不同水系绒螯蟹线粒体DNA的遗传差异和群体遗传多样性研究

对中国大陆6水系10个地区中华绒鳌蟹和合浦绒螯蟹自然群体及1个俄罗斯地区日本绒鳌蟹群体中共289个个体的线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅰ进行了RFLP分析。选用8种能识别4碱基的限制性内切酶AluⅠ，DpnⅡ，HaeⅢ，MspⅠ，MseⅠ，RsaⅠ，TaqⅠ和TasⅠ及3种能识别6碱基的限制性内切酶ApaⅠ，NdeⅠ和VspⅠ对该基因片段酶切后，在11个群体中共检测到15种复合单倍型，其中复合单倍型1为除合浦绒鳌蟹以外的群体所共有，并均以该复合单倍型为主（46．4％～96．7％），复合单倍型4在合浦绒鳌蟹群体中占有很大比例（91．7％）；合浦绒螯蟹与中华绒螯蟹北方水系（黄河、海河、辽河）的遗传差异最为明显（Pnet=0．060～0．061）；不同水系中华绒螯蟹及合浦绒螯蟹、日本绒螯蟹具有一定的群体内遗传多态性（π=0．0002～0．0167），但并不高。

不同养殖密度下革胡子鲶胃肠道的定量组织学研究

[目的]为革胡子鲶科学的高密度养殖和可持续发展提供参考依据。[方法]研究4种养殖密度(35、65、95、125 kg/m3)下革胡子鲶胃和肠道纹状缘厚度、柱状细胞高、壁厚、肌肉层厚以及肠道杯状细胞大小,分析不同养殖密度对革胡子鲶消化道的组织结构变化的影响。[结果]养殖30 d时,养殖密度仅影响胃和肠道中段的纹状缘厚度。35 kg/m3密度组的胃纹状缘厚度显著低于65、95和125kg/m3密度组。肠中段的纹状缘高在35、65和95 kg/m3密度组间无显著差异,但显著低于125 kg/m3密度组。养殖60 d时,35 kg/m3密度组的肠中段纹状缘显著厚于65、95和125 kg/m3密度组,但粘液细胞则显著小于65、95和125 kg/m3密度组,而65、95和125 kg/m3密度组间纹状缘高度和粘液细胞大小差异不显著。35 kg/m3密度组与65 kg/m3密度组、95 kg/m3密度组与125 kg/m3密度组肠中段和肠后段的肠壁厚和肌肉层厚无显著差异,但35和65 kg/m3密度组显著高于95和125 kg/m3密度组。[结论]养殖密度仅对革胡子鲶胃、肠道组织结构的少量测量指标有影响,与革胡子鲶的高耐受性和适宜高密度养殖的特点相一致。

养殖密度对革胡子鲶生长性能及补体C3·C4的影响

[目的]研究养殖密度对革胡子鲶生长性能及血清补体C3、C4的影响。[方法]以体重(30.71±0.89)g革胡子鲶为试验对象,测定4种养殖密度(35、65、95、125 kg/m3)下革胡子鲶生长性能及血清补体C3、C4的变化。[结果]养殖60 d后,随着养殖密度升高,革胡子鲶终末重、日增重均呈下降趋势,其中35 kg/m3与65 kg/m3密度组间差异不显著(P>0.05)。各密度处理组间饵料系数均无显著差异(P>0.05)。低密度处理组(35 kg/m3与65 kg/m3)与高密度处理组(95 kg/m3与125 kg/m3)间死亡率差异显著(P<0.05)。养殖密度对补体C3、C4的影响不显著(P>0.05)。[结论]65 kg/m3可推荐为革胡子鲶的最佳养殖生产密度。

果核泥龟的单元式养殖技术

通过对黄喉拟水龟等龟种小规模家庭养殖方法的参考和借鉴,探索出一种能满足多种养殖规模需求且简易可行的果核泥龟养殖技术——单元式养殖技术,并对果核泥龟亲龟的饲养、繁殖管理及龟卵孵化、稚龟培育等关键技术进行了总结。在单元式养殖模式下,4年养殖期内果核泥龟亲龟的存活率达100%,并且连续3年繁殖成功,共获得稚龟12只。

嗜水气单胞菌灭活疫苗对虹鳟免疫力和抗病力的影响

为研究嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)灭活疫苗对虹鳟(Oncorhynchus mykiss)(250 g±12 g)免疫力和抗病力的影响,给试验鱼腹腔注射0.2 mL的灭活嗜水气单胞菌悬液(1.0×108cfu/mL)。分别在注射前(0 d)和注射后7、14、21、28、35、42 d取样,测定血液白细胞吞噬活性、血清溶菌酶(LZM)活力、补体C3含量以及头肾和脾脏中IgM、IgT基因表达情况。结果表明:注射嗜水气单胞菌疫苗能显著提高白细胞吞噬率(PP)和吞噬指数(PI)、LZM活力和补体C3含量,注射后21 d达峰值,PI、LZM和补体C3在42 d仍显著高于对照组。免疫后21 d头肾和脾脏中IgM基因上调表达,35 d达峰值(分别上升24倍和26倍),42 d下降但仍极显著高于对照组。头肾和脾脏中IgT的上调表达比IgM弱得多,头肾35 d达峰值(上升6.2倍),脾脏28 d达峰值(上升6.1倍)。免疫42 d后嗜水气单胞菌攻毒结果表明,嗜水气单胞菌灭活疫苗对虹鳟有较高的免疫保护作用,免疫保护率达到71.43%。

