正交实验优化独活总香豆素的渗漉提取工艺

[目的]研究独活总香豆素的最佳渗漉提取工艺。[方法]采用L9(34)正交实验法,考察乙醇浓度、料液比、浸泡时间对独活提取物中蛇床子素、二氢山芹醇乙酸酯、二氢山芹醇、二氢山芹醇当归酸酯含量的影响。[结果]乙醇浓度为影响独活总香豆素渗漉提取效果的主要因素,最佳提取工艺为75%乙醇,料液比为1∶8,浸泡8 h。[结论]此方法可作为独活总香豆素的最佳渗漉提取工艺。

中药独活中总香豆素高通量分析方法的建立

建立中药独活中总香豆素的含量测定的高通量的分析方法。方法:采用紫外分光光度法,检测波长为320nm对中药独活药材中的总香豆素进行测定。结果:采用该方法可准确测定中药独活药材中总香豆素的含量,蛇床子素在3.0-60μg/mL范围内,吸光度与浓度的线性关系良好(r=0.9995),样品平均回收率为98.1%,精密度RSD为0.27%,稳定性RSD为0.9%(24h),重复性RSD为1.83%。结论:该方法简单、准确,可用于中药独活药材中总香豆素的含量测定。

左金丸总生物碱对束缚水浸应激性胃溃疡模型大鼠神经体液调节的影响

目的左金丸是黄连和吴茱萸按6∶1配伍组成,临床常用于胃溃疡的治疗。该文主要探讨左金丸总生物碱(ZJP-TA)对束缚水浸应激性胃溃疡模型大鼠神经体液调节的影响。方法采用束缚水浸法复制大鼠胃溃疡模型,测定ZJP-TA对大鼠胃溃疡指数,胃黏膜TNF-α含量的影响。测定大鼠海马、皮质、下丘脑、纹状体等脑区中单胺类神经递质5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)及其代谢产物5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)含量以及肾上腺组织中NE和肾上腺素(E)含量的影响。结果预先口服ZJPTA可明显降低应激性胃溃疡大鼠的溃疡指数,明显降低胃黏膜中TNF-α的含量。各剂量ZJPTA可不同程度降低大鼠脑组织单胺类神经递质的浓度,与模型组比较差异具有显著性(P<0.05或P<0.01)。模型组肾上腺组织NE和E含量明显升高,ZJPTA能明显抑制其升高(P<0.05或P<0.01)。结论 ZJPTA可通过神经体液调节作用,对抗应激性胃溃疡损伤。

顶空气相色谱-质谱联用法分析粪便中挥发性脂肪酸

建立了一种快速分析粪便中挥发性脂肪酸（Volatile fatty acids,VFAs）的顶空气相色谱-质谱联用法（Headspace gas chromatography-mass spectrometry,HS-GC/MS）.粪便样品用6％ H3P04溶液按1∶2（m/V）混悬后密封于顶空进样瓶中,直接进行HS-GC/MS检测.顶空振荡室加热温度为80℃,振荡加热时间30 min,顶空进样针温度为80℃,不分流进样1 mL;采用DB-FFAP毛细管柱（30 m＆#215;0.25 mm＆#215;0.25 μm）,进样口温度为250℃,升温程序（初始温度50℃保持1 min,以10℃/min升至200℃）,载气（高纯氦）流速为1.0 mL/min;使用电子轰击（Electron impact,EI）离子源,电子能量为-70 eV,离子源温度为250℃,传输线温度为280℃,电子倍增器电压为0.95 kV,全扫描模式,扫描范围m/z 33 ～ 200.结果表明,本方法能够应用于人及大鼠粪便中挥发性脂肪酸的分析,通过NIST标准谱库检索,采用对照品比对以及质谱数据解析的方法,在人的粪便样品中检测到9种挥发性脂肪酸：乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸、异己酸、己酸、庚酸;在大鼠粪便中检测到8种挥发性脂肪酸：乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸、己酸、庚酸.通过峰面积归一化法,计算得到乙酸、丙酸、丁酸的相对百分含量约占挥发性脂肪酸总量的85％.本方法简单、灵敏,可用于人和大鼠粪便中挥发性脂肪酸的快速检测.

