轻度慢性阻塞性肺疾病的病理特征及其与炎性因子的相关性

目的 探索轻度慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺组织病理特征及其与炎性因子的相关性。方法 前瞻性纳入因肺小结节行手术治疗的患者70例,分为正常组10例、轻度COPD组50例、中重度COPD组10例。肺组织分别经HE、Masson、EVG染色后评估病理改变;免疫组化染色检测肺组织平滑肌肌动蛋白(SMA)、肌动蛋白(Actin)、CD31蛋白表达;免疫组化及q PCR检测肺组织肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-10蛋白及mRNA水平。结果 轻度COPD肺组织可见肺泡间隔增宽,小气道扩张,血管壁轻度增厚,多见以淋巴细胞为主的炎症反应。免疫组化染色提示轻度COPD肺组织中SMA、Actin蛋白含量较正常组升高(P<0.05)。此外,轻度COPD肺组织中TNF-α的mRNA水平及TNF-α阳性率明显高于正常组,而IL-10的mRNA水平明显低于正常组(均P<0.05)。SMA、Actin与炎性因子TNF-α阳性表达呈正相关,而与IL-10阳性表达呈负相关(均P<0.05)。结论 轻度COPD肺组织主要病理改变包括以小血管平滑肌层增厚为特征的肺小血管重构和以淋巴细胞浸润为主的炎症反应,同时促炎因子TNF-α升高和抗炎因子IL-10降低与COPD病理改变相关。

中心型非小细胞肺癌浸润近端支气管壁的临床病理学研究

目的:观察中心型非小细胞肺癌不同的病理组织学类型、pTNM分期、p53蛋白表达对癌细胞浸润近端支气管壁长度的影响,为术式的选择提供临床病理依据。方法:收集86例原发性中心型非小细胞肺癌的手术标本,对肿瘤至支气管切缘的管壁进行连续取材,观察组织学类型,测量癌细胞浸润近端支气管的长度。用免疫组织化学法(SP)检测p53蛋白表达。结果:Ⅲa期腺癌最长(1.91±0.36cm),Ⅰb期鳞癌最短(0.39±0.15cm)。p53蛋白阳性表达者浸润长度(0.87±0.49cm)大于表达阴性者(0.53±0.32cm),(t=3.82,P<0.01),且差异均有显著性。结论:在原发性中心型非小细胞肺癌中,病理组织学类型、pTNM分期及p53蛋白表达与癌细胞浸润近端支气管壁的长度有关,可作为选择术式的依据之一。

非小细胞肺癌中E-CD、CD44v6的表达和IMVD临床病理意义

目的:探讨非小细胞肺癌中E-CD、CD44v6表达与CD105标记瘤内微血管密度(IMVD)的关系及意义。方法:用免疫组化技术Envision方法检测E-CD、CD44v6与CD105在60例非小细胞肺癌中的表达水平,并用CD105测量IMVD。结果:E-CD和CD44v6与肺癌的TNM分期和淋巴结转移均密切相关(均P<0.05或P<0.01)。E-CD与其血管转移密切相关(P<0.05)。E-CD和CD44v6有相关性(P<0.01,Pearson列联系数r=0.66)。CD105-IMVD与肺癌的淋巴结和血管转移均密切相关(均P<0.01)。E-CD正常表达患者的CD105-IMVD小于其异常表达者(P<0.01),CD44v6正常表达患者的CD105-IMVD明显大于其异常表达者(P<0.01)。结论:E-CD、CD44v6的表达程度和CD105-IMVD均与非小细胞肺癌的生物学特性密切相关,对判断预后和指导治疗具有实用价值。

胸水沉淀物中Napsin A、SP-A和TTF-1检测的临床病理学意义

胸水沉淀物中找到恶性肿瘤细胞是诊断恶性胸腔积液的金标准,通过对胸水沉淀物中的细胞检查确定肿瘤的原发部位极为重要。笔者通过免疫组织化学方法研究联合使用Napsin A（novel aspartic proteinase A）、肺表面活性物质相关蛋白A（SP-A）、甲状腺转录因子-1（TTF-1）作为识别胸水沉淀物中不同原发部位的肿瘤标记,结果报告如下。

