天津沿海菲律宾蛤仔人工育苗技术的初步研究

利用自然海水和天然饵料,采用无泥砂采苗方法,在天津沿海首次成功开展了菲律宾蛤仔工厂化育苗。幼虫初始壳长93.8μm,壳长平均日增长8.3μm,成活率41.0%;第15-23 d为变态期,壳长平均日增长12.9μm,变态率47.8%;变态后至第55 d,壳长平均日增长33.2μm,成活率76.0%。本次育苗试验充分利用天津沿海水质条件与环境特点,改进育苗方法,降低生产成本,建立了适于天津海区的菲律宾蛤仔人工育苗工艺,共得到双水管稚贝约1 800万枚。

高密度养殖凡纳滨对虾的蛋白质生态营养需要量

在高密度养殖条件(平均养殖密度3.1kg/m3)下,用5种蛋白质水平(31%、35%、39%、43%、47%,分别以A～E组表示)的饲料,投喂体质量(6.2±0.2)g的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei),每个处理组设3个重复,每个重复30尾虾,实验期60d,探讨蛋白质营养对生长、环境因子、排泄与饲料消化特征的影响。结果表明:(1)饲料蛋白水平>39%时具有显著促进对虾生长的效果。随着蛋白水平的提高,增重率先增加后降低,饲料系数则相反。(2)养殖水体中氨氮、亚硝氮和磷酸盐浓度随饲料蛋白质水平增加而显著升高,E组与其他各组差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)。(3)随着饲料蛋白质含量增加,饲料总消化率显著下降,而蛋白质消化率显著升高(。4)创新建立的对虾日粮蛋白质水平与日增氮、日排有害氮的定量动态变化关系,使蛋白质生态营养需要量得以量化确定。高密度养殖凡纳滨对虾获得最大增重的蛋白质需要量为43.73%,获得最佳生长和氮减排的蛋白质需要量为40.42%。

蛋白质营养对高密度养殖凡纳滨对虾生长与免疫力的影响

在高密度养殖条件下,进行单因素随机设计动物试验。用5种饲料(蛋白质水平31%、35%、39%、43%、47%,以A～E组表示)分别投喂平均体质量6.2g±0.2g、平均养殖密度3.1kg/m3的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei),探寻蛋白质营养对虾生长、免疫、水质、抗胁迫的影响特征。结果表明:(1)中高蛋白质水平具有显著促进对虾生长的效果,随着蛋白水平的提高,特定生长率先增加后降低,饲料系数正好相反,D组两指标最佳,分别为110.98%和2.54;C、D、E组差异不显著。(2)中高蛋白质水平有利于提高对虾多数免疫指标的活力,血淋巴中血细胞浓度、T-AOC活力、POD活力、总蛋白含量、白蛋白、血蓝蛋白含量,随着蛋白质水平提高先增加后降低,前5指标含量均以D组最高,比A组显著提高16.8%～33.9%;而血蓝蛋白含量C组最高,比A组提高15.0%。(3)高蛋白质水平有利于提高对虾SOD活力,也显著增强抗低盐胁迫的能力,但同时极显著加大了水环境中氨氮和亚硝氮的污染。(4)在我国北方集约化高密度养殖条件下,凡纳滨对虾中后期生长阶段适宜的饲料蛋白质营养水平为39%～43%。

急性温度胁迫对半滑舌鳎血液指标的影响

为研究急性温度胁迫对半滑舌鳎血液生理指标的影响,将半滑舌鳎在17℃海水中驯化2周后直接放入21℃(T21)、24℃(T24)、27℃(T27)的海水中热冲击1.5 h,再放回17℃海水中饲养。分别在温度胁迫前(对照)、温度胁迫后0、6、12、24、48、96 h,尾柄采血,检测血浆中总超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、还原型谷胱甘肽(GSH)、白蛋白/球蛋白(A/G)、溶菌酶(LZM)、血糖(Glu)、甘油三酯(TG)、胆固醇(CHO)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨基转移酶(AST)等指标。试验结果表明,温度胁迫后SOD先降后升,胁迫后12 h降至最低;CAT在胁迫后12 h急剧下降,之后维持较低水平;温度胁迫后GSH和MDA先升高后降至对照水平;T21、T24组GSH在胁迫后12 h升至最高,T27组24 h升至最高;MDA在胁迫后6 h升至最高;温度胁迫后6 h LZM急剧升高,之后维持较高水平;温度胁迫后A/G先降后升,12 h降至最低,96 h恢复至对照组水平;Glu在胁迫后6 h急剧降低,之后维持在较低水平;TG在胁迫后出现波动,并有恢复至对照组水平的趋势;CHO在胁迫后整体呈下降趋势。ALT在胁迫后先升(12 h达峰值)后降,T21和T24组在48 h恢复至对照组水平,T27组在96 h仍高于对照组。T27组AST先升高(6 h达峰值)后恢复至对照组水平,T21和T24组AST在胁迫后无明显变化。

