Klotho在肺癌中的研究进展

Klotho基因最早作为一种抗衰老基因被发现,其编码的Klotho蛋白在人类的多种组织中都有表达,该蛋白最显著的功能是调节磷酸盐稳态。Klotho蛋白有抑制相关信号通路、降低氧化应激并抑制炎症反应的作用,而这些过程与癌症发生密切相关。Klotho蛋白是多种恶性肿瘤的抑制因子,其表达与肿瘤的发生发展和患者预后都有关系。肺癌是最常见的恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率在所有恶性肿瘤中位居前列。本文就Klotho与肺癌的发病机制、治疗预后关系的研究进展进行综述,对探索与肺癌的诊疗预后相关的新标志物和新靶点有重要意义。

肺腺癌中FAT1的表达及其与免疫细胞浸润关系的研究

背景与目的肺癌是癌症相关死亡的主要原因。非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)是肺癌最常见的病理分型,其中又以肺腺癌占比最高。非典型性钙黏蛋白1(FAT atypical cadherin 1,FAT1)是一种受体样蛋白,在肺腺癌中存在高频率突变,其编码的蛋白在细胞黏附、细胞增殖、分化等过程中发挥着重要的作用。本研究旨在研究FAT1在肺腺癌中的表达及与免疫浸润的关系。方法通过下载癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)和基因型-组织表达(Genotype-Tissue Expression,GTEx)相关数据,获得513例肺腺癌样本、397例癌旁样本的基因表达水平及相关临床信息。分析肺腺癌组织中FAT1基因mRNA表达水平以及FAT1基因的表达与肺腺癌患者的预后关系,通过通路富集分析探索FAT1基因调控的相关信号通路。利用免疫蛋白印迹检测FAT1在肺上皮细胞和不同肺癌细胞系中的表达差异,免疫组织化学染色法被用于检测FAT1在肺癌和癌旁组织中的表达。结果14%的肺腺癌患者中存在FAT1基因突变;TCGA数据库数据显示肺腺癌组织中FAT1 mRNA表达显著高于癌旁组织。Kaplan-Meier分析显示FAT1基因表达较高的肺腺癌患者预后较差。通路富集分析表明FAT1与肿瘤发生发展通路相关,且FAT1的表达和免疫细胞浸润密切相关,免疫组化实验证明FAT1在癌组织的表达显著高于癌旁组织。结论肺腺癌组织中FAT1 mRNA呈高表达,高表达的FAT1 mRNA与肺腺癌患者的不良预后相关。FAT1有可能成为潜在的肺癌诊治靶点。

天津大港油田肺癌病例对照研究

背景与目的研究中国天津大港油田职工肺癌的危险因素。方法采用病例对照研究对有关的暴露因素进行单因素和多因素Logistic回归分析。结果单因素和多因素分析结果均表明,吸烟和既往肺部疾病可增加大港油田职工肺癌的发病危险,调整的OR及95%可信区间(Confidence interval,CI)分别为1.52(1.18-1.94)和3.37(1.88-7.16),化学有害物质和粉尘暴露的OR及其95%CI分别为0.73(0.69-1.30)和0.84(0.62-1.15),未见癌家族史与肺癌有显著性关联。结论吸烟和既往肺部疾病为大港油田肺癌独立危险因素,职业暴露与肺癌的关系由于受潜在偏倚的影响,尚需进一步深入研究。

DNA甲基化在肺癌早期诊断中的研究进展

肺癌是当今世界上对人类健康和生命威胁最大的恶性肿瘤,目前缺乏理想的早期诊断手段。在肺癌发生早期就存在很多DNA甲基化的改变,检测DNA甲基化有望成为肺癌早期诊断的重要手段。

