微量葡萄糖测定中不同色原的作用研究

目的 :评价色原对Trinder’方法测定微量葡萄糖的呈色效果。方法 :应用苯酚和 3种人工合成色原 :3,5 -二氯 - 2羟基苯磺酸钠 (色原 1)、N - 2 - [乙基 (3-甲基苯基 )氨基 ]乙基乙酰胺 (色原 2 )及N -乙基 -N -乙磺酸钠间甲苯胺 (色原 3)对葡萄糖氧化酶偶联过氧化物酶法测定微量葡萄糖的作用特点进行研究。结果 :使用 4种色原物质测定葡萄糖的反应曲线均类似 ,但呈色强度不同 ,苯酚呈色强度最差 ,色原 1最强 ,色原 2和 3类似 ;反应曲线为类似 0级反应模式 ;两点定标测定优于单点定标测定 ;批内不精密度范围 ,苯酚 :0 .79%～ 8.6 1% ,色原 1:0 .6 2 %～ 1.2 8% ,色原 2 :0 .83%～ 2 .6 0 % ,色原 3:0 .37%～ 3.80 % ,色原之间差异无统计学意义。结论 :在建立新的检测方法前要对色原进行评价。

吡喃糖氧化酶底物特异性研究

目的:评价吡喃糖氧化酶(PROD)对不同的糖底物、甘油和乙二醇的催化作用。方法:应用相同酶试剂和固定参数对12种糖、甘油和乙二醇进行催化率实验。结果:将其对葡萄糖的催化作用定为100%时,PROD对单糖中的山梨糖催化率最高(87.51%),其次是木糖(83.17%)和1,5-脱水-D-山梨醇(82.32%),半乳糖为40.69%,对果糖、甘梨醇、山梨醇几乎无催化作用;PROD对双糖中的麦芽糖催化率为3.19%,对乳糖、蔗糖、纤维二糖几乎无催化作用;对同等浓度的非糖类物质甘油和乙二醇的催化作用很小,但是对高浓度的甘油和乙二醇(应用浓度在2.2%～3.3%)催化活性很高。结论:建立1,5-脱水-D-山梨醇测定方法前应进行PROD对不同糖底物、甘油和乙二醇的特异性催化实验。