不同密度对半滑舌鳎生长和血液生化指标的影响

试验分为低(2.32 kg.m-2)、中(4.83 kg.m-2)和高(8.20 kg.m-2)3个密度,每个梯度3个重复。结果表明,经过56 d的饲养,高密度组的末体重、平均增重率、特定生长率、摄食率显著低于低、中密度组(P<0.05),高密度组饲料系数显著高于低密度组(P<0.05),高密度组显著低于中、低密度组(P<0.05);在抗氧化指标方面,高密度组肝脏超氧化物歧化酶(SOD)的比活力显著低于中、低密度组(P<0.05),SOD活力在其他组织中差异不显著(P>0.05),过氧化氢酶(CAT)、还原型谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)在各组织中的差异均不显著(P>0.05);溶菌酶活力随着密度的升高而降低,低密度组显著高于中、高密度组(P<0.05),补体C3、C4含量随密度的升高而降低,各密度组之间差异显著(P<0.05)。白球比值(A/G)、甘油三酯(TG)、胆固醇(CHO)、总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、葡萄糖(Glu)在各密度之间差异不显著(P>0.05),丙氨酸氨基转移酶(ALT)低密度组显著低于高密度组(P<0.05),天门冬氨酸氨基转移酶(AST)低、中密度组显著低于高密度组(P<0.05)。当养殖密度达到8.20 kg.m-2时,机体健康会产生负面影响。

捕捞胁迫对半滑舌鳎血液生化指标的影响

分别在捕捞胁迫前(即0h)和捕捞胁迫后的4、12、24、48、96h抽血,测定血浆中的生化指标,研究捕捞胁迫对半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis Guntuer,(41.08士0.52)g)部分血液指标的影响。结果表明,胁迫后超氧化物歧化酶(SOD)活力下降,24h恢复为胁迫前水平;过氧化氢酶(CAT)活力胁迫后升高,24h恢复为胁迫前水平;还原型谷胱甘肽(GSH)含量在胁迫后先升高后下降,96h恢复为胁迫前水平;丙二醛(MDA)含量在胁迫后升高,48h恢复胁迫前水平;溶菌酶(LZM)活力在胁迫后4h开始下降,并维持较低水平;补体C3、C4含量胁迫后4h降低,随后恢复至胁迫前水平;胆固醇(CHO)、葡萄糖(Glu)、总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)含量均在胁迫后12h升高并且一直维持在较高水平;丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)含量在胁迫后4h升高,随后恢复至胁迫前水平;甘油三酯(TG)没有显著变化。

光照周期对半滑舌鳎生长和抗氧化指标的影响

在水温25.2～28.2℃下,将半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)(体质量120.65±1.57g)饲养于底面积为0.75m2的圆形水族内(30尾/箱),用黑塑料布遮光,研究了4种光照周期(0L/24D,6L/18D,18L/6D,24L/0D)对生长和抗氧化指标的影响。28 d的饲养结果表明:光照周期为6L/18D时,饲料系数最低、增重率和净增重最大;光照周期为18L/6D时,血清中超氧化物歧化酶(SOD)活力最高,而在24L/0D光照周期下,肝脏中SOD比活力最高,在四种光照周期下,脾脏、肾脏SOD比活力差异不显著(P>0.05);光照周期为6L/18D时,血清过氧化氢酶(CAT)活力最高,6L/18D组鱼脾脏中CAT比活力显著高于其他组(P<0.05);肝脏、肾脏中CAT的比活力差异不显著(P>0.05);肝脏的还原型谷胱甘肽(GSH)含量均显著高于血清、脾脏和肾脏,6L/18D组鱼肝脏中(GSH含量显著高于0L/24D组和24L/0D组(P<0.05);6L/18D组血清中丙二醛(MDA)含量显著低于其他组(P<0.05),肝脏中0L/24D组MDA含量最低,18L/6D组MDA含量显著高于0L/24D组(P<0.05),6L/18D组鱼脾脏、肾脏中MDA含量最低。光照周期为6L/18D时最适合半滑舌鳎生长。