紫叶李果实的化学成分研究

采用硅胶、ODS和Sephadex LH-20柱色谱等方法对紫叶李果实95%乙醇提取物进行提取分离纯化，运用IR、UV、1H NMR、13C NMR、HMBC、HSQC等波谱学技术鉴定5个化合物：3-O-乙酰基原儿茶酸（1）、2（R）-羟基丁二酸-1-甲酯（2）、3,3′,4,4′-四羟基联苯（3）、β-胡萝卜苷（4）和槲皮素（5）。化合物1～4是首次从该植物中分离得到，其中化合物1为新天然产物，并且首次报道化合物1的1H NMR，13C NMR数据。对已分离的5个化合物进行了DPPH自由基清除实验，结果显示化合物3、5具有潜在的抗氧化活性。

生甘草与炙甘草的抗氧化能力比较研究

[目的]对生甘草与炙甘草的抗氧化能力进行比较。[方法]采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基法、铁离子还原法、总抗氧化能力测试(ABTS法)以及福林试剂法测定药物的抗氧化能力。[结果]生甘草与炙甘草均具有DPPH自由基清除能力、铁离子还原能力和总抗氧化能力。[结论]生甘草与炙甘草均具有良好的体外抗氧化活性,实验表明炙甘草的抗氧化能力大于生甘草并且具有统计学差异(P<0.01)。

高效液相色谱法同时测定独活中七种有效成分含量及在质量评价中应用(英文)

利用1.8μm颗粒的色谱柱建立了HPLC法同时测定独活中六种香豆素和一种倍半萜衍生物含量的分析方法.研究结果表明,七种有效成分在线性范围内线性关系良好,回收率在95.8-101.9%范围之内,最低检出限和定量限分别低于0.06和0.14μg/mL;化学计量学的方法(相似度分析和聚类分析)可用于评价不同来源的独活的质量.本项研究验证了多组分含量测定和化学计量学方法联用可用于独活药材的质量控制,为独活药材的质量评价提供了研究手段.

青蒿组分的体外抗氧化活性研究

目的研究青蒿水提取物抗氧化活性及物质基础,为天然抗氧化剂开发利用提供理论依据。方法采用传统加热回流提取法,用水作为提取溶剂对青蒿中抗氧化成分进行提取,并利用溶剂萃取、D101大孔树脂等分离手段对水提取物进行组分划分,进行DPPH自由基清除活性评价及铁离子还原能力、亚铁离子螯合能力、总酚酸和总黄酮的测定。结果从青蒿水提取物中制备得到11个组分,且70%乙醇洗脱液(S10)、乙酸乙酯萃取物(S6)、大孔树脂20%乙醇洗脱液(S9)的抗氧化活性较高,与其所含的总酚酸和总黄酮密切相关。结论本研究明确了青蒿中大孔树脂70%乙醇洗脱液(S10)、乙酸乙酯萃取物(S6)、大孔树脂20%乙醇洗脱液(S9)为青蒿水提取物抗氧化活性物质基础,为今后青蒿资源在天然抗氧化剂的开发和应用奠定基础。

气相色谱-质谱联用法分析粪便中碱性和中性挥发性代谢产物

建立了一种快速分析人和大鼠粪便中碱性和中性挥发性代谢产物的气相色谱-质谱联用法(GC-MS)。粪便样品采用75%甲醇溶液提取,加入氨水,使溶液中氨水的终浓度为1%(p H=10)后,GC-MS检测分析。采用CP-Sil 5毛细管柱(25 m×0.25 mm×0.12$m);载气:高纯氦气,流速1 m L/min;程序升温;使用电子轰击(EI)离子源,电子能量:-70 e V;进样口温度:220℃,离子源温度:230℃,传输线温度:280℃;电子倍增器电压:0.95 k V,全扫描模式,扫描范围:m/z 10~600;溶剂延迟:3 min。通过检索NIST标准谱库,采用对照品比对及质谱数据解析的方法,在人的粪便样品中检测到11种碱性和中性挥发性代谢产物,在大鼠的粪便样品中检测到7种碱性和中性挥发性代谢产物。本方法处理过程简单,灵敏度高,适用于人和大鼠粪便中碱性和中性挥发性代谢产物的快速分析。

青蒿愈伤组织的诱导及化学成分变化规律研究

[目的]建立青蒿愈伤组织快速繁殖的适宜培养基,测定其生长过程中次生代谢产物奎宁酸类化合物和香豆素类化合物的含量变化。[方法]无菌条件下切取花序、叶和叶柄为外植体,接种于MS添加不同激素组合的培养基,进行诱导及继代增殖培养,测定奎宁酸类化合物和香豆素类化合物的含量。[结果]建立了青蒿花序、叶和叶柄愈伤组织快速繁殖的适宜培养基,绘制相对应的生长曲线,并确定了生长过程中次生代谢产物奎宁酸类化合物和香豆素类化合物的含量变化及最佳采收期。[结论]通过组织培养方式可以成功获得青蒿愈伤组织生长曲线和生长过程中次生代谢产物的变化规律,对传统中药青蒿培养体系优化及工业化规模生产进行探索提供了一个新途径。