非小细胞肺癌新辅助靶向及免疫治疗研究进展和展望

肺癌是全球发病率和死亡率最高的恶性肿瘤。近年来,随着新型药物的出现和治疗模式的优化,肺癌患者的预后已有一定改善。新辅助治疗是指对潜在可接受手术切除的患者,先给予术前抗肿瘤治疗后再行手术治疗。新辅助治疗通过术前治疗可以缩小肿瘤体积,降低肿瘤分期;并且可以杀灭患者机体中循环肿瘤细胞及微转移病灶,令患者远期生存获益。靶向治疗及免疫治疗已被应用于晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的一线治疗。因此,有临床试验尝试将以上两种治疗手段应用于早期可切除NSCLC患者的新辅助治疗。本文针对新辅助靶向及免疫治疗对早期可切除NSCLC患者的疗效、治疗中的潜在风险予以综述,并探讨新辅助治疗的未来发展方向。

国际肺癌研究会分期项目--采用外科治疗的非小细胞肺癌的预后因素和病理TNM分期

目的本研究的目的是在国际肺癌研究协会国际分期数据库中采用外科治疗的I-IIIA期非小细胞肺癌病例中,评价除肿瘤原发灶、病理淋巴结和转移(TNM)分期外,细胞类型、年龄和性别的影响。材料和方法从提交至分期数据库的67725例非小细胞肺癌(NSCLC)病例中,筛选出9137例采用外科治疗的病例,这些病例的病理分期、年龄、性别和特殊组织细胞类型等信息均可获得。在亚组中分析记录行为状态和吸烟史。检验方法采用Cox比例风险回归和递归分割及合并(RPA)分析。结果病理TNM分期、年龄以及性别均为生存的独立预后因素。尽管细支气管肺泡癌(BAC)亚型间存在潜在的异质性,其相对于其它细胞类型仍具有生存优势。修正比较提示罹患鳞癌相对于非BAC腺癌及大细胞癌具有微弱的生存优势,尽管此优势仅限于男性患者。RPA结果提示TNM分期为首要因素,年龄是各分期分组的预后因素。在RPA分析中未发现细胞类型具有预后价值。依据RPA的结果形成预后分组,诸分组的预后价值得到北美监视、流行病学、结局结果注册机构的认可。在资料可得的亚组中,行为状态和吸烟史均为预后因素。在回归模型中,吸烟状态的纳入未影响其它变量的效果。结论年龄和性别已被证实为外科切除的非小细胞肺癌的重要预后因素。细胞类型的重要性次之,尽管归类于BAC的少部分病例相对于其它组织学类型具有生存优势,且鳞癌相对于非BAC腺癌具有微弱的生存优势。在未修正分析中,分期、年龄、性别和细胞类型间的不平衡可能会导致有关细胞类型的误导结果。在该分析中,病理TNM分类是最重要的预后因素。

应用SYBR greenI荧光PCR研究GSTM1基因多态性与肺癌遗传易感性之间的相关性

背景与目的谷胱甘肽S转移酶M1(glutathione S-transferase M1,GSTM1)基因是参与体内多种致癌物代谢的重要的II相代谢酶,其基因多态性被认为与人肺癌遗传易感性有关。本研究旨在探讨天津地区汉族人群GSTM1基因多态性与肺癌遗传易感性之间的关系。方法采用SYBR green I实时荧光PCR熔解曲线分析方法检测天津地区265例肺癌患者和307例对照者GSTM1基因多态性,应用病例对照研究分析其与肺癌易感性及不同病理类型之间的关系。结果①GSTM1(-)基因型在肺癌组和对照组的分布频率分别为56.6%和57.0%,两组之间无统计学差别(χ2=0.831,P=0.362)。经性别、年龄、吸烟状况调整后分析,携带GSTM1(-)基因型个体未增加患肺癌危险性(OR=0.840,95%CI:0.578-1.221,P=0.362)。②按病理分层分析GSTM1基因型与肺癌各病理类型之间的关系,其中鳞癌、腺癌、小细胞肺癌与其它病理类型肺癌患者GSTM1(-)基因型分布频率分别为65.8%、48.5%、47.8%和52.2%,与对照组相比,不同病理类型患者肺癌危险性均无明显统计学差异(P>0.05)。结论在天津地区人群中GSTM1基因多态性与肺癌遗传易感性之间无相关性。

