半固体凝胶介质诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化

目的利用半固体凝胶介质诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)向心肌细胞分化,确立一种基于物理特性的心肌细胞诱导分化方法。方法原代分离培养和鉴定BMSCs。以DMEM培养基和低熔点琼脂糖按不同配比配制成6.4%、3.2%、1.6%、0.8%、0.4%和0.2%6种物理密度基质,将BMSCs培养于上述基质。RT-PCR方法检测细胞分化标记基因心肌特异性基因肌球蛋白重链α(α-MHC)和抗小鼠心脏特异性肌钙蛋白T(cTnT)的mRNA水平;细胞免疫荧光方法检测cTnT和α-MHC的蛋白质表达情况。结果 RT-PCR结果显示BMSCs中cTnT mRNA表达峰值出现在物理密度为1.6%的培养基质中,而α-MHC的峰值出现在物理密度为3.2%的培养基质中。细胞免疫荧光结果显示BMSCs在不同密度基质中培养时表达cTnT和α-MHC的总体趋势与RT-PCR结果一致。结论利用半固体凝胶介质可实现将BMSCs向心肌细胞诱导分化。

黄芪多糖通过调节Drp1介导的线粒体分裂改善感染性心肌病

目的从线粒体动力相关蛋白1(Dp1)介导线粒体分裂平衡角度,解读黄芪多糖(APS)对感染性心肌病小鼠的心功能保护作用及机制。方法按随机数字表法将18只成年雄性C57BL/6J小鼠分为对照组、脂多糖(LPS)组和LPS+APS组,每组6只。采用LPS诱导制备感染性:心肌病模型。各组均于术后6h经尾静脉取外周血,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠血清炎性因子水平;LPS处理后24 h行超声心动图检查心室功能,包括左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)、左室舒张期末内径(LVEDD)和左室收缩期末内径(LVESD);检查后即刻处死小鼠取心肌组织,采用蛋白质印迹试验(Western bloting)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、C3a、Drp1、线粒体分裂蛋白1(Fis1)、线粒体融合蛋白2(Mfn2)、视神经菱缩蛋白1(Opa1)蛋白表达。将购买的小鼠心房肌细胞株HL-1分为对照组、LPS组、LPS+APS组和LPS+APS+线粒体氧化磷酸化解偶联剂(FCCP)组。采用活性氧(ROS)检测试剂盒检测分离线粒体及HL-1细胞内的ROS含量:采用线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)检测线粒体膜电位(MMP);采用三磷酸腺背(ATP)检测试剂盒检测HL-1细胞内ATP含量。结果与对照组比较.LPS组小鼠心脏的LVEF、LNFS、LVEDD和LVESD均明显降低.线粒体内ROS含量明显升高,MMP和ATP含量均明显下降;而APS可改善感染性心肌病小鼠的心功能指标[LVEF:0.571±0.026比0.287±0.045.LVFS(%):33.13±2.11比21.22±0.99.LVEDD(mm):3.74±0.10比2.77±0.05.LVESD(mm):2.74±0.09比1.99±0.04.均P<0.05].明显降低心肌内ROS含量[ROS(%):138.39±9.28比260.97±19.22.P<0.05].明显抑制MMP和ATP含量下降[MMP(红色1绿色荧光强度比值):0.91±0.05比0.55±0.01,ATP(%):94.22±10.11比58.74±5.39.均P<0.05),且APS可明显抑制LPS处理后的Drp1和Fis1蛋白过表达以及MIn2和Opal蛋白低表达[Drp1/GAPDH(%):126.33±11.70比218.75±19.44,Fis1/CAPDH(%):105.71±15.77比194.39±5.27,Mfn2/CAPDH(%):92.75±10.44比41.88±3.95,0pa1/CAPDH(%):98.14±3.71比55.94±7.30.均P<0.05]。故进一步采用HL-1细胞构建感染性心肌病模型,HL-1细胞经FCCP处理后可明显抑制APS的保护效应。结论APS通过抑制Drp1过表达,抑制线粒体的过度分裂,减轻感染性心肌细胞的氧化应激和线粒体损伤,最终改善心脏功能,该机制的发现可为感染性心肌病的治疗提供新的理论依据和临床参考。

