天津地区丙型肝炎病毒基因型与临床的相关性研究

目的:研究丙型肝炎病毒(HCV)基因型,了解天津地区丙型肝炎的分布情况。方法:收集252例丙型肝炎患者的血清标本,采用基因测序法进行HCV基因型的检测,并对基因型与其他临床指标进行分析。结果:252例丙型肝炎患者分别感染1b、1a、1c、2a、2i、3a、3b、4a和6a共9种基因亚型,其中1b型占59.9%,其次是3a型,占12.7%。对1型、2型、3型和4型4种基因型进行肝功能、HCV RNA病毒载量比较,经单因素方差分析有明显统计学差异(P<0.05);对HCV感染的不同肝病程度患者的基因型分布进行分析,无显著性差异(P>0.05)。结论:天津地区丙型肝炎病毒感染以1b型为主,其次为3a型。HCV基因型与HCV RNA病毒载量、肝脏损伤指标有明显统计学差异。

HPLC/MS分析乙肝相关性肝细胞癌的血清代谢轮廓分析

目的通过HPLC/MS平台探索血清代谢物对于乙肝相关性肝细胞癌(HCC)的诊断价值。方法选取126例就诊于天津市第三中心医院住院患者,包括27例乙肝DNA阴性乙肝肝炎患者、24例乙肝DNA阳性乙肝肝炎患者、24例乙肝肝硬化患者、27例乙肝相关性HCC行手术/射频治疗患者以及24例乙肝相关性HCC行介入治疗患者,另选取查体中心健康志愿者25例为对照组。将血清样本上机所得数据进行前处理,构建正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)模型,基于乙肝组和正常对照组进行代谢物初筛。根据非参数检验的结果,最终筛选和鉴定特征代谢物。利用ROC分析这些特征代谢物的临床潜在应用价值。结果筛选并鉴定出25种特征代谢物,包括9种溶血性磷脂酰胆碱、2种脂肪酸、17α-雌二醇、二氢神经鞘氨醇、5-甲基胞苷、维生素K2、溶血磷脂酸、甘氨胆酸以及报道较少的8种物质。与正常对照组相比,22种代谢物在乙肝相关性HCC组中存在差异表达。与乙肝肝硬化组相比,4种代谢物在乙肝相关性HCC组中存在差异表达。与乙肝相关性HCC行手术/射频治疗组相比,10种代谢物在乙肝相关性HCC行介入治疗组中存在差异表达。从正常对照组到乙肝相关性HCC行介入治疗组,许多代谢物呈相同的变化趋势。结论基于LC/MS平台,本研究成功地构建疾病区分模型并筛选和鉴定出25种特征代谢物,这些代谢物对乙肝相关性HCC具有一定诊断和分期效能。有些特征代谢物呈连续性的变化预示着癌变的可能;有些代谢物对手术方式的选择也具有指导意义。

L-8900氨基酸分析仪血浆氨基酸生物参考区间的建立

目的用国产试剂取代原装试剂并统计得出L-8900氨基酸分析仪血浆氨基酸生物参考区间,为临床诊断提供服务。方法用国产试剂与原装试剂检测标准品和同一批血浆(50例),并进行比较,观察其性能指标(包括分离度和重复性)及准确度;使用国产试剂检测400例健康人的血浆游离氨基酸水平以建立血浆氨基酸生物参考区;同时与肝功能指标进行相关性分析。结果 (1)连续5次检测氨基酸标准品得出其峰分离度高,峰保留时间和峰面积重复性高,国产试剂准确度好。(2)统计得出19种氨基酸的生物参考区间,其中10种氨基酸存在性别差异。(3)丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平与苏氨酸水平呈负相关(P<0.05),血糖(GLU)水平与缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸水平呈正相关(P<0.05),总胆固醇(CHO)水平与异亮氨酸水平呈负相关(P<0.05)。结论国产试剂可以替代原装试剂,在此基础上得出血浆氨基酸生物参考区间对临床诊断及预后具有重要意义。

耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌耐药基因分型

目的分析天津市第三中心医院住院患者临床分离的耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)的菌株类型、耐药机制及耐药基因分型,为临床合理用药提供依据。方法收集医院2016年6月-2017年10月临床分离的CRE菌株23株。应用VITEK-2 Compact全自动微生物分析仪进行细菌鉴定和药敏试验;Carba NP试验检测产碳青霉烯酶类型;PCR技术进行耐药基因blaKPC、blaVIM、blaNDM、blaSME、blaIMP的检测。结果临床分离的23株CRE,肺炎克雷伯菌19株,大肠埃希菌4株;主要来自于尿液和痰标本;药敏结果显示23株CRE均对美罗培南、亚胺培南、厄他培南和头孢他啶耐药;对他唑巴坦的耐药率为95.7%(22/23);NP试验阳性率为73.9%;blaKPC、blaVIM、blaNDM、blaIMP基因阳性,检出率依次为52.2%、30.4%、4.3%、4.3%,未检出blaSME耐药基因。结论天津市第三中心医院患者检出的CRE中,耐药基因主要是blaKPC,其次是blaVIM,医院需对携带blaKPC、blaVIM基因的耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌加强耐药检测,合理使用抗菌药物,并做好防护和消毒措施以防止医院感染和该类细菌的暴发流行。