光照强度对半滑舌鳎血液指标的影响

试验研究了不同光照强度对半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)血液指标的影响。设置6个光照强度梯度,分别为正常养殖组(光照强度10～30lx,光周期为6L:18D)、0、150、600、1300和2000lx组,光照周期为12L:12D。在试验的第0、24、48、96和192h取血,检测血浆中总超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽(GSH)、白蛋白/球蛋白(A/G)、溶菌酶(LZM)、血糖(Glu)、甘油三酯(TG)、胆固醇(CHO)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨基转移酶(AST)等指标。结果显示,光照强度为600、1300、2000lx组SOD、CAT、GSH在胁迫24h后降至最低,随后逐渐上升;MDA含量在胁迫48h后升至最高并与0h组差异显著(P<0.05),随后逐渐上升与初始值接近。光照强度为0、150、600lx组LZM活力在胁迫48h后最低并与0h组差异显著(P<0.05)。0、150lx组A/G值在试验期间与0h组差异显著(P<0.05)。Glu、TG、CHO浓度在试验期间有波动,但差异不显著(P>0.05)。150、600、1300、2000lx组在胁迫24h后的ALT活力与0h组差异显著(P<0.05),并维持较高水平。150、600、1300、2000lx组在胁迫24h后的AST活力与0h组差异显著(P<0.05),150、600、1300lx组在试验期间恢复为初始水平,而2000lx组仍维持较高水平。

捕捞胁迫对珍珠龙胆石斑鱼血清酶活力及葡萄糖含量的影响

为探究捕捞胁迫对珍珠龙胆石斑鱼血清酶及葡萄糖含量的变化。捕捞胁迫15 min,分别在捕捞胁迫开始前和捕捞胁迫后的0、6、12、24、48、96 h取血进行测定。结果表明:总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力在捕捞胁迫后12 h降到最低值,总体呈先下降后升高趋势,各胁迫组均显著低于胁迫前水平(P<0.05)。谷胱甘肽(GSH)含量在胁迫后呈上升趋势,24 h达到最大值,胁迫后0~48 h各组均显著高于胁迫前(P<0.05),到96 h逐渐恢复到胁迫前水平。总抗氧化能力(T-AOC)活力呈现先下降后上升的趋势,在胁迫后6 h下降到最低值,24 h达到最大值,且与胁迫前差异不显著(P>0.05)。谷丙转氨酶和谷草转氨酶活力总体呈上升—下降—上升—下降的波浪式变化趋势。二者均在胁迫后24 h达到最大值。之后GOT酶活力逐渐下降并趋于胁迫前水平,且差异不显著(P>0.05)。而胁迫后的GPT酶活力值均显著高于胁迫前水平(P<0.05),胁迫后24~48 h显著高于其余时间组(P<0.05)。碱性磷酸酶(AKP)活力变化趋势与酸性磷酸酶(ACP)活力基本一致,分别在胁迫后的48 h、24 h达到最大值,随后呈下降趋势。AKP酶活力在96 h趋于胁迫前水平,差异不显著(P>0.05)。而ACP在96 h酶活力值仍保持较高水平,显著高于胁迫前水平(P<0.05)。在捕捞胁迫后乳酸脱氢酶(LDH)活力呈上升的趋势,在捕捞胁迫后6 h的LDH活力达到最高值,随后LDH活力逐渐下降到胁迫前水平。捕捞胁迫后0~6 h的LDH活力值均显著高于胁迫前和在胁迫后其余各时间组(P<0.05)。葡萄糖(GLU)含量在捕捞胁迫后总体呈现的趋势为先上升后下降,最后恢复至胁迫前水平,在胁迫后6 h达到最大值。综上,捕捞胁迫造成了珍珠龙胆石斑鱼的应激反应,但在胁迫后96 h血清部分生理指标趋于胁迫前水平,对其生理机能不会产生持久性影响。

溃疡病的发生对半滑舌鳎体表黏膜菌群结构的影响

溃疡病是危害养殖半滑舌鳎的一种流行性疾病,黏膜菌群在维持鱼体健康中发挥了重要的作用。为了分析溃疡病的发生对半滑舌鳎体表黏膜菌群结构的影响,利用高通量测序技术对体表黏膜菌群16S rRNA基因的V4高变异区进行测序,分析了健康(MH)、患溃疡病早期(体表散布小的溃疡点)(PMD)和晚期(体表有明显溃疡灶)(MD)的半滑舌鳎体表黏膜菌群结构。结果表明:在MH、PMD和MD样本中分别鉴定到了4036、1758、1763个OUTs(Operational Taxonomic Units)。在属分类水平上,MH样品中Pseudoalteromonas、unidentified_Chloroplast、Blautia和Bifidobacterium丰度较高,而在PMD和MD样品中,其优势菌群是Pseudomonas和Vibrio。物种注释表明,MH样品中的细菌菌群结构比PMD和MD样品中的细菌群落更具多样化。细菌分离结果显示,在PMD和MD样品中发现了更多潜在的致病菌。综上,在养殖半滑舌鳎溃疡病的发生过程中,鱼体表皮黏膜细菌菌群的丰度、多样性及均一性水平均显著下降。研究结果为阐明半滑舌鳎溃疡病的发生机制提供了新思路。