MiR-503逆转肺癌耐药细胞株A549/DDP的耐药性及其机制研究

背景与目的临床上肺癌细胞往往出现对顺铂的耐药性,因此探讨肿瘤细胞的耐药机制,开发新的逆转耐药性的方法,对提高临床患者的受益有十分重要的意义。miRNA可通过其调控的目标基因,对多种与肿瘤细胞失控生长、抗凋亡、迁移和侵袭,甚至是肿瘤细胞对药物治疗的应答产生调控作用。本实验旨在探讨miR-503对肺癌顺铂耐药细胞株A549/DDP的耐药性逆转及其相关作用机制。方法应用MTS法检测miR-503对A549/DDP细胞顺铂耐受性的影响,流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡率以及胞内罗丹明-23(Rhodamine-23,Rh-23)含量的变化,Western blot法和Real time PCR检测肿瘤细胞多药耐药蛋白MDR、MRP、Survivin和Bcl-2蛋白表达,以及Akt磷酸化的变化,应用双萤光报告基因技术检测细胞NF-κB和AP-转录活性。结果与对照细胞组相比较,miR-503转染A549/DDP细胞株后,可明显增加细胞对顺铂的敏感性,使耐药逆转倍数增加为2.48倍,Rh-23含量升高2.49倍,细胞凋亡率提高0.3倍;在转录水平检测发现,与对照组相比较,miR-503转染的细胞中MDR、MRP、ERCC、Survivin及Bcl-2等与肿瘤耐药相关基因的mRNA表达水平明显下调,而RhoE mRNA表达水平则明显升高(P<0.05);进一步在蛋白水平亦证实MDR、MRP、ERCC、Survivin、Bcl-2以及p-Akt的表达明显下降,RhoE的表达明显上升。结论 miR-503可逆转A549/DDP对顺铂的耐药性,这一作用可能与抑制药物外排,负调控肿瘤耐药相关蛋白的表达,促进细胞凋亡有关。

人大细胞肺癌干细胞样细胞的富集及其功能研究

背景与目的目前国内外还没有确切的、得到公认的肺癌干细胞的筛选标记分子、指标和方法,常用方法为通过流式细胞技术,借鉴其他肿瘤干细胞分选标记来分选肺癌干细胞,但其筛选特异性低、工作量巨大。本研究采用无血清悬浮培养法富集肺癌干细胞,对肺癌干细胞的筛选方法进行探索。方法采用添加生长因子的无血清培养基对人大细胞肺癌细胞株L9981进行悬浮培养,获得肺癌细胞球体。对含血清培养贴壁L9981细胞和无血清培养成球后的L9981细胞,通过显微镜下观察比较二者的生物学形态,应用Vi-cell细胞活力分析仪计数细胞并绘制生长曲线比较二者的增殖能力,通过Transwell实验研究它们的侵袭能力差异,并通过接种裸鼠观察二者在体内的成瘤性来研究肺癌细胞球体的生物学功能。结果与血清贴壁培养L9981细胞相比,无血清培养L9981细胞成球形生长,贴壁L9981和L9981球体细胞的倍增时间分别为(56.05±1.95)h和(33.00±1.44)h,球体细胞的侵袭和成瘤能力分别为贴壁L9981细胞的5倍和20倍。结论通过无血清悬浮培养的L9981细胞可以形成肺癌球体细胞群,L9981球体细胞的侵袭和成瘤能力均明显高于贴壁L9981细胞,显示L9981球体细胞中富集了肺癌干细胞样的细胞。无血清悬浮培养肺癌球体细胞可作为富集肺癌干细胞样细胞的一种候选方法。

肺癌细胞中HGF/c-Met信号通路的异常调控及其靶向药物研究进展

c-MET是原癌基因c-MET编码的蛋白产物,是肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)受体,具有络氨酸激酶活性。c-Met的异常表达与肺癌的发生发展有着密切的关系。HGF与其c-Met受体结合后,活化c-Met酪氨酸激酶活性,能促进多种肿瘤细胞包括肺癌细胞的增殖、新生血管生成及肿瘤侵袭和迁移。针对HGF/c-Met信号转导通路的靶向治疗是目前肺癌治疗的新热点。本文将就HGF/c-Met信号转导通路在肺癌中异常调控及其靶向药物在肺癌中的研究进展进行综述。