高效液相色谱-质谱联用定量检测人血清5个溶血磷脂酰胆碱的浓度

目的:利用代谢组学代谢靶标分析技术,建立一种定量检测人血清中溶血磷脂酰胆碱(LPC)类物质的方法。方法:以高效液相色谱与串联质谱联用(HPLC-MS/MS)分析平台,利血平为内标物,构建定量检测LPC14∶0、LPC 15∶0、LPC 16∶0、LPC 17∶0和LPC 18∶0系列物质的检测方法。绘制每种目标LPC对应的标准曲线,分析其相关系数r值,并进一步评估检测平台的灵敏度检测下限(LOD)和线性范围。通过加样回收试验验证检测平台的准确度(加样回收率)和精密度(RSD),并进一步分析该平台在检测人血清标本的适用性。在此基础上,利用该HPLC-MS/MS平台分析了LPC 14∶0～LPC 18∶0 5个LPCs在乙肝相关性肝细胞肝癌(HBV-HCC)患者血清中的浓度。结果:本研究建立了基于HPLC-MS/MS的LPC检测平台,该平台检测稳定性和准确性较高。LPC 14∶0～LPC 18∶0 5个物质的检测下限分别是0.027、0.120、0.320、0.059、0.072μg·mL^(-1);标准曲线方程分别为Y=0.725X-0.002 64、Y=0.212X-0.025 6、Y=1.22X+1.84、Y=0.861X-0.015 5和Y=0.813X+0.558,相关系数分别为0.997 6、0.999 2、0.992 7、0.998 0和0.994 3,测量结果准确度和精密度均控制在85%～115%范围内。利用HPLC-MS/MS平台测定的5个LPC类物质,对不同巴塞罗那期HBV-HCC患者具备一定的鉴别能力。结论:本研究利用HPLC-MS/MS分析平台,成功建立了一个稳定、灵敏而可靠的定量检测人血清中LPC 14∶0～LPC 18∶0 5个目标LPC类物质的检测方法,适合临床推广。

正确的标本采集是准确检测结果的开始

分析前阶段质量保证的重要性是为保证检验结果能真实、客观地反映患者当前病情或健康状态。如1份溶血的血清标本，即使用最好的方法、技术最熟练的人员去检测，其钾的测定值一定是增高的。

妊娠子痫前期患者血清代谢轮廓分析

目的研究妊娠子痫前期患者血清代谢轮廓的变化，建立疾病区分模型并筛选出具有潜在临床诊断价值的特征代谢物。方法病例对照研究。收集2014年8月至2016年1月天津市第三中心医院产科住院确诊的31例子痫前期患者和25名正常妊娠分娩者及29名同期健康体检育龄女性，应用超高效液相色谱与质谱联用仪（UPLC－MS）分别对3组血清样本进行分析，采用基于模式识别的多元统计学方法对实验数据进行分析并对筛选出的差异性特征代谢物变化趋势进行分析。结果构建了妊娠子痫组血清代谢轮廓主成分分析模型及正交偏最小二乘判别模型，同时从模型中筛选并鉴定15种相比对照组在子痫患者血清中存在差异的特征代谢物，其中8种甘油磷脂类物质（包括7种溶血磷脂酰胆碱及1种溶血磷脂酸）及1种鞘磷脂类物质（植物鞘氨醇）在子痫前期组血清相对含量对比正常妊娠组之间有相同变化趋势，差异有统计学意义（Z值分别为2.32、3.34、3.21、2.60、2.22、3.40、3.58、5.84、2.70, P均〈0.05）。子痫前期组中1，25－二羟基－D3－26.23内酯和24－氧代－1－α，23，25二羟基维生素D3的相对含量明显低于正常妊娠组及对照组，差异具有统计学意义（Z值分别为2.01、3.89、3.26、2.34，P均〈0.05）。结论构建代谢轮廓判别模型具有很强的区分子痫前期患者与正常妊娠及健康育龄妇女的能力，筛选出特征代谢物能够早期反映子痫前期患者脂、钙磷代谢的状态，为子痫患者的预测、诊治等提供参考和帮助。（中华检验医学杂志，2017, 40：186－190）