慢性阻塞性肺疾病患者脏层胸膜的病理改变

目的观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者脏层胸膜的病理改变,以及该改变与COPD气流受限的关系。方法选取2014年5月—2015年8月于天津市胸科医院胸外科因肺部肿物,行全肺叶或部分肺叶切除手术患者70例。根据患者肺功能检查结果分为COPD组[第1秒用力呼气容积(FEV1)/用力肺活量(FVC)<70%,40例]与对照组(FEV1/FVC≥70%,30例)。对手术所获取肺组织进行取材(取材部位未被病变浸润,距离病变区域>2 cm)、制作组织切片,使用弹力纤维染色法(EVG)进行染色;显微镜下观察并计算2组脏层胸膜的厚度及弹力纤维所占比例。结果 COPD组标本取自肺上、中叶22例,肺下叶18例;对照组取自肺上、中叶17例,肺下叶13例;2组间标本获取部位差异无统计学意义(χ2=0.019,P>0.05)。COPD组脏层胸膜厚度及脏层胸膜中弹力纤维所占比例均小于对照组(均P<0.01)。2组内肺上、中叶脏层胸膜厚度均明显小于肺下叶(P<0.05),但肺上、中叶与肺下叶胸膜中弹力纤维所占比例差异无统计学意义。结论脏层胸膜变薄,弹力纤维减少是COPD患者呼气气流受限的原因之一。

Cdc42和WAVE1在非小细胞肺癌中的表达及临床病理意义

目的:探讨Cdc42和WAVE1在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组织化学法检测106例经石蜡包埋的NSCLC组织及46例癌旁正常肺组织中Cdc42和WAVE1的表达情况。结果:Cdc42和WAVE1在NSCLC组织中的表达明显高于正常肺组织。Cdc42的表达强度与肿瘤的分化程度、TNM分期及淋巴结转移情况之间差异有统计学意义(P<0.05);WAVE1的表达强度与TNM分期及淋巴结转移情况之间差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。NSCLC组织中Cdc42和WAVE1的表达呈正相关(r=0.469,P<0.01)。Cdc42高表达组的3年生存率(44.16%)低于低表达组(72.41%),WAVE1高表达组的3年生存率(39.44%)亦低于低表达组(77.14%),且差异均有统计学意义(P<0.01)。淋巴结转移、Cdc42和WAVE1共同高表达是影响NSCLC患者预后的独立因素。结论:Cdc42和WAVE1在NSCLC组织中异常高表达,且呈现较好的相关性,可能共同参与并促进NSCLC的恶性进程,检测两者的表达会对NSCLC患者的临床病理学特征及预后起一定的提示作用。

ALK基因在肺腺癌中的临床病理特征及其与患者预后的相关性研究

目的:探讨肺腺癌患者中间变性淋巴瘤激酶(ALK)基因的表达及其与患者预后的相关性。方法:用常规免疫组织化学法(IHC)及实时荧光定量PCR(qPCR)技术检测256例经石蜡包埋的肺腺癌标本的ALK基因表达情况,分析比较阳性组与阴性组患者在临床病理特征及预后的差异性。结果:ALK基因表达率在≤60岁组患者中表达率较>60岁组高(χ2=6.117,P<0.05);在不吸烟组患者中表达率较吸烟组患者高(χ2=12.124,P<0.05);而与性别无相关性(χ2=2.950,P>0.05),与TNM分期无相关性(χ2=3.563,P>0.05),与淋巴结转移亦无相关性(χ2=0.737,P>0.05)。ALK基因阳性组患者3年生存率低于阴性组(43.5%VS 71.6%,χ2=7.552,P<0.05)。经KaplanMeier生存分析显示,ALK基因阳性组患者总生存期(OS)低于阴性组。阳性组患者中位生存期同样低于阴性组(33.5个月VS 49.1个月,P<0.05)。结论:ALK基因在年轻、无吸烟史的肺腺癌患者中的表达率较高;ALK基因阳性可能是影响肺腺癌患者预后不良的独立危险因素之一。

