骨髓干细胞在肝纤维化中的作用

近年来,对骨髓干细胞向肝细胞分化,并对肝纤维化的治疗作用的研究日益增多.随着研究的不断深入有研究者也对这个观点提出反对意见,认为骨髓干细胞没有这种能力,同时还有一些研究者提出骨髓干细胞可以分化成为星状细胞或者成纤维细胞,从而参与肝纤维化的发生.本文将骨髓干细胞在肝纤维化中的作用作一阐述.

硇砂提取液局部注射治疗小鼠肝癌的实验研究

目的:制备一种能够替代无水乙醇的,毒性低、弥散性好、可使肿瘤坏死更完全的硇砂提取液,并观察其对小鼠肝癌细胞系H22的作用。方法:60只昆明鼠随机分为3组,每组20只。右肢腋下接种小鼠肝癌H22 1∶4稀释后的腹水0.1ml。成瘤后分别给以生理盐水(NS),硇砂提取液(N),无水乙醇(E)瘤内注射,1次/d,共4次。4天后处死小鼠,剥离肿瘤组织,称重,计算抑瘤率。抑瘤率=(对照组瘤重-实验组瘤重)/对照组瘤重。取标本作病理检测,并作组织化学乳酸脱氢酶(LDH)、琥珀酸脱氢酶(SDH)染色及免疫组化(bcl-2,Bax,c-myc)染色。结果:硇砂提取液有较好的体内抑瘤作用,与无水乙醇比较,作用较优或相当;瘤内注射可使肿瘤体积显著缩小,甚至坏死,组间对照差异有显著性意义。能够抑制与肝癌生长密切相关的乳酸脱氢酶、琥珀酸脱氢酶的表达;免疫组化染色bcl-2,Bax,c-myc与对照组相比差异无显著性意义。结论:硇砂提取液与无水乙醇相比,有着更好的肿瘤抑制效果,更好的弥散性,能够直接杀灭肿瘤细胞,有可能替代无水乙醇用于肝癌等恶性实体瘤的局部治疗。

胚胎干细胞/诱导多能干细胞向肝细胞诱导分化的研究进展

人胚胎干细胞(ESCs)/诱导多能干细胞(i PSCs)诱导生成的肝细胞为研究肝细胞分化分子机制、肝病细胞模型的建立提供了很好的研究平台,且诱导生成的肝细胞为新药开发、体外研究药物代谢、药物的肝脏毒性及药物间的相互作用提供了很好的细胞来源,有望成为肝细胞移植和生物型人工肝的理想种子细胞来源。但目前ESCs/i PSCs向肝细胞诱导分化过程中,仍存在诱导效率不高及功能较弱等问题,成为诱导来源肝细胞用于基础和临床研究的瓶颈。

干扰素-γ增强肝癌细胞对CTL杀伤敏感性的研究

目的:探讨干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)能否增强肝癌细胞对树突状细胞(dendritic cell,DC)诱导细胞毒T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)杀伤的敏感性,以及该作用与肿瘤细胞HLAⅠ类分子的关系。方法:RT-PCR法检测IFN-γ刺激前后肝癌细胞β2-微球蛋白(β2-microgloblin,β2-m)的mRNA水平变化,流式细胞术检测肝癌细胞HLAⅠ类分子HLA-A2的表达;应用脐血来源的致敏DC诱导CTL细胞毒试验,观察IFN-γ在增强肝癌细胞对特异性CTL杀伤作用敏感性中的作用。结果:IFN-γ可刺激肝癌细胞上调β2-mmRNA水平及细胞表面HLA-A2表达,IFN-γ作用48h后肝癌细胞β2-m mRNA相对光密度值(1.104±0.209)与0h组(0.674±0.135)比较显著增加,t=-2.992,P=0.040。在72和96h仍保持较高水平,其HLA-A2表达增加的幅度与β2-m一致;致敏的脐血来源DC能够在体外诱导CTL特异性地杀伤肝癌细胞,经IFN-γ刺激的肝癌细胞对特异性效应细胞杀伤作用的敏感性显著增强。结论:IFN-γ可使肝癌细胞对DC诱导的CTL杀伤效应的敏感性增加,可能与其上调肝癌细胞β2-m mRNA水平进而增加HLAⅠ类分子的表达有关。

