缺血再灌注诱导小鼠肝细胞释放高迁移率族蛋白B1对P38MAPK信号通路的影响

目的探讨P38MAPK通路在缺血再灌注诱导小鼠肝细胞释放高迁移率族蛋白Bl（HMGBl）中的作用及其可能机制。方法建立小鼠肝缺血再灌注损伤模型，分为假手术组（Sham）、缺血再灌注组（IR）与HMGBl释放抑制剂组（GA）。检测各组小鼠血清ALT、TNF-α和HMGBl变化，HE染色观察肝组织病理学改变，TUNEL法检测肝脏细胞凋亡情况，免疫组化与Westernblot法检测HMGBl、P-P38、P38和Caspase-3的表达。结果与Sham组相比，在IR组可见ALT（423．4±99．6）、TNF-α（84．3±21．4）和HMGB1（0．79±0．04）表达增高，而GA组则较IR组降低（P〈0．05）。病理学检查可见IR组肝细胞肿胀、肝窦变窄和灶状坏死等变化，而GA组肝组织病理改变较IR组明显改善。与Sham和GA组相比，IR组HMGB1从细胞核向核外释放增加，并且IR组的细胞凋亡率[（59．3±9．1）％]、肝组织HMGB1、p-P38和Caspase-3的表达水平最高（P〈0．05）。结论缺血再灌注诱导小鼠肝细胞释放HMGBl导致肝细胞损伤的机制可能与通过释放HMGB1而激活P38MAPK通路有关。

缺血再灌注对小鼠肝细胞自噬与干扰素调节因子1表达的影响

目的 探讨缺血再灌注对小鼠肝细胞自噬与干扰素调节因子1（IRF-1）表达的影响,阐述其潜在的分子机制.方法 建立小鼠肝缺血再灌注损伤模型,检测再灌注2、6、12和24 h后各组与假手术组小鼠血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）的变化,同时在光镜下观察肝组织病理学改变,透射电镜下观察肝细胞内自噬体变化.分别利用免疫荧光及TUNEL法检测肝细胞LC3表达及细胞凋亡情况,RT-PCR检测肝组织IRF-1 mRNA表达,蛋白印迹检测IRF-1、Beclin1和LC3蛋白水平.结果 与假手术组相比,缺血再灌注组在各时间点ALT和AST水平均有所增高,于再灌注12 h均达到高峰;病理学检查可见肝细胞肿胀、肝窦变窄、嗜中性粒细胞浸润和灶状坏死等变化.再灌注12h时肝细胞内自噬体明显增多,同时凋亡细胞显著增加;肝组织中IRF-1、Beclin1和LC3的表达增加.结论 小鼠肝缺血再灌注可激活自噬导致肝细胞损伤,其可能与促进IRF-1表达有关.