IASLC分级系统与Ⅰ期浸润性非黏液型肺腺癌患者预后关系的回顾性研究

目的:回顾性分析国际肺癌研究协会(IASLC)分级系统与Ⅰ期浸润性非黏液型肺腺癌临床病理特征的相关性及与患者预后的关系。方法:回顾性分析2015年1月至2018年12月就诊于天津市胸科医院的204例Ⅰ期浸润性非黏液型肺腺癌患者的临床病理资料及随访资料,根据IASLC分级系统对患者分组,采用单因素方差分析、χ2检验和Fisher精确检验分析IASLC分级与Ⅰ期浸润性非黏液型肺腺癌临床病理特征的相关性,及与肺腺癌患者预后的关系。通过Kaplan-Meier法计算浸润性非黏液型肺腺癌患者总生存率(overall survival,OS)、无复发生存率(recurrence-free survival,RFS);采用Log-rank法比较不同组间的差异性。使用单因素Cox回归、多因素Cox回归分析独立危险因素。结果:204例患者中IASLC分级为Ⅰ级108例,Ⅱ级66例,Ⅲ级30例。IASLC分级与性别(P=0.022)、吸烟史(P=0.041)、脉管侵犯(P=0.004)、胸膜累及(P=0.001)、病理分期(P<0.001)、肿瘤直径(P<0.001)均显著相关。单因素生存分析结果显示,胸膜累及(P=0.043)与IASLC分级(P<0.001)均对OS有显著影响;IASLC分级对RFS有显著影响(P<0.001)。多因素Cox回归分析显示肿瘤直径(P=0.005)与IASLC分级(P=0.002)是影响Ⅰ期肺腺癌患者OS的独立危险因素;肿瘤直径(P=0.007)、IASLC分级(P=0.003)是Ⅰ期肺腺癌患者RFS的独立危险因素。结论:IASLC分级为Ⅰ期浸润性非黏液型肺腺癌预后的独立预后因素,IASLC分级越高Ⅰ期浸润性非黏液型肺腺癌患者预后越差。该分级系统提供了一个新的预后分组模式,为Ⅰ期浸润性非黏液型肺腺癌患者的术后管理及治疗提供新思路。

Gli-1与EMT相关蛋白在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的:探讨胶质瘤相关癌基因同源蛋白-1(Gli-1)及上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白Snail、E-cadherin及N-cadherin在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及临床意义。方法:采用免疫组织化学法检测天津市胸科医院2010年1月至2012年2月经手术切除送检的67例NSCLC组织及20例正常肺组织中Gli-1、Snail、E-cadherin及N-cadherin蛋白的表达情况,分析其与患者临床病理特征及预后的关系;采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法测定Gli-1、Snail、E-cadherin及N-cadherin基因在20例NSCLC及其对应癌旁正常肺组织中m RNA的表达情况。结果:1)Gli-1、Snail、E-cadherin及N-cadherin在NSCLC组织中的阳性表达率分别为61.19%(41/67)、50.75%(34/67)、56.72%(38/67)、53.73%(36/67),在正常肺组织中的阳性表达率为20%(4/20)、10%(2/20)、100%(20/20)、5%(1/20),表达差异具有统计学意义(P<0.05);2)患者癌组织中Gli-1高表达与淋巴结转移、分化程度和临床分期密切相关(P<0.05),与性别、年龄、肿物大小和病理分型无相关性;Gli-1的表达与E-cadherin的表达呈负相关(r=-0.325,P<0.05),与Snail、N-cadherin的表达呈正相关(r=0.379、r=0.490,P<0.05);3)RT-PCR结果显示,Gli-1、Snail和N-cadherin m RNA的表达量高于正常余肺组织(P<0.05),E-cadherin m RNA的表达量低于正常余肺组织(P<0.05);4)Gli-1、Snail和N-cadherin高表达的患者表现出更差的预后和更低的生存率(P<0.05),E-cadherin阴性组的患者较阳性组患者显示出更差的预后和更低的生存率,差异具有统计学意义(P<0.05),Cox比例风险回归模型分析结果显示,E-cadherin阴性、淋巴结转移、临床分期、分化程度是影响NSCLC患者预后的独立危险因素。结论:在NSCLC中,Hedgehog信号通路的异常活化与EMT存在密切相关性,Gli-1与EMT相关蛋白的表达对判断NSCLC患者的临床特征及预后具有一定提示作用。

PCR-TGGE法检测p53基因突变诊断肺癌淋巴结微转移

背景与目的转移是影响肺癌患者预后的重要因素之一,但在淋巴结内存在少量癌细胞时常规的检测方法难以发现。本研究的目的是探讨检测肺癌相关淋巴结内微转移存在的敏感方法。方法利用温度梯度凝胶电泳(temperaturegradientgelelectrophoresis,TGGE)方法,对39例原发性肺癌患者的肿瘤组织及其相关的110枚淋巴结,进行p53基因(外显子5,6,7,8)的突变检测,并对部分淋巴结采用无间隔连续切片,证实微转移存在。结果在39例肺癌患者中,23例原发肿瘤检测出p53基因突变,在相应的67枚淋巴结中,40枚淋巴结显示p53基因突变,且与原发灶变化一致;而在常规病理组织学检查时,仅26枚淋巴结存在肿瘤转移。原发肿瘤无p53基因突变者的43枚淋巴结和10枚非瘤患者淋巴结,均无p53基因突变。对常规病理组织学检查阴性,PCR-TGGE检测有p53基因突变的14枚淋巴结,进行无间隔连续切片,在4枚淋巴结中证实有微转移存在。结论p53基因突变的检测发现了肺癌淋巴结中微转移的存在,可以作为常规病理组织学检查的补充。