葛根素通过调节类泛素化修饰平衡改善心肌功能的研究

目的从小泛素样修饰蛋白(SUMO)介导SUMO化修饰平衡角度解读葛根素对心力衰竭(HF)的心功能保护作用及机制。方法通过主动脉缩窄术造成压力超负荷诱导HF,成功构建小鼠HF模型后,小鼠随机分为对照组、模型组、模型+葛根素组、葛根素组,每组6只;HL-1细胞构建HF模型,分为对照1组、模型1组、模型+葛根素1组、对照2组、模型2组、模型+葛根素2组,其中前3组转染Vector质粒,后3组转染HA-SENP1质粒。超声心动检测心室功能;苏木精-伊红染色检测心肌组织形态;蛋白印迹法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、活化型Caspase-3、Bcl2、Bax和SUMO特异性蛋白酶1(SENP1)蛋白水平;JC-1试剂检测线粒体膜电位;TUNEL检测HL-1细胞凋亡情况。结果与对照组比较,模型组小鼠线粒体内活性氧及H_(2)O_(2)均增加,线粒体膜电位下降(P<0.05),与模型组比较,模型+葛根素组可改善HF小鼠心脏功能,活性氧和H_(2)O_(2)降低,线粒体膜电位增加,活化型Caspase-3/Caspase-3比值下降、Bcl2/Bax比值增加、SENP1蛋白下降(P<0.05)。与模型1组相比,模型+葛根素1组活性氧及H_(2)O_(2)减少,线粒体膜电位升高(P<0.05)。与模型+葛根素1组比较,模型+葛根素2组细胞内H_(2)O_(2)和活性氧增加,线粒体膜电位降低,细胞凋亡率升高(P<0.05)。结论葛根素通过抑制SENP1过表达,减弱HF小鼠心肌细胞的氧化应激,减轻线粒体损伤,抑制心室重构,最终改善心脏功能。

颅内出血致抗利尿激素不适当分泌综合征二例

抗利尿激素不适当分泌综合征(syndromeofinappro-priateantidiuretichormonesecretion,SIADH)在1957年由Schwartz等第一次报道,是由于抗利尿激素分泌过量引起体内水潴留、稀释性低钠血症、尿渗透压和尿钠升高的临床综合征[1]。SIADH多继发于其他疾病,病因较为复杂,如恶性肿瘤、中枢神经系统疾病、肺部疾病等[2]。我们结合文献对收治的2例颅内出血致SIADH患者临床资料及诊疗经过报道如下,以期为今后SIADH患者的诊治提供借鉴。

腹腔镜、胆道镜、胃镜三镜联合治疗胆囊结石伴胆总管结石的疗效分析

目的:探讨腹腔镜、胆道镜和胃镜三镜联合在治疗胆囊结石伴胆总管结石中的临床价值。方法:回顾性分析2019年1月—2021年12月在天津市第五中心医院普外科进行治疗的137例胆囊结石合并胆总管结石患者的临床资料。根据患者采取的手术方式,将研究对象分为三组:观察组、对照1组、对照2组。观察组采取腹腔镜、胆道镜、胃镜联合行胆囊切除、胆道探查取石+BD管引流+胆管一期缝合的治疗方式;对照1组采取腹腔镜下胆囊切除+胆总管切开胆道镜探查取石+T管引流的治疗方式;对照2组采取经内镜逆行性胰胆管造影术胆道取石+腹腔镜胆囊切除术;比较三组的相关临床指标。结果:三组在手术时间、术中出血量、术后腹引管拔管时间方面无统计学差异(P>0.05),观察组住院时间、住院费用均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。三组单次结石取尽率差异无统计学意义。观察组腹腔感染、出血、胆漏、窦道断裂等并发症少于对照组,有统计学差异(P<0.05)。结论:对于胆囊结石合并胆总管结石患者,通过腹腔镜、胆道镜、胃镜三镜联合行胆囊切除+胆管探查取石+BD管引流+胆管一期缝合,能明显提高治疗效果,患者痛苦小,术后并发症发生率低,也能降低住院时间及住院费用,具有很好的临床应用价值。