肺癌细胞中miR-182启动子甲基化状态研究

背景与目的已有的研究证明MiR-182的异常调控与恶性肿瘤的发生发展密切相关,本研究旨在探讨肺癌细胞中miR-182启动子的甲基化状态对miR-182表达的影响。方法荧光定量PCR检测肺癌细胞中miR-182表达水平,甲基化特异性PCR检测各细胞株中miR-182启动子区的甲基化状态,并通过测序进行验证。DNA甲基转移酶抑制剂5’-Aza-d C处理后检测各肺癌细胞株中miR-182表达变化。结果 MiR-182在不同肺癌细胞株的表达水平不同,其中,在高转移性肺癌细胞株如A549和L9981中相对呈低表达;而在低转移性细胞株95C则相对呈高表达。MSP及测序分析显示多株肺癌细胞株中miR-182启动子区域存在DNA甲基化,其中A549细胞甲基化程度最高。在5'-氮杂-脱氧胞苷酸(5’-Aza-d C)作用下,A549细胞及其他肺癌细胞中miR-182表达水平均明显升高。结论在肺癌细胞中miR-182启动子区域存在异常甲基化,miR-182的表达受DNA甲基化的调控。MiR-182的甲基化在肺癌中的作用尚需进一步研究。

bag-1、bcl-2和bax在非小细胞肺癌中的表达和意义及其与化疗多药耐药相关性的研究

背景与目的bag-1、bcl-2和bax均为凋亡相关蛋白,在肿瘤诊断、病情进展、转移潜能和耐药性以及预后评价等方面具有潜在价值。本研究拟研究bag-1、bcl-2和bax蛋白在非小细胞肺癌中的表达以及与非小细胞肺癌发生发展的关系,并且探讨其与肺癌化疗耐药的相关性。方法采用免疫组化SP法对140例非小细胞肺癌组织(其中40例为新辅助化疗1个-2个周期后手术的非小细胞肺癌患者组织)与15例支气管扩张组织的石蜡切片标本进行bag-1、bcl-2和bax蛋白表达的检测。结果非小细胞肺癌组织中bag-1、bcl-2蛋白表达水平高于肺良性病变组织(P<0.05),bax蛋白的表达水平低于肺良性病变组织(P<0.05);bag-1、bcl-2和bax蛋白表达水平与非小细胞肺癌患者的年龄、性别、组织学分类、P-TNM分期及淋巴结转移等均无明显相关性(P>0.05),但是bag-1与肺癌细胞分化程度相关,分化越差,bag-1阳性表达率越高(P<0.05);非小细胞肺癌中bcl-2蛋白表达与bag-1蛋白表达明显正相关(r=0.371)(P<0.01),bcl-2与bax蛋白呈明显负相关(r=-0.225)(P<0.01);新辅助化疗使bag-1和bcl-2蛋白表达水平都有一定水平的增高,但bax蛋白表达水平没有显著变化。结论非小细胞肺癌组织中存在bag-1、bcl-2蛋白的高表达和bax蛋白的低表达;bag-1蛋白表达水平与非小细胞肺癌的分化程度有密切关系;非小细胞肺癌组织中bag-1表达水平与bcl-2间存在非常显著正相关,bcl-2与bax间存在显著负相关;本研究未观察到bag-1、bcl-2和bax与肺癌多药耐药性间的相关性。

