大鼠体外循环后小肠黏膜基质金属蛋白酶9及其组织型抑制剂1表达与肠屏障功能的关系

目的探讨大鼠体外循环(CPB)后小肠黏膜基质金属蛋白酶9(MMP-9)及其组织型抑制剂(TIMP-1)表达与肠屏障功能的关系,为CPB后肠屏障功能保护提供新靶点。方法健康成年雄性清洁级SD大鼠40只随机分为CPB组(n=20)和假手术组(SH组,n=20)。另取10只作为正常对照组(N组)。分光光度法测定CPB后血浆二胺氧化酶(DAO)活性,转录酶-逆转录聚合酶链反应及蛋白质斑迹法检测肠黏膜MMP-9,TIMP-1的mRNA和蛋白表达变化,明胶酶谱法测定肠黏膜MMP-9活性变化,并进行统计学分析。结果 CPB组血浆中DAO活性比SH组和N组显著增高(P<0.05);RT-PCR显示CPB组小肠黏膜MMP-9 mRNA表达水平较N组和SH组明显增加(P<0.01);CPB组TIMP-1 mRNA表达水平与N组和SH组无显著差异(P>0.05);Western blot显示CPB组MMP-9蛋白表达显著高于SH组和N组(P<0.01);三组之间TIMP-1蛋白表达无明显差异(P>0.05)。凝胶成像系统分析结果显示,CPB组小肠黏膜组织中MMP-9、MMP-2活性与SH和N组比较,均显著增强(P<0.01);线性回归及相关分析结果显示:CPB后肠黏膜组织MMP-9活性和血浆DAO活性呈显著正相关(r=0.821,P<0.01)。结论 CPB后小肠黏膜MMP-9表达上调及其酶活性增加导致MMP-9/TIMP-1失衡在肠屏障功能障碍发生发展中起重要作用。调控MMP-9活性有可能成为CPB过程中肠屏障功能保护新靶点。

丙胺酰-谷氨酰胺预处理对大鼠体外循环后肠黏膜屏障功能的影响

目的 观察丙胺酰-谷氨酰胺（Ala-Gln）预处理对大鼠体外循环（CPB）后血浆和肠黏膜二胺氧化酶（DAO）活性,血浆D-乳酸及脂多糖（LPS）浓度的影响,探讨Ala-Gln对肠屏障功能的保护作用.方法 健康成年雄性清洁级SD大鼠60只,随机分为3组,每组20只：实验组（G组,丙胺酰-谷氨酰胺预处理后行CPB）,CPB对照组（CPB组）、假手术组（SH组,仅在各部位进行插管操作,不转流）.分光光度法测定DAO活性和血浆D-乳酸浓度.过氯酸新法预处理,血浆鲎试剂显色法测定血浆内毒素浓度.结果 与SH组相比,G组和CPB组血浆中DAO活性、D-乳酸浓度、LPS浓度显著升高,肠黏膜组织中DAO活性显著降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）.与CPB组相比,G组血浆DAO活性、D-乳酸浓度、LPS浓度显著降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）;G组肠黏膜组织中DAO活性高于CPB组,但差异无统计学意义（P =0.065）.结论 Ala-Gln预处理能降低肠通透性,是体外循环肠黏膜屏障功能保护的新途径.