1,25(OH)_2D_3在牙乳头干细胞成骨分化中的作用

目的研究1,25-二羟基维生素D3[1,25(OH)2D3]在牙乳头干细胞向成骨细胞分化过程中的作用。方法分离培养儿童牙乳头干细胞,培养基中添加1,25(OH)2D3,使其终浓度分别为1、10和100 nmol/L,另设对照组加入等体积生理盐水。采用噻唑蓝(MTT)法绘制细胞生长曲线,流式细胞术检测细胞增殖周期变化,Western blot法检测维生素D受体(VDR)、核因子-κB受体活化剂配体(RANKL)及骨保护素(OPG)蛋白表达水平。采用siRNA技术沉默VDR表达后(siR-VDR组),检测其对RANKL和OPG蛋白表达的影响。结果对照组及1、10、100 nmol/L 1,25(OH)2D3组增殖指数(PIx)分别为49.78±2.03、50.14±1.55、48.81±1.91和48.56±2.15,不同浓度1,25(OH)2D3对牙乳头干细胞的增殖无明显作用(F=3.174,P>0.05)。对照组牙乳头干细胞中可见一定水平VDR、RANKL和OPG的蛋白质表达;加入1,25(OH)2D3后,VDR、RANKL和OPG蛋白表达水平均有不同程度升高,其中以VDR上升趋势最为显著;转染siR-VDR后,VDR、RANKL和OPG的蛋白质表达水平下降。结论 1,25(OH)2D3通过调节VDR水平影响牙乳头干细胞向成骨细胞方向的分化过程。

早产儿动脉导管未闭的治疗进展

动脉导管未闭(PDA)是严重影响新生儿尤其是早产儿存活及生存质量的一种疾病。目前针对PDA的治疗仍存在很大争议。本文介绍了近年来关于PDA的治疗时机选择、治疗方式(内科治疗、手术结扎及预防性治疗)及药物选择(吲哚美辛、布洛芬及对乙酰氨基酚)的研究进展,并对其利弊进行分析。

宫颈癌侧群细胞的恶性行为特征分析

目的观察分析宫颈癌患者肿瘤干细胞样侧群细胞的恶性行为特征。方法取4例宫颈癌患者的宫颈癌组织,原代培养宫颈癌细胞,采用流式细胞术分离宫颈癌干细胞样侧群与非侧群细胞,MTT法绘制细胞生长曲线,Transwell培养体系比较两群细胞的侵袭能力,软琼脂克隆实验检测瘤细胞的克隆能力,免疫荧光方法检测耐药基因ATP结合体超家族成员2(ABCG2)的蛋白表达情况;于20只去胸腺小鼠腹股沟皮下接种两群细胞,各10只,比较其体内成瘤率。结果宫颈癌干细胞样侧群细胞占细胞总数的1.39%;与非侧群细胞相比,侧群细胞生长迅速,具有更强的瘤细胞侵袭力和克隆形成能力,且ABCG2的蛋白质表达水平更高。侧群细胞体内成瘤率为100%(10/10),而非侧群细胞为20%(2/10);瘤体病理组织切片可见肿瘤形成,内部伴大片组织坏死。结论宫颈癌肿瘤干细胞样侧群细胞具有更高的恶性细胞表型,是未来宫颈癌基因治疗的核心靶点。

SUMO-1及ERα在子宫内膜癌中的表达及相关性研究

目的:检测小类泛素化修饰蛋白1(SUMO-1)及雌激素受体α(ERα)在子宫内膜癌中的表达情况及两者间的关系。方法:选取天津市第五中心医院2006年1月—2013年12月间收集的50例子宫内膜癌标本及35例正常子宫内膜标本,采用免疫组织化学方法检测SUMO-1蛋白和ERα蛋白在所有组织标本中的表达情况,免疫荧光化学方法检测两者在子宫内膜癌中的共定位情况,分析SUMO-1和ERα的表达与子宫内膜癌临床病理参数的关系。结果:SUMO-1蛋白在子宫内膜癌中的阳性表达率高于对照组,而ERα蛋白则相反,2组差异均有统计学意义(均P<0.05)。子宫内膜癌患者SUMO-1蛋白和ERα蛋白阳性表达率在不同年龄、不同绝经状态、不同组织学分级的患者中差异有统计学意义(均P<0.05),不同病理类型的患者2种蛋白的阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05)。SUMO-1和ERα在子宫内膜癌中的表达具有较好的一致性(Kappa=0.875,Z=5.473,P=0.001)。结论:SUMO-1和ERα在子宫内膜癌中存在共表达关系,两者在子宫内膜癌发生和发展过程中可能发挥协同作用。

