黄芪甲苷调控线粒体自噬减轻5-Fu诱导老龄大鼠心肌毒性的实验研究

目的探索黄芪甲苷(AS-Ⅳ)通过PINK1/Parkin信号通路调控自噬减轻5-氟尿嘧啶(5-Fu)诱导老龄大鼠心肌毒性的疗效及机制。方法18月龄雄性SD大鼠36只,按随机数字表法分为对照组、模型组、AS-Ⅳ组,每组12只。以5-Fu注射液30 mg/kg,腹腔注射,隔日1次,连续7次建立模型组;AS-Ⅳ稀释液,20 mg/kg,灌胃,每日1次,连续14次,建立AS-Ⅳ组。检测血清肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌线粒体腺苷三磷酸(ATP)及膜电位水平、行HE及Masson染色观察心肌病理改变、免疫荧光染色检测微管相关蛋白LC3Ⅱ表达、电镜观察线粒体结构并采用Western blot检测PINK1/Parkin通路关键分子PINK1、Parkin、Beclin1、LAMP、LC3蛋白表达。结果与模型组相比,AS-Ⅳ可减缓大鼠体质量下降,降低心肌cTnI及CK-MB水平,抑制线粒体ATP水平下降(P<0.05)。与对照组相比,模型组心肌纤维排列紊乱,胶原纤维沉积,胶原容积百分比升高;经AS-Ⅳ干预后,胶原容积百分比减低(P<0.05)。电镜及LC3Ⅱ荧光染色显示,经AS-Ⅳ干预后,线粒体损伤程度减轻,LC3Ⅱ表达量减低(P<0.05)。Western blot结果提示AS-Ⅳ苷干预后Beclin1、PINK1、Parkin、LAMP和LC3Ⅱ/Ⅰ表达较模型组降低(P<0.05)。结论5-Fu可诱导心肌线粒体损伤,线粒体自噬过度,AS-Ⅳ可通过调节自噬减轻5-Fu心肌毒性。

黄芪甲苷减轻5-氟尿嘧啶诱导大鼠心肌细胞凋亡的实验研究

目的本研究评估黄芪甲苷对5-氟尿嘧啶诱导大鼠心肌损伤心肌结构及功能的保护作用,同时探索黄芪甲苷对心肌细胞凋亡的影响。方法选取8周龄雄性SD大鼠,分为对照组、模型组、黄芪甲苷干预组。以5-氟尿嘧啶注射液,隔日1次,腹腔注射7次建立心脏毒性模型组;干预组给与黄芪甲苷稀释液,灌胃,连续2周进行干预。检测血清心肌酶CK-MB浓度、心脏超声评估心脏结构及功能,TUNEL染色及Hoechst33258荧光染色评估心肌细胞凋亡,采用Western Blot检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2及Caspase3相对表达量。结果黄芪甲苷减轻大鼠血清心肌酶CK-MB浓度(P<0.05),同时拮抗心脏结构改变及减缓心脏射血分数下降。TUNEL及Hoechst33258凋亡染色中,黄芪甲苷组凋亡指数明显减低(P<0.05)。Western Blot结果提示,黄芪甲苷干预后,促凋亡蛋白Bax及Caspase3表达降低(P<0.05),抑凋亡蛋白Bcl-2表达升高。结论黄芪甲苷可通过抑制心肌细胞凋亡,减轻5-氟尿嘧啶诱导的心脏结构及功能损伤。