小檗碱对铜绿微囊藻细胞膜通透性的影响

研究了小檗碱对铜绿微囊藻藻细胞Ca2+、Mg2+渗出量及Ca2+Mg2+-ATPase活性的影响。结果表明,藻细胞Ca2+、Mg2+渗出量随着小檗碱浓度及处理时间增加而逐渐增加,当藻液中小檗碱的浓度为10 mg/L,处理时间超过12 h时即可显著增加铜绿微囊藻Ca2+和Mg2+离子渗出量(P<0.05);而Ca2+Mg2+-ATPase活性随小檗碱浓度及处理时间增加而逐渐降低,与对照组相比,10 mg/L小檗碱处理组3 h时Ca2+Mg2+-ATPase活性均显著低于对照组(P<0.05)。推测小檗碱能够增加铜绿微囊藻细胞膜通透性,藻细胞内容物外流,进而抑制铜绿微囊藻生长。

饲料中不同蛋能比对黄金鲫幼鱼生长和体组成的影响

试验旨在研究不同蛋白能量比的饲料对黄金鲫幼鱼生长和体组成的影响。以初始体重为(7.50±0.02)g的黄金鲫幼鱼为试验对象,随机分为9组,每组设3个重复,每个重复30尾鱼,分别投喂由3种不同的蛋白水平(30%、35%、40%)和3种不同的脂肪水平(6%、8%、10%)组成的9种不同蛋能比(从21.6~30.9 mg/kJ)的试验饲料,进行为期8周的生长试验。结果表明,饲料蛋白水平显著影响黄金鲫的生长、饲料效率和蛋白质效率(P<0.01),随着饲料蛋白含量的增加,黄金鲫的增重率和特定生长率显著提高,最高值均发生在蛋白/脂肪为40/10(29.2 mg/kJ)组,显著高于饲料蛋白含量为30%的各组(P<0.05),与蛋白含量为35%的各组之间没有显著差异(P>0.05)。同样的,饲料效率随着蛋白含量的增加也显著提高,蛋白/脂肪为35/8(26.5 mg/kJ)和40/10组的饲料效率最高。蛋白质效率最高值发生在蛋白/脂肪为35/8组,显著高于蛋白含量为40%的处理组,但与其它组没有显著差异。饲料不同蛋能比对鱼体水分没有显著影响,鱼体脂肪含量与饲料脂肪含量正相关。综合试验结果,黄金鲫适宜的蛋能比水平为25.5~26.5 mg/kJ,蛋白质为35%,脂肪为6%~8%。

鱼类功能性氨基酸营养免疫研究进展

研究表明,部分氨基酸除能合成蛋白质外,对多种生物活性物质的合成也是必需的,功能性氨基酸的概念由此提出。功能性氨基酸对动物的营养代谢和免疫功能具有重要的调节作用,近年来的研究也表明,功能性氨基酸在鱼类的免疫系统调节中也发挥着重要的作用,就功能性氨基酸对鱼类免疫功能的影响进行概述。

革胡子鲶体表粘液抗菌肽的分离与纯化及抑菌活性研究

[目的]分离纯化革胡子鲶体表粘液抗菌肽,并分析其抑菌活性。[方法]通过硫酸铵沉淀、Sephadex G-50凝胶层析,对高密度养殖的革胡子鲶体表粘液中的抗菌肽进行了初步的分离及纯化,并分析其抑菌活性。[结果]经Sephadex G-50凝胶层析分离得到2个洗脱峰,经检测这2个洗脱峰对迟缓爱德华氏菌抑制作用最强,对嗜水气单胞菌抑制作用次之,对大肠杆菌的抑制作用最弱;对同种菌而言,洗脱峰2的抑菌效果强于洗脱峰1。通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,洗脱峰1显示3条蛋白主带,并以9.5kD的蛋白含量最高,而洗脱峰2中所含蛋白的分子量应小于4.1kD。[结论]为探讨高密度养殖条件下革胡子鲶的抗病机理奠定了基础,同时有望为研制和开发新型的水产饲料添加剂和抑菌药物奠定基础。

TTPC对铜绿微囊藻生长及生理的影响

试验设定了6个TTPC浓度梯度处理组和1个对照组,研究十四烷基三丁基氯化鏻(TTPC)对铜绿微囊藻(FACHB469)生长及生理的影响。结果表明当TTPC浓度超过0.6 mg/L时能有效地抑杀铜绿微囊藻,当TTPC浓度为0.8 mg/L,藻细胞与药剂接触时间96 h,相对抑制率达84.68%,同时铜绿微囊藻的可溶性蛋白质量分数、叶绿素a含量及总糖质量分数与对照组相比均显著下降(p<0.05)。根据以上实验结果,我们结果推测TTPC杀藻机理可能是通过阻碍藻细胞生命活动所必需的蛋白合成,抑制叶绿素a的合成,导致藻细胞生命活动所需糖类等物质含量急剧降低,从而使藻细胞生命过程受到阻塞,最终破坏整个藻细胞。