汉族儿童髓母细胞瘤发病与miR-125a-5P序列基因多态性的关系

目的探讨汉族儿童髓母细胞瘤发病与miR-125a-5P序列基因多态性的相关性。方法收集儿童髓母细胞瘤患者及正常对照儿童外周血各256例,提取淋巴细胞基因组DNA,采用Taqman-MGB探针检测DNA中miR-125a-5P的rsl2975333位点的单核苷酸多态性;茎环qRT-PCR方法检测髓母细胞瘤组织标本及正常儿童脑组织标本中miR-125a-5p的表述水平。结果在所检测256例儿童髓母细胞瘤患者中miR-125a-5P的rsl2975333位点基因GG型共239例(93.36%),GT型共17例(6.64%),正常儿童则全部为GG型;miR-125a-5p的表达水平依次为正常脑组织>GG型脑组织>GT型脑组织。结论儿童髓母细胞瘤患者中miR-125a-5P的rsl2975333位点基因变异可能促进肿瘤恶变。

小泛素样修饰蛋白特异性蛋白酶1介导糖尿病性血管内皮细胞损伤修复的研究

目的利用小泛素相关修饰体(SUMO)特异性蛋白酶1(SENP1)解离过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)的小泛素样修饰蛋白1(SUMO1)修饰。方法人脐静脉内皮细胞培养传代后分对照组、高糖组及SENP1组;Western blot法检测SENP1、SUMO1、PGC-1α和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)水平;实时荧光定量PCR检测线粒体转录因子A(TFAM)、核呼吸因子2α(NRF-2α)和雌激素受体相关受体α(ERRα)的mRNA表达;ELISA测定乳酸脱氢酶(LDH);细胞划痕愈合方法、Transwell方法和体外血管模拟形成实验分别检测细胞自愈、迁移和形成血管拟态的能力。结果与对照组比较,高糖组共价SUMO1、PGC-1α和活化Caspase-3蛋白表达明显升高,SENP1蛋白表达明显降低,TFAM、NRF-2α和ERRα的mRNA表达明显降低,细胞划痕修复能力及模拟血管形成能力下降(P<0.05,P<0.01)。与高糖组比较,SENP1组SENP1蛋白表达明显升高,共价SUMO1、PGC-1α和活化Caspase-3蛋白表达明显降低,TFAM、NRF-2α和ERRα的mRNA表达明显升高,细胞划痕修复和迁移能力及模拟血管形成能力明显改善(P<0.05,P<0.01)。对照组、高糖组和SENP1组细胞上清液中LDH水平比较,差异有统计学意义[(24.66±6.39)ng/ml vs(302.45±30.54)ng/ml vs(174.08±21.03)ng/ml,P<0.01]。结论SENP1能够诱导PGC-1α发生去SUMO修饰,解除其对PGC-1α下游转录因子的抑制作用,改善线粒体功能,抑制高糖诱导的血管内皮细胞功能损伤作用。

碳酸饮料对乳恒牙更替期牙齿健康的影响

目的研究碳酸饮料对乳恒牙更替期牙齿健康的影响作用及机制。方法 40颗犬牙釉质样本分别采用15μL可口可乐(可口可乐组)、雪碧(雪碧组)、纯苏打水(苏打水组)和生理盐水(生理盐水组)浸泡,各10颗。测定处理后饮料中钙、磷溶出浓度;分离牙乳头干细胞,以添加可口可乐、雪碧、苏打水和生理盐水的条件培养基进行细胞培养,采用PCR法和Western blot法检测核因子-κB受体活化剂配体(RANKL)、骨保护素(OPG)和维生素D受体(VDR)的mRNA和蛋白表达水平。结果各组钙、磷溶出浓度(mmol/L)由高到低均依次为:雪碧组(3.679±0.114、0.089±0.008)、可口可乐组(2.217±0.109、0.036±0.005)、生理盐水组(0.021±0.004、0.009±0.001)和苏打水组(0.007±0.001、0.002±0.000)。各组RANKL的mRNA和蛋白表达差异均无统计学意义。苏打水组和生理盐水组OPG的mRNA和蛋白表达水平均高于可口可乐组和雪碧组(均P<0.05),雪碧组与可口可乐组、生理盐水组与苏打水组间差异均无统计学意义。生理盐水组VDR的mRNA和蛋白表达水平低于可口可乐组和雪碧组,高于苏打水组(均P<0.05)。结论碳酸饮料可能通过调控成骨相关基因表达及维生素D受体家族共同影响乳恒牙更替期的牙齿健康。