肝切除患者血清对体外培养肝细胞增殖能力的影响

目的通过体外细胞实验观察肝切除患者术前及术后不同时间血清对肝细胞增殖的影响。方法根据所采用的血清不同,将培养的HL-7702细胞分为胎牛血清(FBS)组、术前血清组、术后0.5h、3h、24h和72h血清组,各组细胞在Cell-IQ无标记活细胞影像分析系统中维持培养72h,通过该系统对细胞进行连续计数,绘制出各组细胞扩增曲线,比较各组细胞72h内细胞扩增倍数,对各组培养72h后的细胞进行BrdU免疫荧光染色,比较各组BrdU阳性率。结果细胞扩增曲线显示各组细胞均有增殖,除术后72h血清组外,其余人血清组培养的HL-7702细胞增殖速度均高于FBS组,术后0.5h和术后3h血清组更明显。除术后72h血清组外,各组人血清组HL-7702细胞扩增倍数均高于FBS组,术后0.5h和术后3h血清组扩增倍数高于术前血清组(均P<0.05)。人血清组HL-7702细胞BrdU阳性率均高于FBS组,术后0.5h和术后3h血清组细胞BrdU阳性率高于术前血清组(均P<0.05)。结论肝切除术后外周血清较FBS具有更强的促进肝细胞增殖的能力,肝切除术后早期血清促进肝细胞增殖作用更明显。

三种温控脱细胞载体的制备与性能评估

背景:设计、制备新型温敏高分子三维细胞支架是目前高分子科学研究的热点之一。目的:制备3种不同的温控脱细胞载体,并评估其性能。方法:分别制备共聚异丙基丙烯酰胺温控脱细胞支架、大孔共聚异丙基丙烯酰胺温控脱细胞支架与大孔共聚异丙基丙烯酰胺交联醛基化海藻酸钠温控脱细胞支架,检测3组支架的比表面积、温敏性能、孔隙率、孔径及细胞相容性。结果与结论:共聚异丙基丙烯酰胺温控脱细胞支架、大孔共聚异丙基丙烯酰胺温控脱细胞支架与大孔共聚异丙基丙烯酰胺交联醛基化海藻酸钠温控脱细胞支架的比表面积分别为135,386,421 m2/g,最低临界溶解温度分别为30,28.5,29.5℃,细胞毒性反应分别为2级、2级、1级,说明3种支架均具备温度敏感特性,而且最低临界溶解温度相近;大孔共聚异丙基丙烯酰胺交联醛基化海藻酸钠温控脱细胞支架的细胞相容性明显优于另两种支架。大孔共聚异丙基丙烯酰胺温控脱细胞支架、大孔共聚异丙基丙烯酰胺交联醛基化海藻酸钠温控脱细胞支架的孔隙率与孔径大于共聚异丙基丙烯酰胺温控脱细胞支架(P<0.05),说明大孔共聚异丙基丙烯酰胺温控脱细胞支架与大孔共聚异丙基丙烯酰胺交联醛基化海藻酸钠温控脱细胞支架具有更加明显的孔洞结构。

子宫内膜癌组织中脂联素、抵抗素的表达及意义

目的探讨脂联素、抵抗素在子宫内膜癌发生、发展中的作用。方法选择我院手术切除的子宫内膜癌组织40份(内膜癌组)、子宫内膜不典型增生组织30份(增生组)及正常增殖期子宫内膜组织30份(正常组),采用免疫组化SV两步法检测各组脂联素、抵抗素的表达情况,并分析两指标间及与子宫内膜癌临床病理参数的相关性。结果内膜癌组及增生组的脂联素表达水平明显低于正常组,抵抗素表达水平明显高于正常组,P均<0.01。脂联素表达与子宫内膜癌分化程度及FIGO分期相关,抵抗素表达与分化程度相关。子宫内膜癌中两者表达呈负相关。结论脂联素可能在子宫内膜癌的发生、发展中起抑制作用,而抵抗素可能起促进作用。

核苷(酸)类似物对慢性乙型病毒性肝炎患者肾小球滤过率的影响

目的比较核苷(酸)类似物抗病毒治疗前后对肾小球滤过率的影响,分析可能的影响因素。方法以慢性乙型肝炎患者为研究对象,分为恩替卡韦治疗组(0.5 mg/d)、阿德福韦酯治疗组(10 mg/d)和替比夫定治疗组(600 mg/d)。观察抗病毒治疗52周后各组肾小球滤过率(GFR)的变化,并进行3组患者治疗前后HBeAg血清学转换率、GFR升高≥10 mL/(min.1.73 m2)及治疗后GFR≥90 mL/(min.1.73 m2)的比较,以及出现HBeAg血清学转换患者治疗前后GFR的比较。结果替比夫定组在治疗52周后GFR升高(P<0.05);治疗前后GFR升高≥10 mL/(min.1.73 m2)的患者比例替比夫定组优于阿德福韦酯组(P<0.05)。结论替比夫定抗病毒治疗后慢性乙型肝炎患者GFR得到改善。

