时定量聚合酶链式扩增反应(RT-PCR)和免疫印迹(Western Blotting)检测心肌标志物的表达确定其作用。结果与对照组相比,诱导分化第14天,SB203580组搏动拟胚体比率显著降低(24%vs.56%,P=0.025);RT-PCR和Western Blotting结果表明SB203580、PD98059组均可下调心肌特异性标志物表达,SB203580组更加明显。结论 MAPK通路与心肌细胞分化有关,以p38信号通路为主。