儿童乳牙牙髓干细胞顺硬度基质表面延展和向牙本质分化的潜能

背景:牙髓干细胞在适宜诱导条件下能够向牙本质分化,是牙齿组织工程的重要种子细胞。然而,以往所使用的诱导剂多为化学制剂,不利于体内应用。近来有报道称间充质干细胞能够顺材质硬度分化,这种由物理特性诱导的细胞分化研究报道较少。目的:观察人源性乳牙牙髓干细胞在硬介质表面的延展特点及向牙本质分化潜能,为牙组织工程提供参考。方法:原代分离培养和鉴定儿童自然脱落的乳牙牙髓干细胞;使用低熔点琼脂糖配制弹性模量为(9.12±0.94),(27.18±3.55),(59.37±4.05)和(86.45±5.33)k Pa4个梯度的固体凝胶基质,二维克隆形成实验和划痕实验检测第4代乳牙牙髓干细胞在上述硬基质表面的延展能力,Western blot方法检测牙本质基质蛋白1、牙本质磷蛋白、牙本质涎蛋白的表达。结果与结论:当人乳牙牙髓干细胞接种于极低和低等硬度凝胶介质表面时,乳牙牙髓干细胞几乎均以边缘整齐的细胞克隆存在,很少见细胞平铺和延展现象;但是当将其接种于中等和高等硬度凝胶介质表面时,乳牙牙髓干细胞克隆边缘则表现出明显的平铺和延展,表现为细胞胞体变大,细胞边缘外伸明显。相似的现象也经细胞划痕实验所验证。人源性乳牙牙髓干细胞在中等和高等弹性模量介质表面培养时,表达较高水平的牙本质基质蛋白1、牙本质磷蛋白、牙本质涎蛋白。结果表明,人源性乳牙牙髓干细胞随着培养基质硬度的增加其延展性及成牙本质分化能力逐渐增强,为未来牙组织工程提供方法借鉴。

聚酰胺-胺介导耐药基因ABCG2沉默策略治疗宫颈癌侧群细胞

目的:检测纳米分子聚酰胺-胺(PAMAM)介导耐药基因-ATP结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)沉默对宫颈癌侧群细胞的治疗效果。方法:从宫颈癌细胞中采用流式细胞术分离宫颈癌侧群细胞,检测ABCG2基因的表达,噻唑蓝(MTT)法检测多柔比星对细胞的抑制率;实验分为si RNA组、无义组和对照组,PAMAM介导ABCG2基因沉默后,蛋白质印迹法(western blot)检测ABCG2的表达,MTT法检测多柔比星对细胞敏感性的恢复情况;建立宫颈癌侧群细胞荷瘤鼠模型,给予多柔比星药物治疗,测量肿瘤体积。结果:宫颈癌侧群细胞ABCG2的蛋白水平高于非侧群细胞(P<0.05);MTT耐药实验显示,多柔比星对非侧群细胞的抑制率高于侧群细胞(P<0.01)。si RNA组在ABCG2表达沉默后,抑制率恢复到(69.4±11.3)%,与对照组及无义组比较差异均有统计学意义(P<0.01);动物实验结果显示,si RNA组肿瘤体积小于对照组和无义组(P<0.05)。结论:以PAMAM为介质可实现宫颈癌侧群细胞团中ABCG2基因表达沉默,恢复宫颈癌侧群细胞对化疗药物的治疗敏感性。

乳酸钠林格液和生理盐水治疗急性胰腺炎的荟萃分析

背景液体复苏是急性胰腺炎治疗的最重要的措施之一,生理盐水及乳酸钠林格液是临床常用晶体液.生理盐水价格便宜、易储藏,且应用经验丰富.乳酸钠林格液化学成分更接近于细胞外液,能有效补充机体的水份和电解质,减轻机体损伤,并可以减少肾脏替代治疗.近年来有多项研究结果发现,应用乳酸钠林格液或生理盐水进行液体复苏的的优越性尚存在一定争议.目的比较乳酸钠林格液和生理盐水治疗急性胰腺炎的疗效.方法计算机检索维普、中国知网、万方、Web of Science、PubMed数据库,检索时限截止至2020-12.进行资料提取后,采用RevMan 5.4软件进行统计分析.结果最终共纳入文献5篇,包括乳酸钠林格液组162例,生理盐水组189例.分析结果显示,乳酸钠林格液组的ICU住院率显著小于生理盐水组(OR=0.33,95%CI:0.13-0.81,P=0.02);而在住院天数(MD=-0.59,95%CI:-1.26-0.08,P=0.08)、死亡率(OR=1.39,95%CI:0.44-4.40,P=0.57)、24 h内出现全身炎症反应综合症(OR=0.73,95%CI:0.41-2.33,P=0.28)及胰腺坏死(OR=0.71,95%CI:0.35-1.45,P=0.35)方面,两组无统计学差异.结论与生理盐水相比,在急性胰腺炎时应用乳酸钠林格液进行液体复苏可减少ICU住院率;但乳酸钠林格液治疗急性胰腺炎在住院天数、死亡率、24小时内出现全身炎症反应综合症及胰腺坏死方面与生理盐水无明显差别.