丹参酮Ⅰ脂质体的制备及表征

[目的]制备丹参酮Ⅰ脂质体,并对其包封率、粒径、电位等理化性质进行考察。[方法]采用薄膜分散法丹参酮Ⅰ脂质体,用琼脂糖凝胶柱色谱法和紫外分光光度法测定包封率,用差示扫描量热法检测丹参酮Ⅰ脂质体各组成物质的相变过程。[结果]丹参酮Ⅰ在1.004~6.024μg/m L范围内线性关系良好（r=0.999 9）,琼脂糖凝胶柱色谱法能有效分离脂质体和游离药物,加样回收率为（98.23±0.02）%,平均包封率为（92.56±0.39）%,粒径为（90.64±1.21）nm,电位为（-35.37±0.84）m V。[结论]薄膜分散法可用于制备丹参酮Ⅰ脂质体,制备的丹参酮Ⅰ脂质体的包封率高,粒径均一,电位稳定,药物含量和包封率测定方法准确可靠,专属性强。

小果蔷薇果实的化学成分研究

目的:研究小果蔷薇果实的化学成分。方法:应用柱色谱技术对小果蔷薇(Rosa cymosa Tratt.)干燥果实的75%醇提物进行分离纯化,经过1H-NMR以及13C-NMR等波谱学技术以及参考文献鉴定化合物结构。结果:分离得到7个化合物,分别鉴定为:白桦脂酸(1)、白桦脂酸甲酯(2)、3β-O-乙酰基白桦脂酸(3)、熊果酸(4)、3β-O-乙酰基熊果酸(5)、3β-O-乙酰基坡模醇酸(6)以及β-谷甾醇(7)。结论:化合物1-6是首次从该植物中分离得到。

两种黄芩苷眼用制剂防治硒性白内障作用研究

[目的]考察黄芩苷眼用固体脂质纳米粒(BA-SLNs)、黄芩苷眼用固体脂质纳米粒凝胶(BA-SLNsG)抗硒性白内障作用。[方法]采用12日龄Wistar乳鼠制造硒性白内障模型。给药组眼内分别滴入20μL治疗药物,空白组和模型组分别给予同体积生理盐水,阳性组给予同体积白内停,每天给药4次,持续8 d,观察每日大鼠晶状体变化。测定超氧化物歧化酶活性(SOD)、谷胱甘肽(GSH)含量并采用蛋白免疫印迹方法初步考察两种黄芩苷眼用制剂对αA-晶状体蛋白(αA-Crystallin)表达的影响。[结果]两给药组大鼠晶状体浑浊程度明显轻于模型组。空白组和给药组SOD活性明显高于模型组(P<0.01);各组GSH含量也高于模型组(P<0.05)。蛋白免疫印迹结果表明模型组晶状体中αA-Crystallin表达量均高于其余各组。[结论]BA-SLNs、BA-SLNsG均能有效提高晶状体抗氧化能力,下调αA-Crystallin表达,延缓白内障发病,可进一步开发成临床药物。

超声波法提取独活总香豆素工艺研究

采用超声波法提取中药独活总香豆素,以乙醇溶液为香豆素的提取溶剂,通过正交试验考察了乙醇提取浓度、超声时间、液料比对独活总香豆素得率的影响,结果表明,各因素对对独活总香豆素得率的影响大小依次为:乙醇提取浓度>超声时间>液料比;优化的提取工艺参数为:60%乙醇,料液比1:80,超声提取40min,此条件下独活总香豆素含量2.29%。

三七总皂苷对杠柳毒苷药代动力学的影响

[目的]建立液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)定量分析方法,考察三七总皂苷对杠柳毒苷在大鼠体内的药动学影响。[方法]将18只大鼠随机分成杠柳毒苷单独给药组、杠柳毒苷和低剂量三七总皂苷配伍组、杠柳毒苷和高剂量三七总皂苷配伍组,大鼠连续口服给药7 d,在最后1次给药前和给药后不同的时间点从眼底静脉丛取血,采用LC-MS/MS法,以补骨脂素为内标,测定大鼠体内杠柳毒苷的含量,并运用DAS 1.0软件计算待测物的药动学参数。[结果]杠柳毒苷在1~500 ng/mL的范围内线性关系良好,方法学符合要求。药动学结果表明,杠柳毒苷配伍三七总皂苷后,杠柳毒苷在大鼠血浆中的主要药动学参数C_(max)、AUC_(0-t)、AUC_(0-∞)与杠柳毒苷单独给药相比存在统计学差异。[结论]本研究所建立的LC-MS/MS方法快速、灵敏、准确,可用于杠柳毒苷在大鼠体内的药动学研究。三七总皂苷对杠柳毒苷在大鼠体内的药动学存在影响。