RhoB和E-cadherin在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中RhoB和E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达及其临床意义。方法采用免疫组化Super Pic TureTMPolymer二步法,检测116例NSCLC组织(NSCLC组)和同期116例正常余肺组织(正常组)中RhoB和E-cadherin的表达,并分析其表达与患者临床病理特征及预后的关系。结果 NSCLC组RhoB、E-cadherin阳性表达率均低于正常组(57.76%vs 87.07%,54.31%vs 85.34%,均P<0.01)。NSCLC组织中RhoB的表达强度在不同肿瘤病理类型、肿瘤分化程度及淋巴结转移情况间的差异有统计学意义,E-cadherin的表达强度在不同TNM分期、肿瘤分化程度及淋巴结转移情况间的差异有统计学意义。NSCLC组RhoB与E-cadherin的表达呈正相关(r=0.503,P<0.01)。RhoB高表达的患者3年生存率高于低表达者(83.93%vs 40.00%,Log-rankχ2=18.992,P<0.01);Ecadherin高表达的患者3年生存率高于低表达者(85.11%vs 44.93%,Log-rankχ2=16.680,P<0.01)。RhoB和E-cadherin共同低表达、淋巴结转移是影响NSCLC患者预后的危险因素。结论 RhoB与E-cadherin在NSCLC组织中的表达呈现较好的相关性,检测二者的表达对判断NSCLC患者的临床病理学特征及预后有一定提示作用。

Ki67、bcl-2、bax蛋白在非小细胞肺癌中的表达及预后价值

目的评价增生细胞标志Ki67蛋白及凋亡调节因子bcl-2蛋白、bax蛋白在非小细胞肺癌中表达的临床意义和预后价值。方法用Ki67b、cl-2、bax抗体对51例非小细胞肺癌标本进行免疫组化染色,按阳性及阴性分组。结果Ki67蛋白阳性率为29.4%,Ki67蛋白表达在T分期中不同,在T2期表达强度最高(P=0.033),Ki67蛋白阳性者生存期较阴性者缩短(P=0.013);bcl-2蛋白阳性率为33.3%,bcl-2蛋白表达与临床病理特征无关,与生存期无关;bax蛋白阳性率为35.3%,bax蛋白表达在鳞、腺癌之间不同(P=0.040),bax蛋白表达与生存期无关。多因素COX回归分析显示,进入回归方程的为肺癌分期及Ki67蛋白。结论Ki67蛋白作为增生细胞的标志与预后相关,Ki67蛋白阳性者预后差。Ki67蛋白有可能成为判断非小细胞肺癌预后的一个有价值的分子标志。

柴胡合剂对实验性肝纤维化的防治作用

研究柴胡合剂对大鼠四氯化碳肝纤维化模型的作用。方法：２２只大鼠随机分为正常对照组（Ａ组）、病理模型组（Ｂ组）和柴胡合剂治疗组（Ｃ组）。其中Ｂ和Ｃ两组动物皮下注射４０％四氯化碳橄榄油溶液，每周２次，共１１周。自第５周予以Ｃ组动物柴胡合剂稀释液灌胃，每日１次，共７周。结果：柴胡合剂治疗组的血清Ⅲ型前胶原与透明质酸水平、肝匀浆羟脯氨酸含量明显低于病理模型组（Ｐ＜０．０１）。形态学观察显示柴胡合剂治疗组的肝细胞坏死及肝纤维化程度明显为轻，且脾脏结构破坏也较轻。结论：柴胡合剂具有良好的抗实验性肝纤维化的作用。