姜黄素固体脂质纳米粒干粉吸入剂的制备工艺研究

目的:制备姜黄素(Cur)固体脂质纳米粒(SLN)干粉吸入剂(DPI)。方法:以粒径、多分散系数、包封率和药物沉积率等为指标筛选Cur-SLN的干燥方法(喷雾干燥和冷冻干燥);基于优化后干燥方法,以药物沉积率、排空率、休止角、吸湿增重率、含量均匀度等指标对Cur-SLN-DPI处方(乳糖-干粉比例、单剂量每粒胶囊装量)进行单因素考察并进行验证试验。结果:喷雾、冷冻干燥法所得Cur-SLN的体外有效部位沉积率分别为29.98%和15.69%,以前者为优;优化后的单剂量处方为乳糖-干粉(1∶1)混合物50mg、第3组分乳糖10 mg,填充于4号胶囊中;所制3批干粉各指标平均值为粒径3.35μm、水分4.57%、含量均匀度3.65、体外有效部位沉积率28.73%、排空率95.17%、休止角24.03°、吸湿增重率2.2%(RSD均小于2%,n=3)。结论:建议选用喷雾干燥法制备Cur-SLN;优化处方后所制Cur-SLN-DPI质量符合要求。

Th17/Treg在肝脏疾病中的作用研究进展

辅助性T细胞17（Th17）与调节性T细胞（Treg）细胞有着密切而又复杂的关系,介导炎性反应的Th17与介导免疫耐受的Treg具有共同的起源,都来源于初始T细胞,它们表面的大部分趋化受体均相同[1],但两者的功能和分化过程相互对抗,抑制Th17产生可以促进Treg的分化、发育。

四株肝癌细胞系的抑癌基因甲基化谱分析

目的了解不同人源肝癌细胞系中抑癌基因的甲基化状态,并初步探讨与肝癌发生发展的关系。方法利用甲基化特异性PCR(MSP)技术,选择8个抑癌基因对4种不同类型的肝癌细胞系进行研究。结果通过对4种细胞系的8个抑癌基因甲基化状态分析表明,GSTP1在所有细胞系中均显示甲基化;RASSF1A在SMMC-7721与HepG2中呈现甲基化,而APC在这两个细胞系则是半甲基化状态;P16仅在SMMC-7721中甲基化,SOCS1仅在HepG2中发生甲基化,MGMT仅有HepG2发生半甲基化;RIZ1和DAPK则全部显示未甲基化。结论抑癌基因甲基化谱在不同来源、病理分级和分化程度的肝癌细胞株中各不相同,提示其在基因表达调控中也存在着不同的调节机制,并为体外筛选去甲基化药物诱导肝癌细胞分化模型提供了依据。

间充质干细胞治疗心肌梗死的研究现状

冠心病急性心肌梗死后，大量心肌细胞坏死不能再生，引发左室重构和扩大，最终导致患者心力衰竭死亡。介入和手术治疗虽然可以改善心肌供血，缓解心室重构，但由于不能修复坏死的心肌而效果不佳。

秋水仙碱体外抗乙型肝炎病毒的作用

目的:探讨秋水仙碱在体外抗乙型肝炎病毒(HBV)的作用。方法:以秋水仙碱作用于HBV全基因组转染的人肝癌细胞株(Hep G22.2.15),用罗氏电化学发光免疫分析仪检测HBsAg和HBeAg,用ABI7000荧光定量PCR扩增仪检测细胞内、外HBV-DNA、HBV-共价闭环DNA(HBV-cccDNA)(copies/cell)。数据表示为l g(x珚±s)。结果:(1)秋水仙碱6.25×10-6～1×10-4 mol·L-1能显著抑制Hep G22.2.15产生/分泌HBsAg(P<0.05,P<0.01),IC50=1.473×10-7 mol·L-1,其3.125×10-6和2.5×10-5～1×10-4 mol·L-1能显著抑制Hep G22.2.15产生/分泌HBeAg(P<0.05,P<0.01),IC50=2.387×10-7 mol·L-1,拉米夫定(lamivudine)IC50分别为3.52×10-4 mol·L-1和3.184×10-3 mol·L-1。(2)秋水仙碱和拉米夫定有类似的降低Hep G22.2.15细胞内HBV-DNA的作用(P<0.05),IC50分别为9.747×10-9 mol·L-1和2.649×10-6 mol·L-1。(3)秋水仙碱3.125×10-6和6.25×10-6 mol·L-1能明显减少Hep G22.2.15细胞内和上清液中HBV-cccDNA(P<0.05)。(4)秋水仙碱1.6×10-6～1×10-3 mol·L-1和拉米夫定2×10-4,1×10-3 mol·L-1皆能显著抑制Hep G22.2.15细胞增殖(P<0.05,P<0.01),IC50分别为7.933×10-6 mol·L-1和2.60×10-4 mol·L-1。结论:秋水仙碱在体外具有抗HBV的作用,包括降低HBsAg和HBeAg的产生/分泌,减低Hep G22.2.15细胞内、外HBV-cccDNA水平,减少细胞内HBV-DNA,且主要是由于直接抑制HBV-DNA和HBV-cccDNA的产生。