H2228细胞和EML4-ALK阳性肺癌组织中SOCS3基因启动子区甲基化状态的研究

背景与目的人类棘皮动物微管相关蛋白样4(echinoderm microtubule-associated-protein-like 4,EML4)和人类间变性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase,ALK)融合基因EML4-ALK是新发现的非小细胞肺癌的驱动基因,患者具有独特的临床病理生理特征,ALK基因下游信号通路的异常持续激活是其重要的下游信号通路,而导致其下游基因持续激活的原因不明。细胞因子信号转导抑制因子(suppressor of cytokine signaling,SOCS)是一类在细胞信号转导过程中起重要作用的负调控因子,主要通过抑制JAK蛋白酪氨酸激酶(janus protein tyrosine kinase,JAK)信号传导和转录激活因子(signal transducer and activator of transcription,STAT)即JAK-STAT等信号通路来调控细胞的增殖、分化和凋亡。肿瘤中常存在SOCS基因的甲基化异常导致的失活,从而导致JAK2-STAT等信号通路持续异常活化。本研究的目的在于探讨EML4-ALK阳性H2228细胞和肺癌组织中SOCS3启动子区甲基化状态。方法甲基化特异性PCR检测EML4-ALK阳性H2228肺癌细胞及肺癌组织中SOCS3启动子区的甲基化状态,并通过测序验证。DNA甲基转移酶抑制剂5’-Aza-d C处理H2228细胞,并通过Real-time PCR和Western blot检测SOCS3的表达水平变化。结果 MSP及测序分析发现EML4-ALK阳性细胞株H2228中存在SOCS3启动子区甲基化;7例EML4-ALK阳性肺癌组织中的3例存在SOCS3启动子区甲基化,H2228细胞经过5’-Aza-d C去甲基化处理后SOCS3的表达明显增加。结论 EML4-ALK(+)的H2228肺癌细胞及部分肺癌组织中存在SOCS3启动子区的异常甲基化,可能是EML4-ALK阳性肺癌的重要发病机制。

低氧与肺癌的研究进展

肺癌是我国发病率和死亡率增长最快,对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤,其发生发展机制尚未完全清楚。肿瘤的低氧微环境发现于1955年,而肺癌组织低氧直至2006年才被成功检测到。随着研究的深入,低氧对肺癌的影响不仅限于对放疗的抵抗作用,而且还会通过一个重要的促癌分子低氧诱导因子(hypoxia inducible factor,HIF)以及其调节蛋白脯氨酸羟化酶(prolyl hydroxylase domain,PHD)和希佩尔林道病基因产物(product of von Hippel-Lindau gene,pVHL)对肺癌的发生发展、侵袭转移、化疗耐药以及预后等产生重要的调节作用。因此,低氧、HIF、PHD和pVHL必将成为十分有潜力的肺癌治疗靶点。

肺癌侵袭转移相关microRNAs的研究进展

肺癌侵袭转移是肺癌的恶性标志和特征,也是肺癌患者治疗失败和死亡的主要原因。肺癌侵袭转移是一个多因素调控、多步骤、多阶段、连续复杂的生物学过程,是癌细胞从原发部位转移到远端部位形成肿瘤的过程.

肺癌分子诊断与分子分期研究进展

肺癌已成为世界范围内最主要的肿瘤死亡原因，大约31％与癌症相关的死亡是由肺癌造成的。在世界范围内，肺癌患者的5年存活率也只有大约15％。目前肺癌低存活率主要在于基于症状的诊断方法对发现早期肺癌并不十分有效，3／4的病人在确诊时肺癌已发生转移。若能在早期检测到肺癌病变，病人5年存活率可提高到60-80％。第十二届肺癌大会已圆满结束，来自不同国家的科学家呈现了许多早期诊断的工作和研究。

云锡矿工肺癌危险因素的队列研究

背景与目的吸烟是肺癌的主要病因,在矿工肺癌病因的研究中发现,职业暴露因素也起重要作用。本研究旨在分析氡暴露、吸烟等危险因素对云锡矿工肺癌的影响,为预防和控制肺癌高发提供科学依据。方法利用前瞻性队列研究方法,对云锡矿工肺癌高危人群暴露因素对肺癌死亡的影响进行Cox多因素分析;分析矿工肺癌危险与初始氡暴露年龄及氡暴露率的关系,分析不同吸烟、氡暴露水平下肺癌死亡的危险,并对吸烟和累积氡暴露量之间的交互作用进行分析。结果进入研究时的年龄、吸烟量、累积氡砷暴露、既往慢性支气管炎为云锡矿工肺癌的独立危险因素,教育程度是矿工肺癌的保护性因素;肺癌危险与氡暴露率间存在逆剂量率效应,但与初始氡暴露年龄无明显关联;吸烟和氡暴露对肺癌危险有显著的相加交互作用。结论云锡矿工肺癌高死亡率是多种因素共同作用的结果,危险因素间的交互作用值得进一步深入研究。