siRNA沉默WFDC2对肺癌A549细胞增殖和侵袭的影响

目的初步探讨siRNA沉默WFDC2对A549肺癌细胞增殖、侵袭的影响及可能机制。方法构建WFDC2特异性小分子干扰RNA(siRNA),脂质体法转染肺癌细胞系A549;RT-PCR和Westernblot分别检测mRNA及蛋白表达量;CCK8实验检测细胞增殖速度;划痕实验及Transwell检测细胞侵袭、迁移能力。结果 siRNA-WFDC2转染组A549较空白组及阴性对照组mRNA表达量与蛋白表达量显著降低(P <0.05),细胞的增殖受到显著抑制(P <0.05),并随着时间的延长抑制明显,细胞迁移距离及细胞穿膜数均显著降低(P <0.05)。结论 siRNA沉默WFDC2基因的表达能够抑制肺癌A549细胞增殖、迁移及侵袭能力,WFDC2基因有可能成为肺癌治疗的新靶点。

壮观霉素B1抑制过氧化物增殖激活受体共激活子类泛素修饰促高糖内皮细胞自愈

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)的小泛素相关修饰蛋白(SUMO)在糖尿病患者血管内皮修复能力下降过程中的作用,并寻找新的治疗方法。方法选取人脐静脉内皮细胞(HUVEC)第3~6代细胞随机分对照组、高糖组及壮观霉素B1治疗组(治疗组)3组(n=4),分别于1.0 g/L葡萄糖、4.5 g/L葡萄糖、4.5 g/L葡萄糖+20μmol/L壮观霉素B1培养液中作用48 h,用Western blot检测SUMO2/3、PGC-1α蛋白表达,RT-PCR方法检测核呼吸因子-2α(NRF-2α)和核受体雌激素受体相关受体α(ERRα)mRNA表达,细胞划痕实验检测HUVEC损伤修复功能,模拟血管形成实验检测HUVEC血管形成能力。结果高糖组和治疗组共价态SUMO2/3蛋白表达水平明显高于对照组,NRF-2α和ERRαmRNA表达水平明显低于对照组(P<0.05,P<0.01);治疗组共价态SUMO2/3蛋白表达水平明显低于高糖组,NRF-2α和ERRαmRNA表达水平明显高于高糖组(P<0.05)。高糖组游离态SUMO2/3水平低于对照组和治疗组(P<0.05)。3组PGC-1α蛋白表达水平比较,无统计学差异(P>0.05)。细胞划痕实验显示,高糖组和治疗组细胞迁移距离明显低于对照组[(19.47±4.04)μm vs(57.35±5.59)μm,P=0.017;(31.98±6.05)μm vs(57.35±5.59)μm,P=0.032],治疗组细胞迁移距离明显高于高糖组(P=0.037)。细胞模拟血管形成实验显示,治疗组能够改善网状交联情况,形成少量类血管结构。结论壮观霉素B1能够通过抑制PGC-1α蛋白的SUMO化修饰增加血管内皮细胞在高糖环境下的自愈能力。