非小细胞肺癌患者EGFR基因突变与CT征象及临床特征的关系

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLCs)患者表皮生长因子受体(EGFR)基因突变与CT征像及临床特征的关系。方法回顾性分析2014年9月—2016年7月我院收治的187例接受EGFR突变基因检测的NSCLCs中腺癌患者的临床资料,其中EGFR有效突变67例(有效突变组)、未有效突变120例(非有效突变组)。2组患者临床资料肺部CT影像学资料完整,分别采用单因素和多因素Logistic回归分析NSCLCs患者发生EGFR的影响因素。结果与非有效突变组比较,EGFR有效突变组中女性患病比例较高,吸烟指数较低,患者肺组织病灶CT表现为边缘较清晰,呈现分叶、毛刺,病灶多含有磨玻璃影(GGO)成分,伴有气道支气管征和胸膜凹陷征的表现,并易伴发癌性淋巴管炎和肺转移(均P<0.05)。2组肺组织出现坏死、空洞、钙化、晕征和空泡征的比例差异无统计学意义(P>0.05)。Logistic回归分析显示,女性、含有GGO成分、毛刺、有气道受累、癌性淋巴管炎是NSCLCs患者发生EGFR有效突变的危险因素。结论 EGFR有效突变好发于女性,其CT的可靠预测征象为含有GGO成分、毛刺、含气支气管征、癌性淋巴管炎。对临床中不易获取病理的危重患者,进行EGFR有效突变的CT影像学评估及预后预测具有一定指导意义。

组织工程心脏瓣膜体外构建的初步研究

目的:初步体外构建组织工程人工心脏瓣膜。方法:种子细胞选用胸骨骨髓,抽取后分离出人骨髓间充质干细胞,体外培养,扩增待用。脱细胞瓣膜支架的构建应用破膜剂曲拉通-脱氧胆酸钠对新鲜猪主动脉瓣膜36片(实验组)进行处理48h后,与对照组未经处理的猪主动脉瓣膜(36片)进行对比,在光镜和电镜下观察脱细胞效果。将人骨髓间充质干细胞接种于脱细胞瓣膜支架上静态培养7d,观察细胞-支架复合体生长状况。结果:曲拉通-脱氧胆酸钠法脱细胞彻底,保持原有纤维结构。种植的人骨髓间充质干细胞7d后可生长于瓣膜支架的表面。结论:曲拉通-脱氧胆酸钠法是一种较为理想的猪瓣膜脱细胞方法;人骨髓间充质干细胞能在脱细胞猪瓣膜支架上较好地黏附和生长,从而初步构建组织工程人工心脏瓣膜。

Rac1和NF-κBp65的表达与非小细胞肺癌转移及预后的关系

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中Ras相关的C3肉毒素底物1(Rac1)和核转录因子(NF)-κBp65的表达及其临床意义。方法采用免疫组化Super Pic TureTM Polymer二步法,检测112例石蜡包埋的NSCLC组织及112例相同患者石蜡包埋的正常余肺组织Rac1和NF-κBp65的表达。结果 NSCLC组织中Rac1及NF-κBp65的表达明显高于正常余肺组织,且两者的表达强度在NSCLC组织中呈正相关(r=0.549,P<0.001)。在肿瘤不同分化程度、TNM分期及淋巴结转移情况的NSCLC患者的Rac1的表达强度差异有统计学意义;在不同TNM分期及淋巴结转移情况的NSCLC患者的NF-κBp65的表达强度差异有统计学意义;而在低分化、高分期及有淋巴结转移的NSCLC患者组织中,2种指标协同表达的现象更容易出现,且差异有统计学意义(P<0.05)。Rac1高表达组的3年生存率(35.29%)低于低表达组(79.07%);NF-κBp65高表达组的3年生存率(40.28%)低于低表达组(74.36%);Rac1与NF-κBp65共同高表达组的3年生存率(37.70%)低于仅1种蛋白高表达(61.11%)及共同低表达者(81.25%)。Rac1和NF-κBp65共同高表达及淋巴结转移是预后的不良因素(P<0.05)。结论在NSCLC组织中,Rac1和NF-κBp65的表达呈现较好的相关性,检测两者的表达会对NSCLC患者的临床病理学特征及预后起一定的提示作用。

肺不典型腺瘤样增生与细支气管肺泡癌

目的：探讨肺泡上皮不典型腺瘤样增生（AAH）与细支气管肺泡癌（BAC）发生的相关性。方法：采用形态学测量法、免疫组化及电镜对7例BAC、4例轻度AAH、5例重度AAH进行检测。结果：重度AAH与BAC的核区平均值比轻度AAH明显增大（P＜0．05）；p53蛋白在轻度AAH不表达（0／4），重度AAH和BAC的阳性率分别为40％（2／5），57％（4／7）。结论：BAC的发生是多步骤、多阶段逐步形成的，AAH与BAC的发生有着密切关系，可能是其真正的癌前病变。