自噬在EGFR-TKI类肿瘤靶向药物对肺癌的治疗和耐药中作用的研究进展

表皮生长因子受体激酶抑制剂(epidermal growth factor receptor-tyrosine kinase inhibitor,EGFR-TKI)是一类针对肿瘤细胞中EGFR的异常活化而开发的肿瘤靶向药物,可以有效抑制带有EGFR敏感突变的肿瘤细胞的生长。然而先天性以及获得性耐药严重制约了该类药物的使用。近些年的研究发现自噬(autophagy),作为一个细胞编码的高度保守的应对压力的存活机制,其与肿瘤的发生发展及抗肿瘤药物的耐药密切相关。EGFR的激活可以通过多条通路调控自噬。EGFR-TKI也可以诱导自噬,且自噬在EGFR-TKI的治疗和产生耐药性的过程中发挥着双刃剑的作用:一方面EGFR-TKI诱导的自噬是肿瘤细胞的一个保护机制,联合使用自噬抑制剂可以增强药物的细胞毒性效果;同时还有研究证明EGFR-TKI诱导的高水平自噬可以在凋亡缺陷的细胞中造成自噬性死亡,这种情况下联合使用自噬诱导剂则可能产生更好的效果。因此,针对不同的情况通过调控自噬以提高EGFR-TKI的治疗效果是一个颇具前景的治疗方案。本文对EGFR-TKI和自噬相关的信号通路进行了阐述,并对自噬在EGFR-TKI类药物对肺癌的治疗和耐药中作用的最新研究进展进行了总结,为设计联合方案提高EGFR-TKI的抑制效果,降低耐药性提供线索。

HPV和肺癌关系的研究进展

肺癌是严重危害人类健康的恶性肿瘤之一,近50年来其发病率和死亡率呈现不断上升趋势,肺癌的发病率和死亡率在世界范围内均居各种癌症首位。肺癌的危险因素是多方面的。吸烟是其中一个重要风险因素,但不吸烟者(特别是女性)仍有一部分会患肺癌。许多研究认为人类乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)是肺癌的危险因素。然而,HPV作为肺癌的风险因素,对其进行的全面认真的评估较少。由于检测方法、地区分布、样本量等存在差异造成HPV感染和肺癌的相关性研究结果也不尽相同。近年来,随着研究的不断深入,HPV与肺癌的关系日益受到重视。现将近年关于HPV和肺癌关系的研究进展作一简要综述。

中国人群单核苷酸多态性与原发性肺癌易感性的相关性研究

目的探讨STAT6的rs1059513位点以及IL-13 rs20541,IL-4R rs1801275位点的SNP多态性,分析比较与非小细胞肺癌的遗传易感性的关系。方法采用Taqman基因分型技术,分析比较468例健康对照者与262例原发性肺癌患者的基因型与非小细胞肺癌的遗传易感性的关系。结果 STAT6基因型rs1059513(C/T)位点基因型(TT)在病例组和对照组中的频率分别为83.6%和85.9%,基因型(C/T)频率分别为16.4%和13.9%,基因型(C/T+CC)在病例组和对照组的频率分别为16.4%和14.1%;IL13基因rs20541(C/T)位点基因型(CC)在病例组和对照组的频率分别为7.63%和8.12%,基因型(C/T+TT)在病例组和对照组中的频率分别为92.4%和91.6%;IL4R基因rs1801275(A/G)位点基因型(AA)在病例组和对照组的频率分别为65.6%和68.8%,基因型(A/G+GG)在病例组和对照组中的频率分别为34.4%和31.2%。各位点多态性在病例组和对照组中的分布频率均P>0.05。结论上述位点多态性与肺癌均没有显著性相关。