芍药苷稳定性研究

研究pH值、温度、光照对芍药苷的影响以及其在生物样品中的稳定性。采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定芍药苷在不同化学条件下及生物样品中的浓度。结果发现,芍药苷的稳定性受强碱和温度影响明显,光照影响不明显。芍药苷在肝脏、肾脏、心脏等的组织匀浆液中相对稳定,而在尿液、胆汁和血浆中有降解趋势,且降低温度可减少芍药苷在生物样品中的降解。因此,生物样品的采集、处理和保存均应在低温下进行,在处理过程中要避免接触碱性环境,需将采集的生物样品冷冻保存。

Beagle犬脑脊液-血浆-粪便中短链脂肪酸分析

目的：研究生理状态下Beagle犬脑脊液中的短链脂肪酸及与血浆-粪便中短链脂肪酸的关系。方法：采用顶空气相色谱-质谱联用法快速分析Beagle犬脑脊液-血浆-粪便中的短链脂肪酸。Beagle犬脑脊液、血浆、粪便样本密封于顶空进样瓶中,直接用于HS-GC/MS检测。加热炉温度80℃,顶空进样环温度100℃,传输管温度150℃,振荡加热时间20 min,顶空进样1 m L;采用DB-FFAP毛细管柱（30 m×0.25 mm×0.25μm）,进样口温度250℃,升温程序（初始温度50℃保持1 min,以10℃·min^-1升至200℃）,载气（高纯氦）流速1.0 m L·min^-1;电子轰击（electron impact,EI）离子源,电子能量-70 e V,离子源温度250℃,接口温度250℃,电子倍增器电压0.91 k V,全扫描模式,扫描范围m/z 33~200。结果：通过对照品比对和NIST标准谱库检索,在Beagle犬脑脊液中鉴定了乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸、己酸7个短链脂肪酸,经面积归一化乙酸占90.12%±2.79%;血浆中检测到7个相同的短链脂肪酸,经面积归一化乙酸占85.01%±3.28%;粪便中鉴定了8个短链脂肪酸：乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸、异己酸、己酸,经面积归一化乙酸占41.57%±5.08%。结论：脑脊液中短链脂肪酸的种类和比例与血浆中的基本一致,均以乙酸为主;粪便中的短链脂肪酸以乙、丙、丁酸为主。顶空气相色谱-质谱联用法可用于Beagle犬脑脊液-血浆-粪便中短链脂肪酸的快速检测。

柱前衍生RP-HPLC法分析淡豆豉和大豆中氨基酸

目的分析淡豆豉Sojae Semen Preparatum和大豆Glycine max中游离及水解氨基酸。方法用0.1 mol/L HCl作溶剂超声提取得到淡豆豉和大豆中的游离氨基酸;用6 mol/L HCl水解提取得到水解氨基酸,以异硫氰酸苯酯(PITC)为柱前衍生化试剂,采用柱前衍生RP-HPLC法进行分析。结果淡豆豉和大豆中均含有16种氨基酸,这16种氨基酸浓度在0.031～1.750 mmol/L内呈良好的线性关系,r均大于0.997 9,平均回收率91.02%～102.04%,RSD1.01%～4.81%。结论本方法灵敏、准确,具有良好的重复性和稳定性,16种氨基酸能在样品杂质量较多的情况下得到分离,且采用普通C18色谱柱成本低,可广泛应用于富含氨基酸样品的分析。

基于微载体技术的生物人工肝研究进展

在无法进行肝移植的情况下,肝衰竭的发病率和死亡率均较高.人工肝支持系统,特别是生物人工肝,则可促进肝衰竭恢复或作为肝移植的过渡辅助.生物人工肝中含肝细胞的生物反应器可提供生物转化和肝脏的合成功能.所使用的肝细胞既可以为人肝细胞也可以为异种肝细胞(动物源性).病人的血液或血浆循环通过生物反应器,由肝细胞代谢去除毒素并产生所需化学成分后,再返回病人体内.随着人类及猪肝细胞长期培养增殖的成功,以及具有充分生物相容性的微载体的发展,单位体积内培养肝细胞的密度在当前已经可以满足生物人工肝系统的需要.以生长在微载体上的肝细胞填充而成的中空纤维生物反应器已得到广泛使用,在不久的将来,生物人工肝支持系统成为肝衰竭治疗的有效方法具有良好前景.