不同群体毛蚶rDNA转录间隔区RFLP及序列分析

对3个地理种群毛蚶核糖体ITS区进行RFLP分析,并对其ITS-1端进行序列分析。未见ITS区具有限制性片段长度多态性,在ITS-1端564bp的序列中多态位点为3.37%,表明毛蚶的遗传多样性很低,但3个群体的遗传多样性由高到低为塘沽、大连和宁波样本。依据564bp序列构建的NJ聚类图显示大连和塘沽样本的亲缘关系相对较近。564bp序列中C、G、A和T的含量平均分别为24.90%、26.89%、22.18%和26.09%。

铜绿微囊藻在光限制胁迫下的超补偿生长响应

采用铜绿微囊藻为试验材料,将其经光限制(完全黑暗)胁迫处理7d,以光照强度为3000lx、光暗周期为12h∶12h的培养组为对照。然后解除光限制胁迫,在相同接种量和相同培养条件下,将处理组和对照组均置于3000lx光照条件下培养10d。试验过程中测定铜绿微囊藻的吸光度、细胞密度、叶绿素a和细胞内蛋白质含量等指标。在光限制胁迫过程中,处理组的藻液吸光度、藻细胞密度、平均相对生长率、细胞数净增长率、叶绿素a含量及藻细胞直径较对照组均显著降低,但藻细胞蛋白质含量显著高于对照组。在恢复光照10d的培养过程中,处理组的藻液吸光度、藻细胞密度、平均相对生长率、细胞数净增长率及叶绿素a含量较对照组均显著升高,而藻细胞直径和蛋白质含量与对照组差异不显著。试验结果说明铜绿微囊藻在光限制胁迫后具有明显的超补偿生长性能。

利氏才女虫幼体发育的研究

对利氏才女虫Polydora ligni幼体的发育过程及各发育阶段形态结构特点作了观察研究,结果表明在温度(16±3)℃下,卵在卵袋中经过4d发育成3刚节浮游幼体后进入水体开始浮游生活,13d后14刚节的浮游幼体开始变态,19d发育成21刚节后开始沉落转为底栖生活,21d后23刚节的底栖幼体完成变态营管栖生活。

12种中草药对牙鲆幼鱼的诱食效果的研究

牙鲆（Paralichthys olivaceus）,属硬骨鱼纲,鲽形目,鲽亚目,鲆科,牙鲆亚科,牙鲆属,是名贵的海产鱼类,具有很高的医用价值和经济价值。是中国重要的海水经济鱼类之一。目前,国内牙鲆养殖业方兴未艾,近年已逐渐由海面网箱转向室内工厂内设施化养殖,但养殖过程中牙鲆营养需求、疾病、

16种中草药对凡纳滨对虾诱食效果的研究

凡纳滨对虾，又名南美白对虾。凡纳滨对虾是当今世界养殖产量最高的三大虾类之一。

刺参夏季保苗期水质管理实用新措施

刺参育苗包括孵化浮游期和板上附着期,从上板大概20天后至参苗剥离即属于保苗期。保苗期恰值夏季高温期,此期水环境变化剧烈,水温通常在22℃～30℃左右,时间持续约3个月。此期间经常出现病害迹象,导致参苗长势缓慢甚至成活率明显下降。病害主要表现症状：

磷酸盐缓冲液的浓度和pH对革胡子鲶肠道抗菌蛋白/肽分级盐析的影响

[目的]探讨磷酸盐缓冲液的pH和浓度在分级盐析时,对革胡子鲶肠道各组分蛋白/肽的影响。[方法]以不同浓度和pH的磷酸盐缓冲液作为组织匀浆缓冲液,在硫酸铵饱和度为20%、40%、60%、80%和100%的条件下,对革胡子鲶肠道抗菌蛋白/肽进行分级盐析,并对盐析产物进行称重、电泳检测和抑菌活性分析。[结果]磷酸盐缓冲液的pH为6.0或7.4时,其浓度对盐析产物产量、蛋白沉淀和抑菌效果无显著影响。而pH为8.0、浓度为0.05 mol/L时,硫酸铵饱和度为60%和100%的粗蛋白/肽的产量显著高于浓度为0.02 mol/L的磷酸盐缓冲液粗蛋白含量;大分子蛋白能更好地在硫酸铵饱和度为20%和40%时沉淀下来,而在饱和度为60%、80%和100%能获得分子量相对较小的抗菌蛋白/肽。磷酸盐缓冲液的pH和浓度对抑菌效果无显著影响。[结论]pH8.0,浓度为0.05 mol/L的磷酸盐缓冲液更适于革胡子鲶肠道抗菌蛋白/肽的提取。