奥美拉唑及其S异构体诱发痛风急性发作的病例分析

背景质子泵抑制剂通过阻碍胃壁细胞H+-K+-ATP酶发挥抑制胃酸分泌的作用.除常见的药物过敏等不良反应外,质子泵抑制剂还可能导致痛风患者出现急性痛风发作,但临床医师对质子泵抑制剂可能引起痛风性关节炎急性发作的认识不足,其发病机制尚不明确.目的分析奥美拉唑及其S异构体(艾斯奥美拉唑)诱发痛风性关节炎急性发作的临床特点.方法选择2020-11/2021-05在天津市第五中心医院住院治疗,应用奥美拉唑及其S异构体后出现痛风性关节炎急性发作的11例患者的病例资料进行分析.结果患者男性9例(81.8%),女性2例(18.2%);平均年龄(56.73±15.40)岁.临床诊断为慢性胃炎6例(54.5%)、急性上消化道出血2例(18.2%)、十二指肠球部溃疡1例(9.1%)、肠炎1例(9.1%)、空肠间质瘤伴出血1例(9.1%).应用奥美拉唑6例(54.5%)、艾斯奥美拉唑5例(45.5%),均为静脉给药.应用奥美拉唑及其S异构体至痛风性关节炎急性发作时间为(4.73±4.10)d.临床表现为单关节或者多个关节红肿疼痛.11例患者尿酸水平均高于正常,且应用奥美拉唑及其S异构体后尿酸水平较应用前显著升高(t=-0.81,P=0.00).贫血患者与无贫血患者相比,出现痛风性关节炎急性发作的时间无显著差异(t=-0.37,P=0.72);肌酐升高患者与肌酐正常者相比,出现痛风性关节炎急性发作的时间无明显差异(t=0.48,P=0.65);静脉应用奥美拉唑与艾斯奥美拉唑相比,出现痛风性关节炎急性发作的时间无明显差别(t=0.78,P=0.46).结论奥美拉唑及其S异构体诱发痛风性关节炎急性发作,可能与其抑制肾脏H+-K+-ATP酶,使尿酸排泄减少有关.

灵芝烯酸B诱导Oct4去SUMO化激活G0期胃癌侧群细胞

[目的]从蛋白质类泛素化修饰角度研究灵芝烯酸B(GAB)对静息期G0胃癌侧群细胞的活化作用,为胃癌侧群细胞靶向治疗提供新策略。[方法]流式细胞术分离CD133+的SGC-7901胃癌侧群细胞,培养细胞克隆球,给予GAB处理96 h,于不同时间点检测克隆球大小,绘制克隆球变化曲线;流式细胞术检测胃癌侧群细胞周期变化;蛋白免疫印迹(Western Blot)方法检测小泛素样修饰蛋白-1(SUMO-1)、八聚体结合转录因子4(Oct4)、细胞周期蛋白Cyclin D1、Cyclin E1、Cyclin A2和Cyclin B1的表达水平;四甲基噻唑蓝(MTT)法检测顺铂对CD133+胃癌侧群细胞的半数致死量(IC50)。[结果] GAB组胃癌侧群细胞克隆球生长速度明显低于对照组;对照组CD133+胃癌侧群细胞主要集中于G0/G1期,而GAB组CD133+则主要集中于G2/M期;与对照组比较,GAB组胃癌侧群细胞的SUMO-1、Oct4和Cyclin D1蛋白表达水平降低,而Cyclin E1、Cyclin A2和Cyclin B1蛋白表达水平升高(P<0.05);GAB处理使顺铂对胃癌侧群细胞IC50从69.84μg/mL下降至35.67μg/mL。[结论] GAB能够通过诱导Oct4去SUMO化激活G0期胃癌侧群细胞,增加胃癌侧群细胞对顺铂的化疗敏感性。

miR-7对乳腺癌细胞骨转移的影响

目的探讨miR-7抑制乳腺癌细胞骨转移的分子机制。方法转染含miR-7基因序列的GFP表达质粒进入MDA-MB-231乳腺癌细胞,荧光显微镜下检测外源基因的整合效率,Western blot方法检测PI3K、AKT-2、CXCR-4和MMP-9的蛋白表达量,Transwell体系检测乳腺癌细胞的迁移能力;建立乳腺癌骨转移模型,病理检查分析骨转移情况;miRNA靶基因预测软件分析miR-7潜在治疗靶点。结果荧光显示含GFP/miR-7基因的质粒被高效转入乳腺癌细胞,转染后癌细胞PI3K、AKT-2和CXCR-4的蛋白量均有明显降低(P<0.05,P<0.01),MMP-9无明显变化(P>0.05);体内外模型均显示miR-7可抑制乳腺癌细胞的远位转移;miRNA靶基因预测软件分析显示PI3K是miR-7的潜在沉默靶点之一。结论 miR-7可能通过靶向沉默PI3K/AKT-2通路途径间接影响CXCR-4/SDF-1轴进而抑制乳腺癌细胞的骨转移。