低氧联合运动对大鼠骨骼肌线粒体自噬的影响

目的:观察慢性低氧及低氧联合运动对骨骼肌线粒体自噬的影响,并探讨低氧诱导因子-1α(HIF-1α)在其中的作用。方法:56只健康雄性SD大鼠随机分为:常氧对照组(NC)、低氧对照组(HC)、低氧联合运动组(HT,n=8)、低氧+二甲基亚砜(DMSO)组(HC+D)、低氧+HIF-1α抑制剂YC-1组(HC+Y)、低氧联合运动+DMSO组(HT+D)和低氧联合运动+HIF-1α抑制剂YC-1组(HT+Y)。低氧干预为常压低氧帐篷,模拟11.3%氧浓度。运动干预为低氧帐篷内53%VO2max跑台训练,1h/d。HIF-1α抑制剂组采用YC-1腹腔注射,4mg/kg,1次/d。DMSO组注射等体积1%DMSO。上述干预均持续4周。结果:HC组与NC组比较,线粒体膜电位、ATP合成活力显著降低(P<0.05),活性氧族(ROS)生成速率、PINK1、Parkin、Bnip3和HIF-1α蛋白表达显著升高(P<0.05)。HT组与HC组比较,线粒体膜电位、ATP合成活力、Parkin、Bnip3和HIF-1α表达显著升高(P<0.05),ROS生成速率和PINK1表达显著降低(P<0.05)。YC-1干预HC和HT组,均造成线粒体膜电位、ATP合成活力、Bnip3和HIF-1α表达显著降低(P<0.05),ROS生成速率和PINK1表达显著升高(P<0.05)。结论:低氧联合运动可通过HIF-1α途径促进了低氧诱导的Bnip3介导的线粒体自噬保护机制,从而提高骨骼肌线粒体的质量。

IL-6对人卵巢癌细胞体外增殖及锚定非依赖生长能力的影响

目的研究内源性IL-6对卵巢癌(ovarian cancer,OVCA)细胞体外增殖及锚定非依赖生长能力的影响并探讨其作用机制。方法应用前期建立的内源性过表达IL-6的人卵巢癌A2780细胞株和内源性抑制IL-6表达的人卵巢癌SKOV-3细胞株,分别采用MTT法、双层软琼脂集落形成实验、流式细胞术、RT-PCR和Western blot技术检测IL-6对OVCA增殖及锚定非依赖生长能力的影响,并对其作用机制进行研究。结果与对照组细胞相比,过表达IL-6的A2780细胞的增殖及锚定非依赖性生长能力增强(P<0.01),而IL-6抑制表达的SKOV-3细胞则降低(P<0.01)。进一步研究表明IL-6促OVCA细胞增殖作用是通过改变细胞周期分布而非抑制细胞凋亡来实现的;过表达IL-6可显著提高A2780细胞的Cyclin D1、Cyclin B1的表达水平,而抑制IL-6表达则明显降低SKOV-3细胞的Cyclin D1、Cyclin B1的表达水平;应用ERK或Akt特异性信号阻断剂可显著抑制高表达IL-6的A2780细胞增殖及Cyclin D1、Cyclin B1的表达水平。结论 IL-6能促进OVCA细胞的增殖和锚定非依赖性生长,IL-6促OVCA细胞增殖作用是通过增加Cyclin D1、Cyclin B1表达水平从而改变细胞周期分布来实现的,并与活化的PI3K/Akt、Ras/MEK/ERK信号通路有关。

低氧复合运动抑制低氧诱导的骨骼肌线粒体DNA氧化损伤

本文旨在观察低氧复合运动对低氧状态下大鼠骨骼肌线粒体DNA(mtDNA)氧化损伤及线粒体8-氧鸟嘌呤DNA糖基化酶(OGG1)表达的影响,并探讨其可能机制。雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为常氧对照组(NC)、常氧运动组(NT)、低氧对照组(HC)和低氧复合运动组(HT)。低氧干预为常压低氧帐篷,11.3%氧浓度持续暴露4周。运动干预为跑台训练(5o,15m/min),60 min/d,5 d/周,共4周。结果显示,HC组与NC组比较,线粒体复合体I、II、IV、ATP合成酶活性和膜电位显著降低(P<0.05或P<0.01),锰超氧化物歧化酶(MnSOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和OGG1活性显著降低(P<0.05或P<0.01),线粒体活性氧(ROS)生成速率和mtDNA中8-oxodG含量显著升高(P<0.01),SIRT3蛋白表达、骨骼肌和线粒体烟碱胺腺嘌呤二核苷酸氧化还原型比值([NAD+]/[NADH])显著降低(P<0.05或P<0.01)。HT组和HC组比较,线粒体复合体I、II、IV、ATP合成酶活性和膜电位显著升高(P<0.05或P<0.01),MnSOD、GPx、OGG1活性和线粒体OGG1蛋白表达显著升高(P<0.01),线粒体ROS生成速率和mtDNA中8-oxodG含量显著降低(P<0.01),SIRT3蛋白表达、骨骼肌和线粒体[NAD+]/[NADH]显著升高(P<0.05或P<0.01)。以上结果提示,低氧复合运动可上调线粒体OGG1和抗氧化酶,抑制低氧诱导的mtDNA氧化损伤,运动训练对[NAD+]/[NADH]和SIRT3的上调可能参与了对骨骼肌线粒体低氧耐受能力的增强调控。